Терминация трансляции

Содержание

Слайд 2

Этапы терминации трансляции: В А-участке оказывается один из трех терминирующих кодонов

Этапы терминации трансляции:

В А-участке оказывается один из трех терминирующих кодонов –

UAG, UAA или UGA.
• Из-за отсутствия тРНК, отвечающих этим кодонам,полипептидил-тРНК остается связанной с Р-участком.
• RF-1 и RF-2 катализируют отсоединение полипептидной цепи от тРНК, отделение их обоих от рибосомы, а 70S-рибосомы – от мРНК.
• RF-1 узнает в А-участке кодон UAA или UAG
• RF-2 включается в том случае, когда в А-участке оказывается UAA или UGA;
• RF-3 облегчает работу двух других факторов.
• Если терминирующим кодоном является UAA, то эффективность процесса терминации оказывается наибольшей, поскольку этот кодон узнают оба фактора – RF- 1 и RF-2.
Слайд 3

Факторы терминации у прокариот: • RF-1 вызывает отделение полипептидной цепи при

Факторы терминации у прокариот:

• RF-1 вызывает отделение полипептидной цепи при

считывании кодонов UAA и UAG;
• RF-2 действует аналогичным образом при считывании UAA и UGA,
• EF-3 может облегчить работу двух других факторов.
Слайд 4

Терминация трансляции у эукариот У эукариот найден только один фактор терминации

Терминация трансляции у эукариот

У эукариот найден только один фактор терминации

трансляции – eRF, способный «читать» все три терминирующих кодона
На эффективность терминации трансляции у эукариот влияет последовательности нуклеотидов в окрестностях терминирующих кодонов и структура C-концевой части строящейся полипептидной цепи.
Терминирующие кодоны дрожжей по частоте их использования можно расположить в следующий ряд: UAA(53%) > UGA(27%) > UAG(20%).
Если анализировать только активно экспрессирующиеся гены, то частота использования UAA оказывается еще большей - 87%.
Слайд 5

Слайд 6

Транскрипция, трансляция и ЛС

Транскрипция, трансляция и ЛС

Слайд 7

Инактивация факторов инициации трансляции интерферон активирует внутриклеточные протеинкиназы, которые, в свою

Инактивация факторов инициации трансляции

интерферон активирует внутриклеточные протеинкиназы, которые, в свою очередь, фосфорилируют

белковый фактор инициации ИФ-2 и подавляют его активность.
Слайд 8

Нарушение кодон-антикодонового взаимодействия стрептомицин присоединяется к малой субъединице и вызывает ошибку считывания первого основания кодона.

Нарушение кодон-антикодонового взаимодействия

стрептомицин присоединяется к малой субъединице и вызывает ошибку считывания первого

основания кодона.
Слайд 9

Блокада стадии элонгации тетрациклины блокируют А-центр рибосомы и лишают ее способности

Блокада стадии элонгации

тетрациклины блокируют А-центр рибосомы и лишают ее способности связываться с

аминоацил-тРНК,
левомицетин связывается с 50S-частицей рибосомы и ингибирует пептидил-трансферазу,
эритромицин связывается с 50S-частицей рибосомы и ингибирует транслоказу,
пуромицин по структуре схож с тирозил-тРНК, входит в А-центр рибосомы и участвует в пептидил-трансферазной реакции, образуя связь с имеющимся пептидом. После этого комплекс пуромицин-пептид отделяется от рибосомы, что останавливает синтез белка.
Слайд 10

Схема элонгации

Схема элонгации

Слайд 11

Ингибиторы транскрипции Рифамицины - связываются с бактериальной РНК-полимеразой и препятствуют началу транскрипции

Ингибиторы транскрипции

Рифамицины - связываются с бактериальной РНК-полимеразой и препятствуют началу транскрипции

Слайд 12

Сайленсеры. Футпринтинг ДНК

Сайленсеры. Футпринтинг ДНК

Слайд 13

Сайленсер Сайленсер (silencer) [англ. silencer — глушитель, от лат. silentum -

Сайленсер

Сайленсер (silencer) [англ. silencer — глушитель, от лат. silentum - молчание] - определенная нуклеотидная последовательность

ДНК, являющаяся регулятором транскрипции гена и ослабляющая или прекращающая этот процесс при взаимодействии со специфическими транс-действующими факторами.
Слайд 14

Футпринтинг Футпринтинга– метод, позволяющего определять места специфических контактов белков с ДНК.

Футпринтинг

Футпринтинга– метод, позволяющего определять места специфических контактов белков с ДНК.

Слайд 15

Рестрикционные фрагменты ДНК, последовательности нуклеотидов которых известны, метят по одному из

Рестрикционные фрагменты ДНК, последовательности нуклеотидов которых известны, метят по одному из

концов 32P и инкубируют с исследуемыми белками. Образовавшиеся комплексы белок–ДНК подвергают действию агентов, гидролизующих ДНК, например ДНКазы I, в условиях неполного расщепления ДНК, и полученные продукты гидролиза разделяют с помощью электрофореза в полиакриламидном геле с последующей авторадиографией. В отсутствие белка на авторадиограммах наблюдают появление полного набора фрагментов ДНК в том виде, как это имеет место при обычном секвенировании ДНК. Участки ДНК, защищенные белком от действия ДНКазы, идентифицируются по исчезновению полос, соответствующих продуктам статистического расщепления ДНК, концы которых попадают в область связывания с белком. При этом на электрофоретических дорожках появляются характерные пропуски (или "следы" – footprints), что и дало название всему методу.

Футпринтинг