Лабораторные исследования при заболеваниях, передающихся половым путём (ЗППП)

Июль 30, 2022

Главная
Медицина
Лабораторные исследования при заболеваниях, передающихся половым путём (ЗППП)

Содержание

2. Этиология сифилиса Возбудитель сифилиса относится к порядку Spirochaetales, семейству Spirochaetaeceae, роду Treponema, виду Treponema pallidum, подвиду
3. Этиология сифилиса Микроорганизм также может существовать в виде цист и L-форм. Циста является формой выживания и
5. Treponema pallidum
6. Клиника сифилиса Инкубационный период - 3–4 недели, Первичный сифилис (А51.0-А51.2) В месте внедрения бледных трепонем развивается
7. Первичный аффект
8. Вторичный сифилис (А51.3). Высыпаниями на коже — розеолезный (пятнистый), папулезный (узелковый), пустулезный (гнойничковый) и редко везикулезный
9. розеола
10. Ладонно-подошвенные сифилиды
11. Проявления сифилиса у ВИЧ инфицированных Инфицированный вич
12. Особенности клиники ВИЧ-инфицированных
14. Клиника сифилиса Третичный сифилис (А52.7) высыпания на коже/слизистых оболочках (бугорковый и гуммозный сифилиды, третичная розеола Фурнье),
15. Современные особенности По данным ВОЗ ежегодно регистрируется 15 млн. случаев Тенденция к возрастанию заболеваемости скрытыми и
16. Методы лабораторной диагностики Прямые и непрямые Трепонемные и нетрепонемные Отборочные (скрининговые) и подтверждающие (специфические и диагностические)
17. Нормативно-правовые акты Приказ МЗ РФ от 26.06.2001 №87 «О совершенствовании серологической диагностики сифилиса» Приказ МЗ РФ
18. Прямые методы обнаружение бледной трепонемы в образцах, полученных из очагов поражений, с помощью микроскопии в темном
19. Прямые методы Материал с язв, эрозий, папул, пункция лимфоузлов Тканевая жидкость Бледная спирохета имеет вид тонкой
20. Прямые методы Молекулярно-биологический метод — полимеразная цепная реакция (ПЦР) С 1990-х гг., приемущество в использовании любых
21. Прямые методы Заражение сифилисом кроликов – RIT. Старейший метод выявления Treponema pallidum в любом клиническом материале,
22. Серологические тесты нетрепонемные тесты (НТТ): реакция микропреципитации (РМП) или аналог — быстрый плазмареагиновый тест (RPR); VDRL,
23. Общая характеристика нетрепонемных тестов ■■ применяется антиген нетрепонемного происхождения (стандартизованный кардиолипиновый антиген); ■■ позитивируются через 1—2
24. Преимущества нетрепонемных тестов ■■ низкая стоимость; ■■ техническая простота выполнения; ■■ быстрота получения результатов. Показания к
25. РМП На основе кардиолипидного антигена Специфичность около 98% Чувствительность при первичном сифилисе 81% при вторичном 91%,
26. Недостатки РМП Ложноположительные реакции более 3% Ложноотрицательные реакции (при избытке антител – феномен прозоны, выраженной иммунной
27. VDRL Используется прогретая сыворотка криви и спинномозговая жидкость Результат визуализируется светооптическим микроскопом или лупой Специфичность 98%
28. Ложноположительные реакции технические погрешности при постановке реакции, наличие в крови антител к ревматоидному фактору, перекрестно реагирующие
29. Серологические тесты ■ трепонемные тесты (ТТ): реакция пассивной гемагглютинации (РПГА, TPHA), иммуноферментный анализ (ИФА, ELISA) на
30. Показатели клинической информативности исследований для ранней диагностики сифилиса
31. Показания к применению трепонемных тестов - подтверждение положительных результатов нетрепонемных тестов; - подтверждение в случае расхождения
32. РСК с трепонемным антигеном Используется обработанный ультразвуком культурального антигена T. pallidum Основной тест для контроля эффективности
33. РИТ РИБТ не лишена недостатков: мало пригодна для диагностики ранних форм сифилиса ввиду позднего (не ранее
34. РИФ-абс, РИФ-200 1954 г. T. Weller и A. Coons описали метод непрямой иммунофлуоресценции, взаимодействие антител сыворотки
35. РИБТ Реакция иммобилизации бледных трепонем (РИБТ) была предложена R, Nelson и М. Mayer в 1949 г.
36. РИБТ Антиген для РИБТ представляет собой взвесь бледных трепонем в среде выживания с количеством микроорганизмов 10-15
37. РИБТ Процент иммобилизации - соотношение числа подвижных и неподвижных трепонем в опыте (активный комплемент) и контроле
38. Недостатки РИБТ РИБТ не пригодна для диагностики ранних форм сифилиса ввиду позднего (не ранее 8-9 недель
39. РПГА 1960-х гг., качественный и количественный варианты и микромодификация Положительной становится спустя 3 недели после появления
40. ИФА В 1970-х гг., выявление специфического комплекса антиген-антитело IgM появляются уже после 10-14 дней после заражения,
41. Иммуноблоттинг Определение IgM и IgG Рекомбинантные антигены Т. Pallidum, содержащие иммунодоминантные участки белков массой 47 кДа,
42. Метод ИХЛ (иммунохемилюминесценции) высокая чувствительность и специфичность (98—100%), дает возможность количественного определения уровня антител к возбудителю
43. ПБТ (простые быстрые тесты у постели больного, или иммунохроматографические тесты) позволяют проводить быстрое определение содержания трепонемоспецифических
44. Характеристика методов лабораторной диагностики сифилиса Метод чувствительность % специфичность % 1 темнпольная микроскопия 70 100 2
47. Примечания ■■ трепонемные тесты не могут быть использованы для контроля эффективности терапии, т. к. антитрепонемные антитела
48. Общая характеристика трепонемных тестов ■■ применяется антиген трепонемного происхождения; ■■ чувствительность — 70—100% (в зависимости от
49. Ложноположительные серологические реакции на сифилис (ЛПР) Ложноположительными или неспецифическими называют положительные результаты серологических реакций на сифилис
50. Ложноотрицательные серологические реакции на сифилис Могут наблюдаться при вторичном сифилисе вследствие феномена прозоны при тестировании неразведенной
51. Лабораторные тесты для подтверждения или исключения нейросифилиса цитологическое исследование с подсчетом количества форменных элементов, определение количества
52. Диагностика врожденного сифилиса ■ более высокая позитивность серологических реакций в венозной крови ребенка в сравнении с
53. Эпидемиология гонореи в мире ежегодно выявляется около 60 млн. случаев заболевания В России заболеваемости гонококковой инфекцией
54. Neisseria gonorrhoeae Паразит был открыт ученым из Германии Нейссером в 1879-м году. Гонококк относится к группе
55. Показания к обследованию на гонококковую инфекцию Согласно клиническим рекомендациям РОДВК, диагностику гонококковой инфекции следует проводить: .лицам
56. Клиника гонореи – жалобы Женщины: ■ гнойные или слизисто-гнойные выделения из половых путей; ■ зуд/жжение в
57. Клиника гонореи – жалобы Мужчины ■ гнойные выделения из уретры; ■ дизурия (зуд, жжение, болезненность при
58. Объективные проявления Женщины: ■ гиперемия и отечность слизистой оболочки наружного отверстия мочеиспускательного канала, инфильтрация стенок уретры,
59. Объективные проявления Мужчины: ■ гиперемия и отечность слизистой оболочки наружного отверстия мочеиспускательного канала, инфильтрация стенок уретры;
60. Лабораторные тесты для диагностики гонококковой инфекции микроскопическое исследование препарата, окрашенного 1% раствором метиленового синего и по
61. Правила получения материала для диагностики ■ сроки получения клинического материала с учетом инкубационного периода заболевания и
62. Лабораторные исследования Обязательные исследования Верификация диагноза гонококковой инфекции базируется на результатах лабораторных исследований — обнаружении N.
63. Лабораторные исследования Культуральные исследования - метод установления диагноза У девочек до наступления менархе и женщин в
64. Культуральная диагностика Культивирование 18 – 24 часа в термостате 36 - 37° с повышенным содержанием СО2
65. Тесты амплификации нуклеиновых кислот весьма эффективны при бессимптомной и экстрагенитальной гонорее, могут быть использованы при скрининговых
66. Урогенитальный трихомоноз эпидемиология По данным ВОЗ, ежегодно в мире трихомонозом заболевают более 180 млн человек, в
67. Trichomonas vaginalis Oткрыта французом Альфредом Доннэ в 1836 г.; ввиду наличия жгутиков он назвал обнаруженное им
68. Пути инфицирования У мужчин и женщин: ■ половой путь передачи У детей: ■ прохождение через родовые
69. Объективные симптомы Женщины: ■ гиперемия и отечность слизистой оболочки вульвы, влагалища; ■ зелено-желтые, жидкие пенистые вагинальные
70. Правила получения клинического материала ■ сроки получения клинического материала с учетом инкубационного периода заболевания и применения
71. Клинический материал ■ у женщин — из уретры, цервикального канала, боковых и заднего сводов влагалища; ■
72. Диагностические методы Микроскопические Культуральные Серологические Молекулярно-биологические: ДНК-гибридизация, ПЦР- анализ
73. Лабораторные исследования Обязательные исследования обнаружении T. vaginalis с помощью одного из тестов: микроскопическое исследование нативного препарата
74. Микроскопическая диагностика Нативная микроскопия: Определение наличия и количества жгутиков, толчкообразное биение ундулирующей мембраны и жгутиков простейшего,
75. Культуральная диагностика Культуральное исследование является «золотым стандартом» диагностики и в особенности показано при мало- и бессимптомных
76. Диагностика трихомониаза с 70-х годов ведутся разработки серологических тестов выявления Ig G в сыворотке крови Прямой
77. Характеристики методов диагностики трихомониаза
78. Хламидийная инфекция Хламидийная инфекция — инфекционное заболевание, передаваемое половым путем, возбудителем которого является Chlamydia trachomatis Chlamydia
79. Жизненный цикл Хламидии – облигатные внутриклеточные энергозависимые паразиты, обладающие дискретной оболочкой. Особенностью жизненного цикла является двухстадийность:
80. Хламидийная инфекция - эпидемиология наиболее высокая заболеваемость отмечается у лиц моложе 25 лет В Российской Федерации
81. Пути инфицирования У мужчин и женщин: ■ половой путь передачи (инфицирование происходит при любых формах половых
82. Субъективные симптомы Женщины (более 50% бессимптомное течение) ■ слизисто-гнойные или слизистые выделения из половых путей; ■
83. Субъективные симптомы Мужчины: ■ слизисто-гнойные или слизистые необильные выделения из уретры; ■ зуд, жжение, болезненность при
84. Лабораторные исследования Изоляция Chlamydia trachomatis в культуре клеток Обнаружение Chlamydia trachomatis методами амплификации нуклеиновых кислот. Обнаружение
85. Урогенитальный микоплазмоз более чем у 40% больных с воспалительными заболеваниями урогенитальной системы выявляются генитальные микоплазмы, наибольшее
86. Особенности микоплазм Отсутствие клеточной стенки, обуславливающее пластичность, полиморфизм, высокую осмотическую чувствительность, резистентность к химическим агентам и
87. Пути инфицирования У мужчин и женщин: ■ половой путь передачи. У детей: ■ прохождение через родовые
88. Объективные симптомы Уретрит, вызванный генитальными микоплазмами: ■ гиперемия и отечность слизистой оболочки наружного отверстия мочеиспускательного канала,
89. Правила получения клинического материала для лабораторных исследований Для получения достоверных результатов лабораторных исследований для идентификации генитальных
90. Клинический материал для лабораторных исследований ■ у мужчин — из уретры, по показаниям — из предстательной
91. Лабораторная диагностика Культивирование микоплазм с последующей идентифитацией Иммунофлуоресценцию и серологические реакции Методы молекулярной биологии
92. Культуральная диагностика Рост на полужидких и жидких средах при t 37º происходит1 – 3 и 3
93. Лабораторная диагностика РИФ - в мазках, соскобах реакция антиген-антитело с меченными ФИТЦ антителами. Учитывается ярко зеленое
94. Диагностические критерии уретрита у мужчин ■ обнаружение 5 и более полиморфноядерных лейкоцитов в поле зрения в
95. Диагностические критерии у женщин Уретрит - обнаружение 10 и более полиморфноядерных лейкоцитов в поле зрения в
96. Бактериальный вагиноз Бактериальный вагиноз — это инфекционный невоспалительный синдром полимикробной этиологии, связанный с дисбиозом вагинального биотопа,
97. Субъективные симптомы ■ Гомогенные беловато-серые вагинальные выделения, часто с неприятным запахом, усиливающиеся после незащищенного полового акта
98. Объективные симптомы Диагноз устанавливается на основании наличия не менее чем 3 из 4 критериев (критерии Amsel):
99. Правила получения клинического материала ■ сроки получения клинического материала — до начала лечения или не ранее
100. Лабораторные исследования Диагноз устанавливается на основании наличия не менее чем 3 из 4 критериев (критерии Amsel),
101. Лабораторные исследования Оценка общей микробной обсемененности вагинального отделяемого проводится по 4-балльной системе — по числу микробных
106. Микробиоценоз влагалища Нормоценоз: ♦доминирование лактобацилл; ♦отсутствие грамотрицательной микрофлоры, спор, мицелия, псевдогифов; ♦наличие единичных лейкоцитов и «чистых»
107. Для более точной оценки гормональной стимуляции по цитологическому методу используют следующие индексы. ■ Кариопикнотический индекс (КПИ)
109. Скачать презентацию

