Техника приготовления препаратов микроорганизмов

Содержание

Слайд 2

Техника приготовления препарата фиксированных окрашенных клеток микроорганизмов

Техника приготовления препарата фиксированных окрашенных клеток микроорганизмов

Слайд 3

1. Пробирку с культурой держат в левой руке почти в горизонтальном

1. Пробирку с культурой держат в левой руке почти в горизонтальном

положении вблизи горелки.
2. Правой рукой вынимают ватную пробку из пробирки, зажимая ее между мизинцем и ладонью, а края пробирки обжигают на пламени горелки. Петлю держат в правой руке большим, указательным и средним пальцами.
3. Обожженной в пламени бактериологической иглой из пробирки берут небольшое количество микробной массы.
4. Если культуру берут из жидкой среды, не следует сильно наклонять пробирку, чтобы не смочить ее края и пробку.. обожженной в пламени бактериологической иглой из пробирки берут небольшое количество микробной массы. Если культуру берут из жидкой среды, не следует сильно наклонять пробирку, чтобы не смочить ее края и пробку.

1-й этап: Отбор культуры микроорганизма

Слайд 4

Бактериологическая петля для приготовления препаратов микроорганизмов

Бактериологическая петля для приготовления препаратов микроорганизмов

Слайд 5

2-й этап: приготовление мазка 5. После взятия культуры края пробирки и

2-й этап: приготовление мазка

5. После взятия культуры края пробирки и пробку

обжигают в пламени и пробирку закрывают.
6. Петлю с культурой микроорганизма бактериологической петлей вносят в предварит-ельно помещенную на предметное стекло каплю водопроводной воды и размазывают тонким слоем до получения мазка. Бактериологическую петлю до и после использо-вания прокаливают на пламени спиртовки.
Слайд 6

3-й этап: Высушивание мазка на воздухе Мазок высушивают при комнатной температуре и приступают в фиксации

3-й этап: Высушивание мазка на воздухе
Мазок высушивают при комнатной температуре и

приступают в фиксации
Слайд 7

4-й этап: Фиксация мазка жаром Цели фиксации: 1. Обезвреживание микроорганизма. 2.

4-й этап: Фиксация мазка жаром

Цели фиксации:
1. Обезвреживание микроорганизма.
2. Обеспечение лучшего

прикрепления мазка к стеклу.
3. Клетки становятся доступными к окрашиванию.
Слайд 8

5-й этап: Простое окрашивание фуксином – 2 минуты

5-й этап: Простое окрашивание фуксином – 2 минуты

Слайд 9

Заключительный этап 1. Смыв избытка красителя водопроводной водой. 2. Высушивание приготовленного мазка на воздухе.

Заключительный этап

1. Смыв избытка красителя водопроводной водой.
2. Высушивание приготовленного мазка на

воздухе.
Слайд 10

Техника микроскопирования препарата фиксированных окрашенных клеток

Техника микроскопирования препарата фиксированных окрашенных клеток

Слайд 11

Слайд 12

Работа с иммерсионными объективами х 90, х100 При использовании иммерсионного объектива

Работа с иммерсионными объективами х 90, х100

При использовании иммерсионного объектива вначале

центрируют оптическую часть микроскопа, поднимают конденсор
до упора вверх.
На предметное стекло с окрашенными препаратами наносят каплю иммерсионного масла.
Иммерсионный объектив, под контролем глаза сбоку, осторожно погружают в каплю масла.
Устанавливают, наблюдая в окуляр, очень медленно поднимают предметный столик до появления контуров изображения, вначале макровинтом, а затем микровинтом, получая четкое изображение препарата.
Слайд 13

Исследование живых клеток микроорганизмов методом раздавленной капли

Исследование живых клеток микроорганизмов методом раздавленной капли

Слайд 14

Приготовление препарата «Раздавленная капля»

Приготовление препарата «Раздавленная капля»

Слайд 15

1. Приготовление препарата из суспензии клеток микроорганизмов Бактериологической петлей, с соблюдением

1. Приготовление препарата из суспензии клеток микроорганизмов

Бактериологической петлей, с соблюдением правил

асептики, на обезжиренное предметное стекло наносят небольшое количество культуры микроорганизма.
Равномерно тонким слоем распределяют нанесенную каплю размером 1см2 и покрывают покровным стеклом
Слайд 16

