Серологические реакции

Август 2, 2022

Главная
Медицина
Серологические реакции

Содержание

2. Цель: использование серологических методов для диагностики инфекций. Задачи: изучить реакции: Агглютинации; Преципитации; Нейтрализации; Связывания комплемента; Иммунофлюоресценции;
3. СЕРОЛОГИЧЕСКИЕ (от лат. serum - сыворотка) РЕАКЦИИ — реакции взаимодействия антигена и антитела, при которых один
4. Серологические реакции протекают в 2 фазы: 1-я фаза - специфическая — образование комплекса антиген – антитело
5. Виды серологических реакций: 1.Реакции агглютинации; 2. Реакции преципитации; 3.Реакции нейтрализации; 4.Реакции связывания комплемента; 5. Реакции иммунофлюоресценции;
6. РЕАКЦИЯ АГГЛЮТИНАЦИИ РА — склеивание антителами антигенов (бактерии, эритроциты) в присутствии электролита (изотонического раствора натрия хлорида).
7. Реакция агглютинации на стекле. На предметном стекле к капле иммунной диагностической сыворотки (взята на второй неделе
9. Реакция агглютинации в пробирках. К разведениям сыворотки крови больного в электролите добавляют взвесь убитых микроорганизмов. После
10. Реакция агглютинации в пробирках
11. РЕАКЦИЯ ПРЕЦИПИТАЦИИ Проводят в пробирках, наслаивая растворённый в электролите АГ на иммунную сыворотку. При оптимальном соотношении
12. РП применяют для определения антигена при диагностике инфекций (сибирская язва, менингит); в судебной медицине — для
13. Сущность реакции в том, что антигены и антитела, помещенные в разные лунки в агаре, диффундируют навстречу
14. РЕАКЦИЯ НЕЙТРАЛИЗАЦИИ. РН основана на способности АТ иммунной сыворотки нейтрализовать действие микробов и их токсинов на
15. РЕАКЦИЯ СВЯЗЫВАНИЯ КОМПЛЕМЕНТА РСК основана на адсорбции (оседании) комплемента на комплексе АГ—АТ. РСК применяют для идентификации
16. 2 фаза: смесь [АГ + АТ + комплемент] + АГ (эритроциты барана) + гемолитическая сыворотка (АТ
17. Если в 1 фазе АГ не соответствует (не специфичен, не соединится) антителу, то и комплемент останется
18. РЕАКЦИЯ ИММУНОФЛЮОРЕСЦЕНЦИИ К АТ иммунных сывороток присоединяют флюорохромы (люминесцирующие сыворотки). При взаимодействии АТ с АГ образуется
20. Иммуноферментный анализ ИФА – метод выявления АГ с помощью АТ, конъюгированных ферментом – меткой (щелочная фосфатаза).
21. Вывод: Серологические реакции применяют в лабораторной диагностике инфекций: для выявления антител в сыворотке больного (серодиагностика); для
22. Недостатки серологических методов: -Низкая чувствительность и экспрессность. Чувствительность всех методов составляет 105 у.е.
24. Скачать презентацию

Слайд 2

Цель: использование серологических методов для диагностики инфекций.
Задачи: изучить реакции:
Агглютинации;
Преципитации;
Нейтрализации;
Связывания комплемента;
Иммунофлюоресценции;
ИФА

Слайд 3

СЕРОЛОГИЧЕСКИЕ (от лат. serum - сыворотка) РЕАКЦИИ — реакции взаимодействия антигена

и антитела, при которых один из ингредиентов неизвестен. Они помогают исследовать реакцию антигена (микроорганизма) с антителами (иммуноглобулинами) крови.

Слайд 4

Серологические реакции протекают в 2 фазы:
1-я фаза - специфическая

— образование комплекса антиген – антитело - видимого изменения нет;
2-я фаза — неспецифическая - комплекс антиген — антитело взаимодействует с неспецифическими факторами среды. Результат взаимодействия виден невооруженным глазом (склеивание, растворение, помутнение).

Слайд 5

Виды серологических реакций:
1.Реакции агглютинации;
2. Реакции преципитации;
3.Реакции нейтрализации;
4.Реакции связывания

комплемента;
5. Реакции иммунофлюоресценции;
6. ИФА (иммуноферментный анализ).

Слайд 6

РЕАКЦИЯ АГГЛЮТИНАЦИИ
РА — склеивание антителами антигенов (бактерии, эритроциты) в присутствии электролита

(изотонического раствора натрия хлорида). При положительной РА образуются хлопья (на предметном стекле) или осадок (в пробирке).
РА используют для серодиагностики брюшного тифа, бруцеллёза (реакция Райта).
Для идентификации кишечных инфекций, коклюша.
Два метода проведения РА: реакция агглютинации на стекле (ориентировочная) и развёрнутая (в пробирках).