Слайд 2

Этиология сифилиса
Возбудитель сифилиса относится к порядку Spirochaetales, семейству Spirochaetaeceae, роду Treponema,

виду Treponema pallidum, подвиду pallidum (син. Spirochaeta pallidum).
Бледная трепонема легко разрушается под воздействием внешних агентов: высыхание, прогревание при 55° C в течение 15 мин., воздействие 50–56° этилового спирта. В то же время низкие температуры способствуют выживанию бледной трепонемы.
Бледная трепонема представляет собой микроорганизм спиралевидной формы; число оборотов спирали от 8 до 12, ее завитки равномерны, имеют идентичное строение.
Совершает характерные виды движения: вращательные, поступательные, волнообразные и сгибательные.
Размножается преимущественно путем поперечного деления на два или несколько сегментов, каждый из которых вырастает затем во взрослую особь. Деление трепонем происходит каждые 30–33 часа, рост занимает в среднем 1–1,5 часа.
Микроорганизм также может существовать в виде цист и L-форм. Циста является формой выживания и размножения бледной трепонемы в неблагоприятных условиях среды и рассматривается как стадия покоя T. рallidum; обладает антигенной активностью. L-форма является способом выживания бледной трепонемы, обладает слабой антигенной активностью.

Слайд 3

Этиология сифилиса
Микроорганизм также может существовать в виде цист и L-форм.
Циста

является формой выживания и размножения бледной трепонемы в неблагоприятных условиях среды и рассматривается как стадия покоя T. рallidum; обладает антигенной активностью. Сопровождается образованием дополнительной системы оболочек.
L-форма является способом выживания бледной трепонемы, обладает слабой антигенной активностью представленные гранулами, шарами и зернами, устойчивыми к воздействию антибиотиков
«Полимембранные» фагосомы – многооболочечные образования с заключенными в них интактными бактериями
Фильтрующиеся формы бледной трепонемы

Слайд 4

Слайд 5

Treponema pallidum

Слайд 6

Клиника сифилиса
Инкубационный период - 3–4 недели,
Первичный сифилис (А51.0-А51.2) В месте внедрения

бледных трепонем развивается твердый шанкр — эрозия/язва в диаметре от 2–3 мм (карликовый шанкр) до 1,5–2 см более в основании шанкра — плотноэластический инфильтрат; сопровождается регионарным лимфаденитом, реже лимфангитом;

Слайд 7

Первичный аффект

Слайд 8

Вторичный сифилис (А51.3).
Высыпаниями на коже — розеолезный (пятнистый), папулезный (узелковый), пустулезный

(гнойничковый) и редко везикулезный сифилиды и/или слизистых оболочках (ограниченные и сливные розеолезные и папулезные сифилиды); лейкодермой (пятнистая, сетчатая, мраморная), алопецией (мелкоочаговая, диффузная, смешанная)

Слайд 9

розеола

Слайд 10

Ладонно-подошвенные сифилиды

Слайд 11

Проявления сифилиса у ВИЧ инфицированных
Инфицированный вич

Слайд 12

Особенности клиники ВИЧ-инфицированных

Слайд 13

Слайд 14

Клиника сифилиса
Третичный сифилис (А52.7) высыпания на коже/слизистых оболочках (бугорковый и гуммозный

сифилиды, третичная розеола Фурнье), поражения внутренних органов, опорно-двигательного аппарата и нервной системы (А52.0-А52.7)
Скрытый сифилис. Различают ранний (А51.5) (до 2 лет с момента инфицирования), поздний (А52.8) (свыше 2 лет) и неуточненный, как ранний или поздний (А53.0) скрытый сифилис.

