Иммунологические методы диагностики микробных заболеваний. Тема 5

План

Иммунологический метод диагностики (определение, история открытия, классификация, роль в диагностике

Иммунологические методы исследований – это диагностические лабораторные  методы, основанные на специфическом

История иммуноанализа

Классические методы иммунохимического анализа описаны в конце XIX веке (Эрлих,

История иммуноанализа

радиоиммунологический анализ (РИА), предложен в конце 50-х годов Р. Йалоу и

История иммуноанализа

гомогенный ИФА В 1972 г. разработали Рубенштейн с сотр., -

История иммуноанализа

флуоресцентный иммуноанализ (ФИА) c использование флуоресцентных меток впервые провели Смит в 1981

История иммуноанализа

Кёлер и Мильштейн (1976 г.) – получение моноклональных антител Нобелевская

Зачем нужны лабораторные анализы

Установка правильного диагноза
Мониторинг эффективности лечения

Основные недостатки использования ручных технологий

Наличие ошибок «человеческого фактора»
Низкая производительность
Снижение воспроизводимости результатов
Невозможность

Методы исследования по аналитическим качествам

Рутинные методы используются в повседневной лабораторной практике
Референтные

Прямые методы выявляют непосредственно возбудителей инфекций или материал, входящий в состав

Непрямые методы выявляют материал не самого возбудителя, а специфические антитела, выработанные

Автоматизированные технологии

Цели внедрения автоматических анализаторов

Повысить воспроизводимость исследований
Обеспечить стандартизацию процесса исследований

Обеспечить возможность централизации потоков исследования
Повысить уровень безопасности работы персонала;
Создать основу

Требования к анализаторам:

автоматическое разведение проб
возможность использования для образцов стандартных пробирок
наличие удобного

анализатор должен быть полностью автоматическим
производительность не должна зависеть от типа реакций
исследуемый

Анализаторы содержат одинаковые для всех исследований блоки:

система, перемешивающая жидкость
держатели проб и

Требования к автоматизации процесса иследований

Высокая производительность.
Гибкость схемы тестирования.
Открытость системы

Возможность повышения мощности системы при растущем потоке исследований без значительного вложения

Автоматизация лабораторий

Задачи:

Сведение к минимуму количества ошибок при проведении исследований и обработке данных
Ускорение

Функции

Регистрация сведений о материале, поступающем на исследование, и о пациентах
Контроль качества

Иммуноферментный анализ

2) Для выявления антител.

1) Для выявления антигенов.

Автоматические имунноферментные анализаторы

Открытая система
Образцы: 400 образцов/час с промывкой иглы промывочным раствором

сохранение калибровочной кривой, в результате чего новая кривая может быть

Планирование анализов одновременно на нескольких планшетах
До 12 разных анализов на одном

Выполняемые тесты

Инфекции: гепатит А (антитела к ВГА), HBsAg, HBeAg, HBcAg, HBsAg

Опухолевые маркеры: альфа-фетопротеин, карциноэмбриональный антиген, простатспецифический антиген, CA-125, CA-15-3, CA-19-9, CA-242,

Эндокринология: кортизол, тестостерон, андростендион, прогестерон, адреналин, мелатонин, серотонин, СТГ, эстрадиол, эстриол,

Радиоиммунный анализ

Многоканальный радиометр для радиоиммунного и иммунно-радиометрического анализа

Предназначен для проведения анализов содержания

Хемилюминесценция

Хемилюминесценция - энергично протекающие химические реакции сопровождаются, как правило, выделением энергии

Хемилюминометр

Хемилюмнисцентный анализатор

Немедленный доступ:
- загрузка приоритетных тестов без прерывания работы анализатора;
-

Рабочий цикл анализатора:
- время получения первого результата - 28 мин, каждый

ХРОМАТОГРАФИЯ

(от греч. chroma, родительный падеж chromatos - цвет, краска

Основные виды хроматографии

Адсорбционная
Распределительная
Ионообменная
Эксклюзионная
Осадочная

В зависимости от природы взаимодействия:

В соответствии с агрегатным состоянием элюента:
Газовая
Жидкостная

Основные виды хроматографии

Автоматизированные хроматографы

ЭЛЕКТРОХЕМИЛЮМИНЕСЦЕНЦИЯ

люминесценция специальных жидких
люминофоров в электрическом поле, которая
происходит в несколько этапов: под

Иммунофлюоресцентный метод

 метод выявления специфических Аг с помощью Ат, конъюгированных с

Схема РИФ

Реакция иммунофлуоресценции:
1 - прямой метод;
2 - не прямой метод

Критерии специфичности РИФ

 характерная морфология, размеры и расположение возбудителя в мазке;
 периферический характер