Технология получения вирусных энтомопатогенных препаратов

Июль 21, 2022

Главная
Биология
Технология получения вирусных энтомопатогенных препаратов

Содержание

2. Заражение насекомого вирусом происходит при питании вредителя. Вирионы проникают через стенку кишечника в клетки, где в
3. В России осуществляется выпуск трех вирусных энтомопатогенных препаратов: -вирин-ЭКС (против капустной совки), -ЭНШ (против непарного шелкопряда)
4. Технология На определенной стадии развития (обычно на стадии гусеницы) насекомых заражают, добавляя вирусную суспензию к корму.
5. К полученной массе добавляют физиологический раствор или дистиллированную воду из расчета 1 см3 на гусеницу, взвесь
6. Получение бактериальных удобрений для сельского хозяйства Почвенные микроорганизмы в процессе роста улучшают структуру почвы, накапливают в
7. Производство нитрагина и ризоторфина Выпускают два вида препаратов клубеньковых бактерий: нитрагин и ризоторфин. Оба препарата производятся
8. Фиксация атмосферного азота возможна только в клубеньках, образующихся на корнях растений. Возникает она при инфицировании корневой
9. В симбиотическом комплексе растение - Rhizobium бактерии обеспечиваются питательными веществами, а сами снабжают растение азотистым питанием.
10. Выпускает два вида нитрагина: почвенный и сухой. Сухой нитрагин - порошок светло-серого цвета, содержащий в 1
11. Основная ферментация - в течение 2-3 суток. Готовую культуральную жидкость сепарируют, получается биомасса в виде пасты
12. Препарат клубеньковых бактерий может выпускаться и в виде ризоторфина. Для приготовления ризоторфина торф сушат при температуре
13. Производство азотобактерина Азотобактерин - бактериальное удобрение, содержащее микроорганизм Azotobacter chroococcum, способный фиксировать до 20 мг атмосферного
14. Все виды Azotobacter - строгие аэробы. Чувствительны к содержанию в среде фосфора и развиваются лишь при
15. Сухой азотобактерин - активная культура высушенных клеток азотобактера с наполнителем. В 1 г препарата содержится не
16. Почвенный и торфяной азотобактерин представляют собой активную культуру азотобактера, размноженную на твердой питательной среде, и содержат
17. Производство фосфобактерина Фосфобактерин - бактериальное удобрение, содержащее споры микроорганизма Bacillus megaterium var. phosphaticum. Представляет собой порошок
18. Bacillus megaterium var. phosphaticum - это мелкие, грамположительные аэробные спорообразующие палочки размером 2-6 мкм. Клетки содержат
19. Основные параметры проведения процесса: температура 28-30 ºС, рН 6.5-7.5, длительность культивирования 1.5-2 суток. Полученную в ходе
20. В отличие от нитрагина и азотобактерина фосфобактерин обладает большей устойчивостью при хранении. Фосфобактерин нужно применять на
21. Стадии производства бактериальных удобрений - Подбор чистой культуры бактерий и внесение ее в благоприятную среду. -
23. Скачать презентацию

Слайд 2

Заражение насекомого вирусом происходит при питании вредителя.
Вирионы проникают через стенку кишечника

в клетки, где в ядрах происходит репликация вирусов.
Высвободившиеся вирусы заражают другие клетки, что приводит к гибели насекомого.

Слайд 3

В России осуществляется выпуск трех вирусных энтомопатогенных препаратов:
-вирин-ЭКС (против капустной

совки),
-ЭНШ (против непарного шелкопряда)
- АББ (против американской белой бабочки).
Производство вирусных препаратов начинают с разведения насекомого-хозяина на искусственных питательных средах, обеспечивающих их физиологически здоровое состояние.

Слайд 4

Технология
На определенной стадии развития (обычно на стадии гусеницы) насекомых заражают, добавляя

вирусную суспензию к корму. При этом инокулят предварительно получают от нескольких больных личинок.
После заражения насекомых выдерживают в условиях, обеспечивающих максимальное накопление вируса в тканях.
Через 7-9 суток мертвые личинки подсушивают при температуре 33-35оС, измельчают механическим способом.
К полученной массе добавляют физиологический раствор или дистиллированную воду из расчета 1 см3 на гусеницу, взвесь полученных тканей фильтруют.
Препараты изготовляют в виде водных растворов, масляных растворов, сухих порошков, паст и т. п.

Слайд 5

К полученной массе добавляют физиологический раствор или дистиллированную воду из расчета

1 см3 на гусеницу, взвесь полученных тканей фильтруют.
Препараты изготовляют в виде водных растворов, масляных растворов, сухих порошков, паст и т. п.