Слайд 15

Современные особенности
По данным ВОЗ ежегодно регистрируется 15 млн. случаев
Тенденция к

возрастанию заболеваемости скрытыми и поздними формами
Резкое «омоложение» инфекции, в том числе среди подростков 14 – 16 лет и моложе
Рост числа случаев заболевания среди беременных и как следствие – увеличение риска инфицирования новорожденных
Отмечаются две полярные тенденции – участились случаи злокачественного течения инфекции, с другой стороны увеличилась доля больных со скрытым течением

Слайд 16

Методы лабораторной диагностики
Прямые и непрямые
Трепонемные и нетрепонемные
Отборочные (скрининговые) и подтверждающие (специфические

и диагностические)
Приборные и методы, которые оцениваются визуально

Слайд 17

Нормативно-правовые акты
Приказ МЗ РФ от 26.06.2001 №87 «О совершенствовании серологической диагностики

сифилиса»
Приказ МЗ РФ от 30 июля 2001 №291 «О мерах по предупреждению распространения инфекций, передаваемых половым путем»
Приказ МЗ РФ от 25 июля 2003 №327 «Об утверждении протокола ведения больных «сифилис».

Слайд 18

Прямые методы
обнаружение бледной трепонемы в образцах, полученных из очагов поражений, с

помощью микроскопии в темном поле или прямой иммунофлюоресценции

Слайд 19

Прямые методы
Материал с язв, эрозий, папул, пункция лимфоузлов
Тканевая жидкость
Бледная спирохета имеет

вид тонкой пунктирной спирали, так как лучше освещаются выпуклые стороны завитков
Сгибательные поступательные движения

Слайд 20

Прямые методы
Молекулярно-биологический метод —
полимеразная цепная реакция (ПЦР)
С 1990-х гг., приемущество в

использовании любых биоматериалов в минимальном количестве, и быстроте постановки
Нерешенным остается вопрос о элиминации возбудителя после лечения

Слайд 21

Прямые методы
Заражение сифилисом кроликов – RIT. Старейший метод выявления Treponema pallidum

в любом клиническом материале, при условии, что антибиотикотерапия не проводилась. Если число микроорганизмов в материале превышает 23, чувствительность метода достигает 100%

Слайд 22

Серологические тесты
нетрепонемные тесты (НТТ): реакция микропреципитации (РМП) или аналог —

быстрый плазмареагиновый тест (RPR); VDRL, TRUST, RST, USR
НТТ имеют невысокую чувствительность (до 70–90% при ранних формах сифилиса и до 30% при поздних), часто дают ложноположительные результаты (до 2,3%)
В основе лежит выявление антител к антигенным структурам наружной мембраны спирохеты, состоящей из фосфолипидов, формируются на ранних стадиях заболевания
Показаны для проведения скрининга населения, диагностика сифилиса с определением активности процесса и эффективности лечения путем определения титра антител

Слайд 23

Общая характеристика нетрепонемных тестов
■■ применяется антиген нетрепонемного происхождения (стандартизованный кардиолипиновый антиген);
■■

позитивируются через 1—2 недели после образования первичной сифиломы;
■■ имеют невысокую чувствительность (до 70–90% при ранних формах сифилиса и до 30% — при поздних), могут давать ложноположительные результаты (3% и более).

Слайд 24

Преимущества нетрепонемных тестов
■■ низкая стоимость;
■■ техническая простота выполнения;
■■ быстрота получения результатов.
Показания

к применению нетрепонемных тестов:
■■ проведение скрининга населения на сифилис;
■■ определение активности течения инфекции (определение титров антител);
■■ контроль эффективности терапии (определение титров антител).

Слайд 25

РМП
На основе кардиолипидного антигена
Специфичность около 98%
Чувствительность при первичном сифилисе 81% при

вторичном 91%, при скрытом 94%
Положительной становится через 7 – 14 день после появления первичного аффекта

Слайд 26

Недостатки РМП
Ложноположительные реакции более 3%
Ложноотрицательные реакции (при избытке антител – феномен

прозоны, выраженной иммунной недостаточности, злокачественном течении сифилиса, при приеме иммунодепрессантов, наличии ВИЧ)
трудность интерпретации, невозможность стандартизации
Возможные технические погрешности

Слайд 27

VDRL
Используется прогретая сыворотка криви и спинномозговая жидкость
Результат визуализируется светооптическим микроскопом или

лупой
Специфичность 98%
Чувствительность при первичном 78%, при вторичном 100%, при скрытом 95%, при позднем 71%

Слайд 28

Ложноположительные реакции
технические погрешности при постановке реакции,
наличие в крови антител к

ревматоидному фактору,
перекрестно реагирующие антитела у больных аутоиммунной патологией,
анифосфолипидным синдромом,
пожилых людей,
беременных женщин,
больных бореллиозом и лептоспирозом,
больных с обширной соматической патологией,
нарушением обмена липидов,
иммуннодефицитами различной этиологии

Слайд 29

Серологические тесты
■ трепонемные тесты (ТТ): реакция пассивной гемагглютинации (РПГА, TPHA), иммуноферментный

анализ (ИФА, ELISA) на антитела класса IgM, IgG и суммарные, реакция иммунофлюоресценции (РИФ) в двух модификациях: РИФ200 и РИФабс, реакция иммобилизации бледных трепонем (РИБТ), иммуноблоттинг (ИБ).
ТТ — РИФ и ИФА становятся положительными с 3-й недели от момента заражения, РПГА и РИБТ — с 7–8-й.

Слайд 30

Показатели клинической информативности исследований для ранней диагностики сифилиса

Слайд 31

Показания к применению трепонемных тестов
- подтверждение положительных результатов нетрепонемных тестов;
- подтверждение

в случае расхождения результатов скринингового трепонемного теста и последующего нетрепонемного теста, а также скринингового и подтверждающего трепонемных тестов;
- проведение методами ИФА, РПГА, ИХЛ, ПБТ скрининга отдельных категорий населения на сифилис (доноры, беременные, больные офтальмологических, психоневрологических, кардиологических стационаров, ВИЧ-инфицированные).

Слайд 32

РСК с трепонемным антигеном
Используется обработанный ультразвуком культурального антигена T. pallidum
Основной тест

для контроля эффективности терапии и является критерием излечености
Специфичность 98%
Трудоемка, низкотехнологична, невозможно стандартизировать и автоматизировать

Слайд 33

РИТ
РИБТ не лишена недостатков: мало пригодна для диагностики ранних форм сифилиса

ввиду позднего (не ранее 8-9 недель от момента заражения) появления антител - иммобилизинов; она может давать ложноположительные результаты, в особенности у больных с аутоиммунной патологией, злокачественными заболеваниями, диабетом [2]. Кроме того, РИБТ – достаточно сложный, трудоемкий и дорогостоящий анализ, требующий высокой квалификации персонала и наличия вивария, в связи с чем в последние годы он проводится лишь в отдельных лабораториях. В диагностике РИБТ используется как реакция -"арбитр" при расхождении результатов других серологических тестов, для дифференцирования ложноположительных результатов и установления диагноза поздних форм сифилиса.
Чувствительность невысокая, даже при нейросифилисе результаты расходятся с РИФц и РСК
Субъективность, требует высокой профессиональной подготовки и опыта

Слайд 34

РИФ-абс, РИФ-200
1954 г. T. Weller и A. Coons описали метод непрямой

иммунофлуоресценции, взаимодействие антител сыворотки с трепонемным антигеном визуализируются методом люминесцентной микроскопии с помощью сыворотки, меченой ФИТЦ
Приказ МЗ РФ №87, используют РИФ-абс, РИФ-200, РИФц, РИФ с капиллярной кровью
Трудоемкость, субъективность, невозможность стандартизации

Слайд 35

РИБТ
Реакция иммобилизации бледных трепонем (РИБТ) была предложена R, Nelson и

М. Mayer в 1949 г.
Антигеном служат живые патогенные бледные трепонемы штамма Nichols, полученные из 7-10-дневного кроличьего орхита.
В основе этой реакции лежит феномен обездвиживания бледных трепонем антителами сифилитической сыворотки (иммобилизинами) в присутствии активного комплемента морской свинки.
Сыворотки крови обследованных с ложноположительными результатами стандартных серологических реакций не вызывают иммобилизацию бледных трепонем вследствие того, что содержат только реагины и не включают специфические антитрепонемные антитела.