2. Приготовление препарата живых клеток микроорганизмов, выросших на плотной питательной среде

2. Приготовление препарата живых клеток микроорганизмов, выросших на плотной питательной среде

На

обезжиренное предметное стекло наносят каплю водопроводной воды.
Бактериологической петлей, с соблюдением правил асептики, захватывают в петлю небольшое количество культуры микроорганизма.
Вносят петлю с культурой в каплю воды на предметное стекло, размешивают и покрывают покровным стеклом.
Слайд 17

Основные условия приготовления препарата «Раздавленная капля»

Основные условия приготовления препарата «Раздавленная капля»

Слайд 18

Не следует вносить много культуры, препарат будет густым и мало пригодным

Не следует вносить много культуры, препарат будет густым и мало пригодным

для микроскопирования.
Нельзя допускать образования пузырьков воздуха под покровным стеклом.
Избыток жидкости, выступающей из-под покровного стекла, удаляют фильтровальной бумагой.
Слайд 19

Техника микроскопирования препарата «Раздавленная капля»

Техника микроскопирования препарата «Раздавленная капля»

Слайд 20

Работа с сухими системами объективов х10, х40 Препараты микроскопируют, слегка затемняя

Работа с сухими системами объективов х10, х40

Препараты микроскопируют, слегка затемняя поле

зрения с помощью конденсора.
Вначале просматривают несколько полей зрения с объективом х10, передвигая предметный столик с помощью коаксиальной ручки. Нужный для исследования участок препарата устанавлива-ют в центре поля зрения.
Вращением диска револьвера заменяют объектив х10 на х40.
Слайд 21

Сложные способы окраски. Окраска по Граму

Сложные способы окраски. Окраска по Граму

Слайд 22

На обезжиренном предметном стекле делают мазки разных бактерий: в центре мазок

На обезжиренном предметном стекле делают мазки разных бактерий: в центре мазок

исследуемой культуры, слева и справа – контрольных культур (рис.5), одна из которых должна быть грамположительной (Sarcina), другая – грамотрицательной (Escherichia coli). Мазки готовят, как и при простом способе (см. слайды 3,,,6).
На мазки наносят 2…3 капли раствора кристаллического фиолетового и через 2…3 мин окрашивания краску смывают водой.
Наносят 2…3 капли раствора Люголя и по истечении 1…2 мин смывают водой (препарат чернеет).
Препарат обесцвечивают 0,5…1,0 мин 96%-ным этиловым спиртом, быстро промывают водой .
Проводят дополнительное окрашивание 1…2 мин водным фуксином.
Препарат промывают водой, высушивают
Слайд 23

Главное условие корректного исследования окраски бактерий по Граму Использовать односуточную культуру

Главное условие корректного исследования окраски бактерий по Граму

Использовать односуточную культуру бактерий,

т.к. некоторые грамположительные бактерии с возрастом теряют свои грамположительные свойства.
Использовать эталонные культуры, с заранее известным отношением к окраске по Граму.
Слайд 24

Схема приготовления препарата при окраске бактерий по Граму 1 – мазок

Схема приготовления препарата при окраске бактерий по Граму

1 – мазок грамположительных

бактерий; 2 – мазок грам-
отрицательных бактерий; 3 – исследуемая культура.
Слайд 25

Техника микроскопирования Приготовленный препарат микроскопируют с иммерсионной системой, исследуя вначале мазки

Техника микроскопирования

Приготовленный препарат микроскопируют с иммерсионной системой, исследуя вначале мазки

контрольных культур, а затем исследуемой.
При правильном окрашивании грамположи-тельные бактерии имеют сине-фиолетовый, а грамотрицательные – розово-красный цвет.
Слайд 26

Приготовление препаратов для микроскопирования мицелиальных грибов

Приготовление препаратов для микроскопирования мицелиальных грибов

Слайд 27

Техника приготовления препаратов грибов 1. Двумя обожженными и затем охлажденными препаровальными

Техника приготовления препаратов грибов

1. Двумя обожженными и затем охлажденными препаровальными иглами


отбирают небольшой кусочек мицелия вместе с плодоносящими гифами.
2. Переносмят его на обезжиренное предметное стекло в каплю смеси глицерина и этанола (1: 1).
3. Осторожно, не нарушая структуры мицелия, расправляют гифы иглами.
4.Накрывают препарат покровным стеклом и слегка прижимают.