Слайд 6

Получение бактериальных удобрений для сельского хозяйства
Почвенные микроорганизмы в процессе роста улучшают

структуру почвы, накапливают в ней питательные вещества, минерализуют различные органические соединения, превращая их в легко усвояемые растением компоненты питания.
Бактериальные удобрения обогащают ризосферу растений полезными микроорганизмами.
Наибольшее распространение в сельском хозяйстве получили такие бактериальные удобрения, как нитрагин, ризоторфин, азотобактерин, фосфобактерин.

Слайд 7

Производство нитрагина и ризоторфина
Выпускают два вида препаратов клубеньковых бактерий: нитрагин и

ризоторфин.
Оба препарата производятся на основе активных жизнеспособных клубеньковых бактерий из рода Rhizobium.
Бактерии рода Rhizobium - строгие аэробы. Среди них различают активные, малоактивные и неактивные культуры.
Критерий активности - способность в симбиозе с бобовым растением фиксировать атмосферный азот и использовать его в виде соединений для корневого питания растений.

Слайд 8

Фиксация атмосферного азота возможна только в клубеньках, образующихся на корнях растений.

Возникает она при инфицировании корневой системы бактериями из рода Rhizobium.
В месте локализации бактерий на корне растения-хозяина образуются клубеньки, в которых бактерии быстро размножаются и располагаются по отдельности или группами в цитоплазме растительных клеток. Сами бактериальные клетки увеличиваются в несколько раз и меняют окраску.
Если клубеньки имеют красноватую или розовую окраску, то они способны фиксировать молекулярный азот.

Слайд 9

В симбиотическом комплексе растение - Rhizobium бактерии обеспечиваются питательными веществами, а

сами снабжают растение азотистым питанием.
Бактерии, находящиеся в клубеньках, синтезируют ферментную систему с нитрогеназной активностью, восстанавливающую молекулярный азот до аммиака. Ассимиляция аммиака происходит, в основном, путем вовлечения его в ряд ферментативных превращений
Классификация различных видов Rhizobium учитывает растение-хозяина, например: Rhizobium phaseoli - для фасоли, Rhizobium lupini - для люпина, сараделлы и т.д.

Слайд 10

Выпускает два вида нитрагина: почвенный и сухой.
Сухой нитрагин - порошок светло-серого

цвета, содержащий в 1 г не менее 9 млрд. жизнеспособных бактерий в смеси с наполнителем. Влажность не превышает 5-7%.
Для производства посевного материала исходную культуру клубеньковых бактерий выращивают на агаризованной среде, содержащей отвар бобовых семян, 2% агара и 1% сахарозы, затем культуру размножают в колбах на жидкой питательной среде в течение 1-2 суток при 28-30 ºС и рН 6.5-7.5.
На всех этапах промышленного культивирования применяют питательную среду: меласса, кукурузный экстракт, минеральные соли в виде сульфатов аммония и магния, мел, хлорид натрия и двузамещенный фосфат калия.

Слайд 11

Основная ферментация - в течение 2-3 суток. Готовую культуральную жидкость сепарируют,

получается биомасса в виде пасты с влажностью 70-80%. Пасту смешивают с защитной средой, содержащей тиомочевину и мелассу (1:20) и направляют на высушивание. Сушат путем сублимации (в вакуум-сушильных шкафах).
Высушенную биомассу размалывают. Производительнее высушивание в распылительных сушках, но при этом 75% клеток теряют жизнеспособность.
Препараты сухого нитрагина фасуют и герметизируют в полиэтиленовые пакеты по 0,2 - 1 кг, хранят при температуре 15 ºС не более 6 месяцев. Семена опудривают перед посевом. Внесение нитрагина повышает урожайность в среднем на 15-25%.

Слайд 12

Препарат клубеньковых бактерий может выпускаться и в виде ризоторфина.
Для приготовления

ризоторфина торф сушат при температуре не выше 100 ºС и размалывают в порошок. Наиболее эффективным способом стерилизации является облучение его гамма-лучами. Перед стерилизацией размолотый, нейтрализованный мелом и увлажненный до 30-40% торф расфасовывают в полиэтиленовые пакеты,облучают и заражают клубеньковыми бактериями, используя шприц.
Прокол после внесения бактерий заклеивается липкой лентой. Грамм ризоторфина должен содержать не менее
2.5 млрд. жизнеспособных клеток.
Препарат хранят при температуре 5-6 ºС и влажности воздуха 40-55%. Доза препарата составляет 200 г на га.

Слайд 13

Производство азотобактерина
Азотобактерин - бактериальное удобрение, содержащее микроорганизм Azotobacter chroococcum, способный фиксировать

до 20 мг атмосферного азота на 1 г использованного сахара. В почву бактерии также выделяют биологически активные вещества (никотиновую и пантотеновую кислоты, пиридоксин, биотин, гетероауксин, гиббереллин),стимулирующие рост растений. Кроме того, продуцируемые Azotobacter фунгицидные вещества из группы анисомицина угнетают развитие некоторых нежелательных микроскопических грибов в ризосфере растения.