Слайд 36

РИБТ
Антиген для РИБТ представляет собой взвесь бледных трепонем в среде выживания

с количеством микроорганизмов 10-15 в каждом поле зрения.
РИБТ протекает только при условии избытка комплемента.
Для постановки РИБТ применяются классическая методика с использованием газового меланжа для создания оптимальных условий выживания бледных трепонем и меланжерная методика, анаэробные условия при которой достигаются с помощью резинового кольца, закрывающего оба просвета меланжера.
Через 18-20 ч после постановки реакции подсчитывают подвижные и неподвижные бледные трепонемы.
Иммобилизация бледных трепонем от 0 до 20% соответствует отрицательным результатам реакции, от 21 до 30 - сомнительным, от 31 до 50 - слабоположительным, от 51 до 100% - положительным.

Слайд 37

РИБТ
Процент иммобилизации - соотношение числа подвижных и неподвижных трепонем в опыте

(активный комплемент) и контроле (неактивный комплемент) - рассчитывается следующим образом:
Х = А – Б / А * 100%,
где А - количество подвижных трепонем в контроле;
Б - количество подвижных трепонем в опыте;
X - процент иммобилизации.
Положительные результаты РИБТ обнаруживаются примерно с середины вторичного свежего периода сифилиса и могут длительно сохраняться после проведенного лечения. При необходимости реакция воспроизводится со спинномозговой жидкостью, обнаруживая при этом высокую специфичность, но низкую чувствительность (порядка 40%).

Слайд 38

Недостатки РИБТ
РИБТ не пригодна для диагностики ранних форм сифилиса ввиду позднего

(не ранее 8-9 недель от момента заражения) появления антител - иммобилизинов;
она может давать ложноположительные результаты, в особенности у больных с аутоиммунной патологией, злокачественными заболеваниями, диабетом.
сложный, трудоемкий и дорогостоящий анализ, требующий высокой квалификации персонала и наличия вивария, в связи с чем в последние годы он проводится лишь в отдельных лабораториях.
используется как реакция -"арбитр" при расхождении результатов других серологических тестов, для дифференцирования ложноположительных результатов и установления диагноза поздних форм сифилиса
Чувствительность невысокая, даже при нейросифилисе результаты расходятся с РИФц и РСК.

Слайд 39

РПГА
1960-х гг., качественный и количественный варианты и микромодификация
Положительной становится спустя 3

недели после появления первичного аффекта
Для повышения чувствительности применяют агглютинацию на желатинолвых или полистороловых частицах
Разработан метод автоматизированного учета РПГА и количественной оценки результата
Чувствительность при вторичном 100%, при скрытом 97%, при позднем 94%, при первичном 70%
Специфичность 99% (выше, чем у РИФ-абс)

Слайд 40

ИФА
В 1970-х гг., выявление специфического комплекса антиген-антитело
IgM появляются уже после 10-14

дней после заражения, IgG после 3-4 недель
персистенция IgM рассматривается как наличие вирулентного возбудителя и активности инфекционного процесса, также диагностика врожденного сифилиса, так как не проникают через плаценту
«ловушечный» вариант обнаружения IgM позволяет исключить ложноположительные результаты при ревматизме, при положительных КСР, РИФ, РИТ у пожилых пациентов, заболеваниями ССС, легочной патологии, онкозаболеваниях и др.
Чувствительность 98 -100%
Специфичность 96 -100%

Слайд 41

Иммуноблоттинг
Определение IgM и IgG
Рекомбинантные антигены Т. Pallidum, содержащие иммунодоминантные участки

белков массой 47 кДа, 15 кДа, 17 кДа
Для подтверждения и верификации диагноза, дифференцированной оценки антителообразования к нескольким антигенным детерминантам для диагностики врожденного и других форм сифилиса
Чувствительность и специфичность — 98—100%

Слайд 42

Метод ИХЛ (иммунохемилюминесценции)
высокая чувствительность и специфичность (98—100%),
дает возможность количественного

определения уровня антител к возбудителю сифилиса, может быть использован для подтверждения сифилитической инфекции и скрининга.
Ограничения применения: не может быть использован для контроля эффективности терапии, может давать ложноположительный результат.

Слайд 43

ПБТ (простые быстрые тесты у постели больного, или иммунохроматографические тесты)
позволяют

проводить быстрое определение содержания трепонемоспецифических антител к возбудителю сифилиса в образцах сыворотки и цельной крови без использования специального лабораторного оборудования и применяться при оказании первичной медико-санитарной помощи, в том числе по эпидемиологическим показаниям.
Ограничения применения: не могут быть использованы для контроля эффективности терапии, могут давать ложноположительный результат.

Слайд 44

Характеристика методов лабораторной диагностики сифилиса
Метод чувствительность % специфичность %
1 темнпольная микроскопия

70 100
2 полимеразная цепная реакция 70-90 99
НТТ
3 реакция микропреципитации 70 80
4 реакция связывания комплимента 80 98
ТТ
5 реакция иммунофлуоресценции 84-99 97-98
6 реакция иммобилизации трепонем 79-94 99
7 иммуноферментный анализ 98-100 96-100
8 реакция пассивной гемагглютинации 93-98 98

Слайд 45

Слайд 46

Слайд 47

Примечания
■■ трепонемные тесты не могут быть использованы для контроля эффективности терапии,

т. к. антитрепонемные антитела длительно циркулируют в организме больного, перенесшего сифилитическую инфекцию;
■■ трепонемные тесты дают положительные результаты при невенерических трепонематозах и спирохетозах;
■■ трепонемные тесты могут давать ложноположительные реакции у больных с аутоиммунными заболеваниями, лепрой, онкологичекими заболеваниями, эндокринной патологией и при некоторых других заболеваниях.

Слайд 48

Общая характеристика трепонемных тестов
■■ применяется антиген трепонемного происхождения;
■■ чувствительность — 70—100%

(в зависимости от вида теста и стадии сифилиса);
■■ специфичность — 94—100%.
РИФ, ИФА, иммуноблоттинг (ИБ) становятся положительными с 3-й недели от момента заражения и ранее, РПГА и РИБТ — с 7–8-й.

Слайд 49

Ложноположительные серологические реакции на сифилис (ЛПР)
Ложноположительными или неспецифическими называют положительные результаты

серологических реакций на сифилис у лиц, не страдающих сифилитической инфекцией.
разделяют на острые (<6 месяцев) и хронические (> 6 месяцев).
К 80 годам распространенность ЛПР составляет 10%

Слайд 50

Ложноотрицательные серологические реакции на сифилис
Могут наблюдаться при вторичном сифилисе вследствие феномена

прозоны при тестировании неразведенной сыворотки,
а также при обследовании лиц с иммунодефицитным состоянием, например ВИЧ-инфицированных пациентов.

Слайд 51

Лабораторные тесты для подтверждения или исключения нейросифилиса
цитологическое исследование с подсчетом количества

форменных элементов, определение количества белка,
серологические тесты для выявления антител к T. pallidum в реакциях связывания комплемента с кардиолипиновым (РСКк) и трепонемным (РСКт) антигенами, РМП, РИФц (РИФ с цельным ликвором), РИБТ и ИФА.

