Исследование активности аланинаминотрансферазы и аспартатаминотрансферазы

от разных доноров. 

3

технологий.
Клеточные лизаты культивированных мезенхимальных стволовых клеток, выделенных из жировой ткани (МСК-ЖТ) двух доноров.

4

Донор №1 европейка
26 лет
Донор №2 европейка
27 лет

МСК культивировали в среде ά-МЕМ с добавлением антибиотиков (пенициллин/
стрептомицин), глутамина и 15% эмбриональной телячьей сыворотки

Культивирование проходило во флаконах «Costar» во влажной атмосфере при 5% СО2, температуре 37°С.

Клетки снимали с поверхности пластика с помощью 0,25% раствора трипсина в версене.

Использовали клетки 3-4 пассажа. Их центрифугировали при 100g в течение 5 минут. Надосадочную жидкость сливали, а осажденную клеточную суспензию лизировали с помощью 3-кратных циклов замораживании и быстрого размораживания.

миграция клеток, канцерогенез (Tatarskiy V. V., 2016)

Эмбриональное развитие, регенерация тканей,  пролиферативная активность (Cherepanov S. A. et al., 2015)

Notch

 Сигнальные пути

Sonic Hedgehog/
Patched
Wnt/β–катенин

R в RStudio 3.5.1 с дополнительными пакетами ggplot2, tidyverse, hrbrthemes, viridis.

Фотометрические

Методы

Биоинформационный анализ

6

АcАт и АлАт определялась при помощи наборов реагентов DiaSys (Германия) с использованием спектрофотометра UV-mini-1240, Shimadzu (длина волны - 340 нм).

Принцип метода: Активность аминотрансфераз определяется по скорости уменьшения NADH, оптическая плотность которого измеряется при 340 нм (в реакции с участием лактатдегидрогеназы)

исследований

исследований

лаборатории регенеративной медицины НИИ ЭОиБИТ

al., 1998)

аланинаминотрансферазы и аспартатаминотрансферазы с пролиферативной активностью мезенхимальных стволовых клеток. Вероятнее всего, участие данных аминотрансфераз в клеточном делении ограничивается их метаболической функцией.

13

transplantation in rats with acetaminophen liver injury //Stem Cell Research. – 2013. – Т. 11. – №. 3. – С. 1037-1044.
2. Zare H. et al. Bone marrow or adipose tissue mesenchymal stem cells: comparison of the therapeutic potentials in mice model of acute liver failure //Journal of cellular biochemistry. – 2018. – Т. 119. – №. 7. – С. 5834-5842.
3. del Caño-Ochoa F., Moreno-Morcillo M., Ramón-Maiques S. CAD, A Multienzymatic Protein at the Head of de Novo Pyrimidine Biosynthesis //Macromolecular Protein Complexes II: Structure and Function. – Springer, Cham, 2019. – С. 505-538.
4. Sato T. et al. Rheb protein binds CAD (carbamoyl-phosphate synthetase 2, aspartate transcarbamoylase, and dihydroorotase) protein in a GTP-and effector domain-dependent manner and influences its cellular localization and carbamoyl-phosphate synthetase (CPSase) activity //Journal of Biological Chemistry. – 2015. – Т. 290. – №. 2. – С. 1096-1105.
5. Rybko V.A., Kopnin B.P., Khromova N.V. et al. Role of Notch signaling in tumorigenesis: multiple mechanisms and therapeutic potential. Klinicheskaya onkogematologiya -Clinical Oncohematology 2011;4(2):103–10. 
6. MacDonald B.T., He X. Frizzled and LRP5/6 receptors for Wnt/-сatenin signaling. Cold Spring Harb Perspect Biol 2012;4(12).
7. Cherepanov S. A. et al. Hedgehog signaling in the pathogenesis of neuro-oncology diseases //Biomeditsinskaya khimiya. – 2015. – V. 61. – №. 3. – P. 332-342.
8. Tatarskiy V. V. The Wnt signaling pathway: prospects for pharmacological regulation //Advances in molecular oncology. – 2016. – Т. 3. – №. 1. – С. 28-31.