Слайд 14

Все виды Azotobacter - строгие аэробы. Чувствительны к содержанию в среде

фосфора и развиваются лишь при высоком его содержании в питательной среде. Азотфиксирующая способность культуры подавляется аммиаком.
Стимулируют процесс фиксации азота соединения молибдена.
Выпускают несколько видов азотобактерина: сухой, почвенный и торфяной.

Слайд 15

Сухой азотобактерин - активная культура высушенных клеток азотобактера с наполнителем. В

1 г препарата содержится не менее 0.5 млрд. жизнеспособных клеток. Культуру микроорганизма выращивают методом глубинного культивирования на среде, содержащей те же компоненты, что и при культивировании клеток Rhizobium. Дополнительно вводят только сульфаты железа и марганца, а также сложную соль молибденовой кислоты, рН 5.7-6.5.
Процесс ферментации проводят до стационарной фазы развития культуры
Высушенную культуру стандартизируют, фасуют в полиэтиленовые пакеты по 0.4-2 кг и хранят при температуре 15 ºС не более 3 месяцев.

Слайд 16

Почвенный и торфяной азотобактерин представляют собой активную культуру азотобактера, размноженную на

твердой питательной среде, и содержат в 1 г не менее 50 млн. жизнеспособных клеток.
Использовать азотобактерин рекомендуется только на почвах, содержащих фосфор и микроэлементы.
Азотобактерин применяют для бактеризации семян, рассады, компостов. При этом урожайность увеличивается на 10-15%. Семена зерновых опудривают сухим азотобактерином из расчета 100 млрд. клеток на 1 гектарную порцию семян.

Слайд 17

Производство фосфобактерина
Фосфобактерин - бактериальное удобрение, содержащее споры микроорганизма Bacillus megaterium var.

phosphaticum. Представляет собой порошок светло-серого или желтоватого цвета.
Бактерии обладают способностью превращать сложные фосфорорганические соединения (нуклеиновые кислоты, нуклеопротеиды и т.д.) и трудноусвояемые минеральные фосфаты в доступную для растений форму. Кроме этого бактерии вырабатывают биологически активные вещества (тиамин, пиридоксин, биотин, пантотеновую и никотиновую кислоты и др.), стимулирующие рост растения. Фосфобактерин относится к числу препаратов со стимулирующим эффектом.

Слайд 18

Bacillus megaterium var. phosphaticum - это мелкие, грамположительные аэробные спорообразующие палочки

размером 2-6 мкм. Клетки содержат значительное количество соединений фосфора.
производство фосфобактерина похоже на производство азотобактерина и препаратов клубеньковых бактерий. Состав питательной среды в процентах: кукурузный экстракт -1.8, меласса - 1.5, сульфат аммония - 0.1, мел – 1.0, остальное - вода. Культивируют глубинным методом в строго асептических условиях при постоянном перемешивании и принудительной аэрации до стадии образования спор.

Слайд 19

Основные параметры проведения процесса: температура 28-30 ºС, рН 6.5-7.5, длительность культивирования

1.5-2 суток.
Полученную в ходе культивирования биомассу клеток отделяют центрифугированием и высушивают в распылительной сушилке при температуре 65-75 ºС до остаточной влажности 2-3%.
Высушенные споры смешивают с наполнителем.
Готовый препарат должен содержать не менее 8 млрд. клеток в 1 г.
Расфасовывают препарат в полиэтиленовые пакеты по 50-500 г.

Слайд 20

В отличие от нитрагина и азотобактерина фосфобактерин обладает большей устойчивостью при

хранении. Фосфобактерин нужно применять на черноземных почвах, которые содержат наиболее значительное количество фосфороорганических соединений. Необходим для повышения урожайности зерновых, картофеля, сахарной свеклы и др. сельскохозяйственных растений.

Слайд 21

Стадии производства бактериальных удобрений
- Подбор чистой культуры бактерий и внесение ее

в благоприятную среду.
- Культивирование со значительным наращиванием биомассы.
- Выделение и выпуск готового продукта.
Семена обрабатывают смесью сухого фосфобактерина с наполнителем (золой, почвой и др.) в соотношении 1:40.
На 1 гектарную порцию семян требуется 5 г препарата и 200 г наполнителя.

Технология получения вирусных энтомопатогенных препаратов

Содержание

Заражение насекомого вирусом происходит при питании вредителя.Вирионы проникают через стенку кишечника

В России осуществляется выпуск трех вирусных энтомопатогенных препаратов: -вирин-ЭКС (против капустной

ТехнологияНа определенной стадии развития (обычно на стадии гусеницы) насекомых заражают, добавляя