Слайд 52

Диагностика врожденного сифилиса
■ более высокая позитивность серологических реакций в венозной крови

ребенка в сравнении с пуповинной кровью;
■ более высокая позитивность серологических реакций в венозной крови ребенка, взятой на 7–8-й день лечения, в сравнении с кровью матери;
■ макро- и микроскопические изменения плаценты;
■ рентгенологически установленные изменения длинных трубчатых костей;
■ патология в СМЖ;
■ температурная реакция обострения после начала лечения;
■ данные анамнеза: отсутствие лечения или неадекватное лечение матери;
■ положительный тест IgМ-ИФА или РИФабс- IgМ с венозной кровью ребенка (как дополнительный критерий).

Слайд 53

Эпидемиология гонореи
в мире ежегодно выявляется около 60 млн. случаев заболевания
В России

заболеваемости гонококковой инфекцией составляет 29,8 на 100 000 населения

Слайд 54

Neisseria gonorrhoeae
Паразит был открыт ученым из Германии Нейссером в 1879-м году.

Гонококк относится к группе Нейссерия. Является неподвижной бактерией. Внешне напоминает боб, состоящий из двух половинок, обращенных друг к другу. Имеет очень малый размер: длина его 1,5 микрометра. Размножается методом деления на 2 или 4 части. При какой-либо патологии делится почкованием

Слайд 55

Показания к обследованию на гонококковую инфекцию
Согласно клиническим рекомендациям РОДВК, диагностику гонококковой инфекции

следует проводить:
.лицам с клиническими и/или лабораторными признаками воспалительного процесса органов урогенитального тракта и репродуктивной системы, при наличии показаний (локализация возбудителя в прямой кишке, ротоглотке, конъюнктиве);
.при предгравидарном обследовании;
.при обследовании женщин во время беременности (троекратно: при постановке на учет по поводу беременности, при сроке беременности 27—30 и 36—40 нед.);
.беременным, поступающим на роды без документов о результатах обследования на ИПП;
.при предстоящих оперативных (инвазивных) манипуляциях на органах малого таза;
.лицам с перинатальными потерями и бесплодием в анамнезе;
.половым партнерам больных ИПП;
.лицам, перенесшим сексуальное насилие.

Слайд 56

Клиника гонореи – жалобы
Женщины:
■ гнойные или слизисто-гнойные выделения из половых путей;
■

зуд/жжение в области наружных половых органов;
■ диспареуния (болезненность во время полового акта);
■ дизурия (зуд, жжение, болезненность при мочеиспускании);
■ дискомфорт или боль в области нижней части живота.
Более чем у 50% женщин отмечается субъективно асимптомное течение заболевания.

Слайд 57

Клиника гонореи – жалобы
Мужчины
■ гнойные выделения из уретры;
■ дизурия (зуд,

жжение, болезненность при мочеиспускании);
■ зуд/жжение в области уретры;
■ диспареуния (болезненность во время полового акта);
■ боли в промежности с иррадиацией в прямую кишку.

Слайд 58

Объективные проявления
Женщины:
■ гиперемия и отечность слизистой оболочки наружного отверстия мочеиспускательного канала,

инфильтрация стенок уретры, слизисто-гнойное или гнойное уретральное отделяемое;
■ гиперемия и отечность слизистой оболочки вульвы, влагалища; слизисто-гнойные или гнойные выделения в заднем и боковых сводах влагалища;
■ отечность, гиперемия и эрозии слизистой оболочки шейки матки, слизисто-гнойные или гнойные выделения из цервикального канала.

Слайд 59

Объективные проявления
Мужчины:
■ гиперемия и отечность слизистой оболочки наружного отверстия мочеиспускательного канала,

инфильтрация стенок уретры;
■ слизисто-гнойные или гнойные выделения из уретры.

Слайд 60

Лабораторные тесты для диагностики гонококковой инфекции
микроскопическое исследование препарата, окрашенного 1% раствором метиленового

синего и по Граму обладает высокой чувствительностью (90—100%) и специфичностью (90—100%) только при исследовании уретрального отделяемого у мужчин с манифестными проявлениями заболевания и характеризуется низкой чувствительностью (45—64%) при исследовании цервикальных, фарингеальных и ректальных проб, а также при бессимптомной инфекции.
культуральное исследование
молекулярно-биологический метод идентификации возбудителя гонококковой инфекции N. Gonorrhoeae (селективная питательная среда и определение ферментативных свойств N. Gonorrhoeae (оксидазный тест и тесты ферментации сахаров)

Слайд 61

Правила получения материала для диагностики
■ сроки получения клинического материала с учетом

инкубационного периода заболевания и применения антибактериальных препаратов (до начала лечения или не ранее чем через 2 дня после окончания антибактериальной терапии);
■ получение образцов клинического материала из очагов максимальной концентрации возбудителя (с учетом пола, возраста пациента и возможных путей инфицирования);
■ получение клинического материала из уретры не ранее чем через 3 часа после последнего мочеиспускания, при наличии обильных гнойных выделений — через 15–20 минут после мочеиспускания;
■ получение клинического материала из цервикального канала перед менструацией или через 1–2 дня после ее окончания;
■ получение клинического материала в достаточном для лабораторных исследований объеме;
■ получение клинического материала одновременно для бактериоскопического исследования (нанесение клинического материала на 2 предметных стекла из каждого очага инфекции) и культуральной диагностики (на питательную или транспортную среду);
■ максимальное соблюдение условий получения клинического материала, предотвращающих возможную его контаминацию резидентной микрофлорой урогенитального тракта;
■ соблюдение условий герметичности, стерильности и целостности образцов клинического материала в процессе его транспортирования в лабораторию.

Слайд 62

Лабораторные исследования
Обязательные исследования
Верификация диагноза гонококковой инфекции базируется на результатах лабораторных исследований

— обнаружении N. gonorrhoeae — грамотрицательных диплококков с типичными морфологическими и тинкториальными свойствами с помощью одного из методов:
микроскопического исследования препарата, окрашенного 1% раствором метиленового синего и по Граму.
Достоинствами данного метода являются быстрота получения результата, простые условия транспортировки биообразцов в лабораторию, низкая стоимость исследования и высокая чувствительность (90–100%) и специфичность (90–100%) исследования уретрального отделяемого у мужчин.
При этом метод характеризуется субъективностью оценки результатов исследования и низкой чувствительностью (45–64%) для цервикальных, фарингеальных и ректальных проб и бессимптомной инфекции.

Слайд 63

Лабораторные исследования
Культуральные исследования - метод установления диагноза
У девочек до наступления менархе

и женщин в менопаузе диагноз гонореи устанавливается только на основании результатов культурального исследования (роста гонококка с определением его ферментативных свойств).

Слайд 64

Культуральная диагностика
Культивирование 18 – 24 часа в термостате 36 - 37°

с повышенным содержанием СО2 (5 – 7%), рН 7,4, при отрицательном результате срок увеличивается до 48 часов
Типичные колонии до 1 мм. от серого до белого цвета, гладкие прозрачные или слегка опалесцируют
Дифференциация проводится окраской по Грамму и оксидазным тестом
При сомнительном результате проводится подтверждающая идентификация по разложению углеводов (гонококк утилизирует только глюкозу)
Оценка чувствительности гонококка к антибиотикам

Слайд 65

Тесты амплификации нуклеиновых кислот весьма эффективны при бессимптомной и экстрагенитальной гонорее,

могут быть использованы при скрининговых обследованиях контингентов, в том числе с использованием неинвазивных методов

Слайд 66

Урогенитальный трихомоноз эпидемиология
По данным ВОЗ, ежегодно в мире трихомонозом заболевают более 180

млн человек, в основном лица сексуально активного возраста, из них около 120 млн женщин
. В Российской Федерации за последние 5 лет отмечено снижение уровня заболеваемости с 260,9 на 100 000 населения до 167,5 на 100 000 населения.

Слайд 67

Trichomonas vaginalis
Oткрыта французом Альфредом Доннэ в 1836 г.; ввиду наличия жгутиков

он назвал обнаруженное им в гнойном отделяемом влагалища женщин простейшее «трихомонадой» («трихос» - волос).
Влагалищная трихомонада - длина достигает 20-36 микронов. Она имеет ундулирующую мембрану (которая доходит только до середины тела)

Слайд 68

Пути инфицирования
У мужчин и женщин:
■ половой путь передачи
У детей:
■ прохождение через

родовые пути больной матери;
■ прямой половой контакт;
■ бытовой (в исключительных случаях девочки младшего возраста могут инфицироваться при нарушении правил личной гигиены и ухода за детьми).

Слайд 69

Объективные симптомы
Женщины:
■ гиперемия и отечность слизистой оболочки вульвы, влагалища;
■ зелено-желтые, жидкие

пенистые вагинальные выделения с неприятным запахом;
■ эрозивно-язвенные поражения слизистой оболочки наружных половых органов и/или кожи внутренней поверхности бедер;
■ петехиальные кровоизлияния на слизистой оболочке влагалищной части шейки матки («клубничная шейка матки»).
Для девочек препубертатного возраста, как правило, характерна выраженная клиническая картина заболевания.
Мужчины:
■ гиперемия и отечность в области наружного отверстия уретры;
■ скудные или умеренные уретральные выделения;
■ эрозивно-язвенные поражения кожи головки полового члена

Слайд 70

Правила получения клинического материала
■ сроки получения клинического материала с учетом инкубационного

периода заболевания и применения антипротозоидных препаратов (до начала лечения или не ранее чем через 14 дней после окончания терапии);
■ получение образцов клинического материала из очагов максимальной концентрации возбудителя (с учетом пола и возраста пациента);
■ получение клинического материала из уретры не ранее чем через 3 часа после последнего мочеиспускания, при наличии обильных уретральных выделений — через 15–20 минут после мочеиспускания;
■ получение клинического материала из влагалища и цервикального канала перед менструацией или через 1–2 дня после ее окончания;
■ получение клинического материала в достаточном для лабораторных исследований объеме;
■ соблюдение условий герметичности, стерильности, целостности и температурного режима хранения образцов клинического материала для бактериологического исследования после получения биообразцов и в процессе их транспортирования в лабораторию.

Слайд 71

Клинический материал
■ у женщин — из уретры, цервикального канала, боковых и

заднего сводов влагалища;
■ у мужчин — из уретры;
■ у детей и у лиц женского пола, не имевших в анамнезе половых контактов с пенетрацией — с наружного отверстия уретры, из уретры (при возможности), задней ямки преддверия влагалища, влагалища, при осмотре с использованием детских гинекологических зеркал – из цервикального канала;
■ у лиц женского пола, перенесших гистерэктомию, — из уретры, боковых сводов влагалища.

Слайд 72

Диагностические методы
Микроскопические
Культуральные
Серологические
Молекулярно-биологические: ДНК-гибридизация, ПЦР- анализ

Слайд 73

Лабораторные исследования
Обязательные исследования
обнаружении T. vaginalis с помощью одного из тестов:
микроскопическое

исследование нативного препарата с тенопольным или фазовоконтрастным конденсором. Недостатком данного метода является немедленное исследование после получения клинического материала.
Микроскопическое исследование препарата, окрашенного 1% раствором метиленового синего и по Граму, является наиболее доступным методом исследования, однако чувствительность его не превышает 40–60% в связи с субъективной оценкой результатов исследования.

Слайд 74

Микроскопическая диагностика
Нативная микроскопия:
Определение наличия и количества жгутиков, толчкообразное биение ундулирующей мембраны

и жгутиков простейшего, в скоплении клеточных элементовобнаружение единичных и малоподвижных особей

Окрашивание по Граму
Наиболее частые ошибки - принятие эпителиальных клеток, макрофагов, других клеточных элементов за трихомонады. Существование нескольких форм трихомонад также снижает надежность микроскопических исследований.

Слайд 75

Культуральная диагностика
Культуральное исследование является «золотым стандартом» диагностики и в особенности показано

при мало- и бессимптомных формах заболевания.
У девочек до наступления менархе диагноз урогенитального трихомоноза устанавливается только на основании результатов культурального исследования.

Слайд 76

Диагностика трихомониаза
с 70-х годов ведутся разработки серологических тестов выявления Ig G

в сыворотке крови
Прямой ИФА для выявления антигена соскобах и моче
ПЦР диагностика чувствительный метод – 97%, специфичность 98% по сравнению с 70% и 36% для культурального и микроскопического методов соответственно
ДНК-гибридизация также показала высокую чувствительность и специфичность и короткое время получения результата

Слайд 77

Характеристики методов диагностики трихомониаза

Слайд 78

Хламидийная инфекция
Хламидийная инфекция — инфекционное заболевание, передаваемое половым путем, возбудителем которого

является Chlamydia trachomatis
Chlamydia trachomatis –граммотрицательная внутриклеточная бактерия, относящаяся к порядку Chlamydiales, сем. Chlamydiacee, роду Chlamydia. Серотипы А, В, Ва, С – возбудители трахомы; D – K – урогенитального хламидиоза; L1, L2, L3 – венерической гранулемы.

Слайд 79

Жизненный цикл
Хламидии – облигатные внутриклеточные энергозависимые паразиты, обладающие дискретной оболочкой.

Особенностью жизненного цикла является двухстадийность: инфекционной и вегетативной стадии существования. Полиморфизм заключается в наличии двух форм: элементарные тельца и ретикулярные.
Элементарное тельце – спорообразная (0,15 - 0,3 мкм), метаболически неактивная структура ограниченная оболочкой и содержащей нуклеотид. Обладает тропизмом к цилиндрическому эпителию и при инфицировании превращается в РТ
РТ- крупная (1мкм), метаболически активная, репродуцирующаяся, неинфекционная клетка. Многократно делится образуя колонии (тельца Провачека). В течение 36 – 42 часов трансформируются в следующее поколение ЭТ

Слайд 80

Хламидийная инфекция - эпидемиология
наиболее высокая заболеваемость отмечается у лиц моложе 25

лет
В Российской Федерации заболеваемость хламидийной инфекцией в 2009 году составила 80,3 на 100 000 населения, в 2011 году 66,3 на 100000 населения.

Слайд 81

Пути инфицирования
У мужчин и женщин:
■ половой путь передачи (инфицирование происходит при

любых формах половых контактов с больным хламидийной инфекцией).
У детей:
■ трансплацентарный;
■ прохождение через родовые пути больной матери;
■ прямой половой контакт.

Слайд 82

Субъективные симптомы
Женщины (более 50% бессимптомное течение)
■ слизисто-гнойные или слизистые выделения из

половых путей;
■ кровянистые выделения после половых контактов;
■ межменструальные кровянистые выделения;
■ болезненность во время полового акта (диспареуния);
■ дизурия (зуд, жжение, болезненность при мочеиспускании);
■ дискомфорт или боль в нижней части живота.

Слайд 83

Субъективные симптомы
Мужчины:
■ слизисто-гнойные или слизистые необильные выделения из уретры;
■ зуд, жжение,

болезненность при мочеиспускании;
■ дискомфорт, зуд, жжение в области уретры;
■ болезненность во время полового акта (диспареуния);
■ учащенное мочеиспускание и императивные позывы на мочеиспускание (при переходе воспалительного процесса на задний отдел уретры и шейку мочевого пузыря);
■ боли в промежности с иррадиацией в прямую кишку.

Слайд 84

Лабораторные исследования
Изоляция Chlamydia trachomatis в культуре клеток
Обнаружение Chlamydia trachomatis методами амплификации

нуклеиновых кислот.
Обнаружение антигена Chlamydia trachomatis методом прямой иммунофлюоресценции (ПИФ) с моноклональными антителами.
Наименее чувствительным и специфичным методом диагностики хламидийной инфекции является иммуноферментный анализ (ИФА).

Слайд 85

Урогенитальный микоплазмоз
более чем у 40% больных с воспалительными заболеваниями урогенитальной системы

выявляются генитальные микоплазмы,
наибольшее клиническое значение имеют следующие представители класса Mollicutes (микоплазм): Mycoplasma genitalium, Ureaplasma, Mycoplasma hominis.
Mycoplasma genitalium в настоящее время рассматривается как патогенный микроорганизм, способный вызывать уретрит, цервицит, воспалительные заболевания органов малого таза и патологию беременности. Распространенность M.genitalium среди мужчин без признаков уретрита, по данным разных исследователей, колеблется от 0 до 17,7%.

Слайд 86

Особенности микоплазм
Отсутствие клеточной стенки, обуславливающее пластичность, полиморфизм, высокую осмотическую чувствительность,

резистентность к химическим агентам и препаратам, ингибирующим синтез клеточной стенки
Малым размером генома, едва достаточным для простого воспроизводства
Способны паразитировать на мембранах клеток эукариот

Слайд 87

Пути инфицирования
У мужчин и женщин:
■ половой путь передачи.
У детей:
■ прохождение через

родовые пути матери, инфицированные генитальными микоплазмами;
■ прямой половой контакт.

Слайд 88

Объективные симптомы
Уретрит, вызванный генитальными микоплазмами:
■ гиперемия и отечность слизистой оболочки наружного

отверстия мочеиспускательного канала, инфильтрация стенок уретры;
■ слизисто-гнойные или слизистые выделения из уретры.
Вагинит, вызванный генитальными микоплазмами:
■ гиперемия слизистой оболочки влагалища;
■ слизистые или слизисто-гнойные вагинальные выделения.
Цервицит, вызванный генитальными микоплазмами:
■ отечность, рыхлость, гиперемия и эрозии слизистой оболочки шейки матки;
■ слизистые или слизисто-гнойные выделения из цервикального канала.

Слайд 89

Правила получения клинического материала для лабораторных исследований
Для получения достоверных результатов лабораторных

исследований для идентификации генитальных микоплазм необходимо соблюдение ряда требований, к которым относятся:
■ сроки получения клинического материала с учетом применения нтибактериальных препаратов (до начала лечения или не ранее чем через 1 месяц после окончания антибактериальной терапии);
■ получение образцов клинического материала из очагов максимальной концентрации возбудителя (с учетом пола и возраста пациента);
■ получение клинического материала из уретры не ранее чем через 3 часа после последнего мочеиспускания, при наличии обильных уретральных выделений — через 15–20 минут после мочеиспускания;
■ получение клинического материала из цервикального канала и влагалища перед менструацией или через 1–2 дня после ее окончания;
■ получение клинического материала в достаточном для лабораторных исследований объеме;
■ максимальное соблюдение условий получения клинического материала, предотвращающих возможную его контаминацию резидентной микрофлорой урогенитального тракта;
■ соблюдение условий герметичности, стерильности и целостности образцов клинического материала в процессе его транспортирования в лабораторию.

Слайд 90

Клинический материал для лабораторных исследований
■ у мужчин — из уретры,

по показаниям — из предстательной железы; кроме того, возможно исследование эякулята и первой порции утренней мочи;
■ у женщин — из уретры, влагалища и цервикального канала;
■ у детей и лиц женского пола, не имевших в анамнезе половых контактов с пенетрацией, — из уретры (при возможности), влагалища, при осмотре с использованием детских гинекологических зеркал и при проведении вагиноскопии — из цервикального канала;
■ у лиц женского пола, перенесших гистерэктомию, — из уретры, боковых сводов влагалища.

Слайд 91

Лабораторная диагностика
Культивирование микоплазм с последующей идентифитацией
Иммунофлуоресценцию и серологические реакции
Методы молекулярной биологии

Слайд 92

Культуральная диагностика
Рост на полужидких и жидких средах при t 37º происходит1

– 3 и 3 – 5 дней соответственно. Посевы на твердых средах просматриваются при малом увеличении микроскопа
Наличие фермента уреазы используется для цветного теста с индикатором феноловым красным (Кларка). При росте U ureaiyticum цвет меняется от желтого к красному без помутнения. Среда U-9 позволяет количественно оценить содержание уреаплазм
Использование плотной среды позволяет определить чувствительнось к антибиотикам
Важным моментом является определение титра возбудителей – 10х4 КОЕ

Слайд 93

Лабораторная диагностика
РИФ - в мазках, соскобах реакция антиген-антитело с меченными

ФИТЦ антителами. Учитывается ярко зеленое свечение
ИФА – требует дополнительного изучения
ДНК и РНК диагностика превышает по результативности культуральную диагностику

Слайд 94

Диагностические критерии уретрита у мужчин
■ обнаружение 5 и более полиморфноядерных лейкоцитов в

поле зрения в мазках из уретры при просмотре более 5 полей зрения при увеличении микроскопа х1000;
■ обнаружение 10 и более лейкоцитов в осадке первой порции мочи (при увеличении микроскопа х400).

Слайд 95

Диагностические критерии у женщин
Уретрит - обнаружение 10 и более полиморфноядерных лейкоцитов

в поле зрения в мазках из уретры при просмотре более 5 полей зрения при увеличении микроскопа х1000
Вагинит - соотношение полиморфноядерных лейкоцитов к клеткам плоского эпителия более чем 1:1.
Цервицит - обнаружение 10 и более полиморфноядерных лейкоцитов в поле зрения в мазках из цервикального канала при просмотре более 5 полей зрения при увеличении микроскопа х1000.

Слайд 96

Бактериальный вагиноз
Бактериальный вагиноз — это инфекционный невоспалительный синдром полимикробной этиологии, связанный

с дисбиозом вагинального биотопа, который характеризуется резким увеличением облигатно- и факультативноанаэробных условнопатогенных микроорганизмов и количественным снижением или полным исчезновением лактобактерий, особенно перекись продуцирующих.
Частота его распространения в популяции колеблется от 12% до 80% и зависит от контингента обследованных женщин. Так, в группах планирования семьи она составляет 17–19%, среди лиц, обратившихся в клиники ИППП, — 24–37%, у беременных — 15–37%, у пациенток с жалобами на патологические выделения из половых путей частота выявления бактериального вагиноза достигает 87%, а у клинически здоровых женщин — 24%.

Слайд 97

Субъективные симптомы
■ Гомогенные беловато-серые вагинальные выделения, часто с неприятным запахом, усиливающиеся

после незащищенного полового акта или после менструации;
■ дискомфорт в области наружных половых органов;
■ диспареуния (болезненность во время полового акта);
■ редко — зуд и/или жжение на слизистой оболочке половых органов;
■ редко — дизурия (зуд, жжение, болезненность при мочеиспускании).

Слайд 98

Объективные симптомы
Диагноз устанавливается на основании наличия не менее чем 3 из

4 критериев (критерии Amsel):
■ гомогенные беловато-серые вагинальные выделения, густой консистенции, равномерно распределяющиеся по слизистой оболочке вульвы и влагалища;
■ значение рН вагинального экссудата > 4,5;
■ положительный результат аминотеста (появление «рыбного» запаха при смешивании на предметном стекле влагалищного
отделяемого с 10% раствором КОН в равных пропорциях);
■ изменения микроценоза влагалища, выявляемые при микроскопическом исследовании вагинального экссудата

Слайд 99

Правила получения клинического материала
■ сроки получения клинического материала — до начала

лечения или не ранее чем через 14 дней после окончания терапии системными и местнодействующими лекарственными препаратами;
■ получение клинического материала из влагалища не ранее чем через 72 часа после последнего незащищенного полового контакта;
■ получение клинического материала из влагалища перед менструацией или через 1–2 дня после ее окончания;
■ получение клинического материала в достаточном для лабораторных исследований объеме.
Исследованию подвергается клинический материал с боковых и заднего сводов влагалища.

Слайд 100

Лабораторные исследования
Диагноз устанавливается на основании наличия не менее чем 3 из

4 критериев (критерии Amsel), одним из которых является изменение микроценоза влагалища, выявляемого при микроскопическом исследовании вагинального экссудата.
При микроскопическом исследовании нативного и окрашенного по Граму вагинального мазка определяются следующие признаки:
■ массивное, реже — большое количество микрофлоры с преобладанием морфотипов строгих анаэробов и Gardnerella vаginаlis;
■ полное отсутствие либо единичное присутствие морфотипов лактобацилл;
■ вагинальный эпителий представлен клетками поверхностных слоев, редко встречаются промежуточные клетки, часто — так называемые «ключевые» клетки (эпителиальные клетки влагалища, на поверхности которых адгезирована грамвариабельная коккобациллярная микрофлора);
■ отсутствие лейкоцитарной реакции (у 1/3 женщин с бактериальным вагинозом лейкоцитарная реакция присутствует).

Слайд 101

Лабораторные исследования
Оценка общей микробной обсемененности вагинального отделяемого проводится по 4-балльной системе

— по числу микробных клеток, обнаруживаемых в одном поле зрения при микроскопии с иммерсией:
■ + — до 10 микробных клеток в поле зрения, незначительное их количество («скудный» рост);
■ ++ (2+) — от 11 до 100 микробных клеток в поле зрения, умеренное их количество;
■ +++ (3+) — от 100 до 1000 микробных клеток в поле зрения, большое их количество;
■ ++++ (4+) — более 1000 микробных клеток в поле зрения, массивное их количество.

Слайд 102

Слайд 103

Слайд 104

Слайд 105

Слайд 106

Микробиоценоз влагалища
Нормоценоз:
♦доминирование лактобацилл;
♦отсутствие грамотрицательной микрофлоры, спор, мицелия, псевдогифов;
♦наличие единичных лейкоцитов и

«чистых» эпителиальных клеток.
Промежуточный тип микробиоценоза влагалища:
♦умеренное или незначительное количество лактобацилл;
♦наличие грамположительных кокков, грамотрицательных палочек;
♦обнаружение лейкоцитов, моноцитов, макрофагов, эпителиальных клеток.
Дисбиоз влагалища:
♦незначительное количество или полное отсутствие лактобацилл;
♦обильная полиморфная грамотрицательная и грамположительная палочковая и кокковая микрофлора;
♦наличие ключевых клеток, вариабельное количество лейкоцитов, отсутствие фагоцитоза, его незавершённость.
Вагинит:
♦полимикробная картина мазка;
♦большое количество лейкоцитов, макрофагов, эпителиальных клеток, наличие выраженного фагоцитоза.

Слайд 107

Для более точной оценки гормональной стимуляции по цитологическому методу используют следующие

индексы.
■ Кариопикнотический индекс (КПИ) — отношение поверхностных клеток с пикнотическими ядрами (меньше 5 мкм) к поверхностным клеткам с ядрами более 6 мкм. При нормальной реакции рН влагалища величина КПИ (%) строго зависит от фазы овуляторного менструального цикла

Лабораторные исследования при заболеваниях, передающихся половым путём (ЗППП)

Содержание

Этиология сифилисаВозбудитель сифилиса относится к порядку Spirochaetales, семейству Spirochaetaeceae, роду Treponema,

Этиология сифилисаМикроорганизм также может существовать в виде цист и L-форм. Циста

Treponema pallidum

Клиника сифилисаИнкубационный период - 3–4 недели,Первичный сифилис (А51.0-А51.2) В месте внедрения

Первичный аффект

Вторичный сифилис (А51.3).Высыпаниями на коже — розеолезный (пятнистый), папулезный (узелковый), пустулезный

розеола

Ладонно-подошвенные сифилиды

Проявления сифилиса у ВИЧ инфицированныхИнфицированный вич

Особенности клиники ВИЧ-инфицированных

Клиника сифилисаТретичный сифилис (А52.7) высыпания на коже/слизистых оболочках (бугорковый и гуммозный

Современные особенности По данным ВОЗ ежегодно регистрируется 15 млн. случаевТенденция к

Методы лабораторной диагностикиПрямые и непрямыеТрепонемные и нетрепонемныеОтборочные (скрининговые) и подтверждающие (специфические

Нормативно-правовые актыПриказ МЗ РФ от 26.06.2001 №87 «О совершенствовании серологической диагностики

Прямые методыобнаружение бледной трепонемы в образцах, полученных из очагов поражений, с

Прямые методыМатериал с язв, эрозий, папул, пункция лимфоузловТканевая жидкостьБледная спирохета имеет

Прямые методыМолекулярно-биологический метод —полимеразная цепная реакция (ПЦР)С 1990-х гг., приемущество в

Прямые методыЗаражение сифилисом кроликов – RIT. Старейший метод выявления Treponema pallidum

Серологические тесты нетрепонемные тесты (НТТ): реакция микропреципитации (РМП) или аналог —

Общая характеристика нетрепонемных тестов■■ применяется антиген нетрепонемного происхождения (стандартизованный кардиолипиновый антиген);■■

Преимущества нетрепонемных тестов■■ низкая стоимость;■■ техническая простота выполнения;■■ быстрота получения результатов.Показания

РМПНа основе кардиолипидного антигенаСпецифичность около 98%Чувствительность при первичном сифилисе 81% при

Недостатки РМПЛожноположительные реакции более 3%Ложноотрицательные реакции (при избытке антител – феномен

VDRLИспользуется прогретая сыворотка криви и спинномозговая жидкостьРезультат визуализируется светооптическим микроскопом или

Ложноположительные реакциитехнические погрешности при постановке реакции, наличие в крови антител к

Серологические тесты ■ трепонемные тесты (ТТ): реакция пассивной гемагглютинации (РПГА, TPHA), иммуноферментный

Показатели клинической информативности исследований для ранней диагностики сифилиса

Показания к применению трепонемных тестов- подтверждение положительных результатов нетрепонемных тестов;- подтверждение

РСК с трепонемным антигеномИспользуется обработанный ультразвуком культурального антигена T. pallidumОсновной тест

РИТРИБТ не лишена недостатков: мало пригодна для диагностики ранних форм сифилиса

РИФ-абс, РИФ-2001954 г. T. Weller и A. Coons описали метод непрямой

РИБТРеакция иммобилизации бледных трепонем (РИБТ) была предложена R, Nelson и

РИБТАнтиген для РИБТ представляет собой взвесь бледных трепонем в сре­де выживания

РИБТПроцент иммобилизации - соотношение числа подвижных и непо­движных трепонем в опыте

Недостатки РИБТРИБТ не пригодна для диагностики ранних форм сифилиса ввиду позднего

РПГА1960-х гг., качественный и количественный варианты и микромодификацияПоложительной становится спустя 3

ИФАВ 1970-х гг., выявление специфического комплекса антиген-антителоIgM появляются уже после 10-14

Иммуноблоттинг Определение IgM и IgGРекомбинантные антигены Т. Pallidum, содержащие иммунодоминантные участки

Метод ИХЛ (иммунохемилюминесценции) высокая чувствительность и специфичность (98—100%), дает возможность количественного

ПБТ (простые быстрые тесты у постели больного, или иммунохроматографические тесты) позволяют

Характеристика методов лабораторной диагностики сифилисаМетод чувствительность % специфичность %1 темнпольная микроскопия

Примечания■■ трепонемные тесты не могут быть использованы для контроля эффективности терапии,

Общая характеристика трепонемных тестов■■ применяется антиген трепонемного происхождения;■■ чувствительность — 70—100%

Ложноположительные серологические реакции на сифилис (ЛПР) Ложноположительными или неспецифическими называют положительные результаты

Ложноотрицательные серологические реакции на сифилисМогут наблюдаться при вторичном сифилисе вследствие феномена

Лабораторные тесты для подтверждения или исключения нейросифилиса цитологическое исследование с подсчетом количества

Диагностика врожденного сифилиса ■ более высокая позитивность серологических реакций в венозной крови

Эпидемиология гонореив мире ежегодно выявляется около 60 млн. случаев заболеванияВ России

Neisseria gonorrhoeaeПаразит был открыт ученым из Германии Нейссером в 1879-м году.

Показания к обследованию на гонококковую инфекциюСогласно клиническим рекомендациям РОДВК, диагностику гонококковой инфекции

Клиника гонореи – жалобыЖенщины:■ гнойные или слизисто-гнойные выделения из половых путей;■

Клиника гонореи – жалобы Мужчины■ гнойные выделения из уретры;■ дизурия (зуд,

Объективные проявленияЖенщины:■ гиперемия и отечность слизистой оболочки наружного отверстия мочеиспускательного канала,

Объективные проявленияМужчины:■ гиперемия и отечность слизистой оболочки наружного отверстия мочеиспускательного канала,

Лабораторные тесты для диагностики гонококковой инфекции микроскопическое исследование препарата, окрашенного 1% раствором метиленового

Правила получения материала для диагностики■ сроки получения клинического материала с учетом

Лабораторные исследованияОбязательные исследованияВерификация диагноза гонококковой инфекции базируется на результатах лабораторных исследований

Лабораторные исследованияКультуральные исследования - метод установления диагнозаУ девочек до наступления менархе

Культуральная диагностикаКультивирование 18 – 24 часа в термостате 36 - 37°