Слайд 7

Реакция агглютинации на стекле.
На предметном стекле к капле иммунной диагностической

сыворотки (взята на второй неделе болезни людей или у выздоровевших, т.к. в ней достаточно АТ или у гипериммунизированных лошадей) добавляют чистую культуру возбудителя, выделенного от больного. Через 1-5 мин в ранее прозрачной капле образуются хлопья, которые состоят из комплексов «АГ- АТ».

Слайд 8

Слайд 9

Реакция агглютинации в пробирках.
К разведениям сыворотки крови больного в электролите добавляют

взвесь убитых микроорганизмов. После инкубации, при 370С, отмечают наибольшее разведение (титр) сыворотки, при которой произошла агглютинация (образовался осадок).
Схема реакции агглютинации:
АТ (иммунная диагностическая сыворотка) + АГ (м/о или эритроциты) + изотонический раствор = хлопья

Слайд 10

Реакция агглютинации в пробирках

Слайд 11

РЕАКЦИЯ ПРЕЦИПИТАЦИИ
Проводят в пробирках, наслаивая растворённый в электролите АГ

на иммунную сыворотку. При оптимальном соотношении АГ и АТ на границе двух растворов образуется непрозрачное кольцо – преципитат. Отличие РП от РА - размер частиц антигена.

Слайд 12

РП применяют для определения антигена при диагностике инфекций (сибирская язва, менингит);

в судебной медицине — для определения видовой принадлежности крови, спермы; в санитарно - гигиенических исследованиях — при установлении фальсификации продуктов; с её помощью определяют филогенетическое родство животных и растений.

Слайд 13

Сущность реакции в том, что антигены и антитела, помещенные в разные

лунки в агаре, диффундируют навстречу друг другу и при взаимодействии образуют комплекс, который осаждается в виде линии преципитации.

Слайд 14

РЕАКЦИЯ НЕЙТРАЛИЗАЦИИ.
РН основана на способности АТ иммунной сыворотки нейтрализовать действие

микробов и их токсинов на клетки. РН проводят путём введения смеси АГ – АТ животным. При отсутствии у животных повреждающего действия говорят о нейтрализующем действии сыворотки. РН применяют для приготовления антитоксических сывороток.

Слайд 15

РЕАКЦИЯ СВЯЗЫВАНИЯ КОМПЛЕМЕНТА
РСК основана на адсорбции (оседании) комплемента на комплексе АГ—АТ.
РСК

применяют для идентификации и серодиагностики инфекций, вызванных спирохетами (реакция Вассермана), риккетсиями и вирусами.
Техника проведения РСК:
1 фаза (не различима глазом): инкубация смеси АГ (м/о) + АТ (иммунная сыворотка) + комплемент (сывороточная смесь от разных животных) + изотонический раствор

Слайд 16

2 фаза: смесь [АГ + АТ + комплемент] + АГ (эритроциты

барана) + гемолитическая сыворотка (АТ к эритроцитам барана) + изотонический раствор.
Учёт результатов:
Если комплемент присоединился к комплексу АГ – АТ в 1 фазе, то гемолиза эритроцитов барана нет, реакция положительная – в пробирке муть (комплекс АГ – АТ специфический).

Слайд 17

Если в 1 фазе АГ не соответствует (не специфичен, не

соединится) антителу, то и комплемент останется свободным. Свободный комплемент участвует во 2 фазе, вызывая гемолиз эритроцитов барана — результат отрицательный (в пробирках прозрачно — «лаковая кровь»).

Слайд 18

РЕАКЦИЯ ИММУНОФЛЮОРЕСЦЕНЦИИ
К АТ иммунных сывороток присоединяют флюорохромы (люминесцирующие сыворотки). При

взаимодействии АТ с АГ образуется светящийся комплекс, видимый с помощью люминесцентного микроскопа.
Метод высокочувствителен, прост, быстр (результат через 30мин), не требует выделения чистой культуры (обнаруживают микроорганизмы в кале при холере, мокроте при коклюше, мозговой ткани).
РИФ применяют для экспресс (ускоренной) диагностики инфекций.

Слайд 19

Слайд 20

Иммуноферментный анализ
ИФА – метод выявления АГ с помощью АТ, конъюгированных

ферментом – меткой (щелочная фосфатаза). ИФА применяют для диагностики ВИЧ, гепатита.
Радиоиммунологический анализ
АГ или АТ помечают радионуклидом. После образования комплекса АГ – АТ радиоактивный комплекс исследуют на радиоактивность, интенсивность излучения прямо пропорциональна количеству связавшихся молекул антигена и антител.

Слайд 21

Вывод:
Серологические реакции применяют в лабораторной диагностике инфекций:
для выявления антител в

сыворотке больного (серодиагностика);
для определения вида антигена – выделенный микроорганизм (идентификация).

Слайд 22

Недостатки серологических методов:
-Низкая чувствительность и экспрессность.
Чувствительность всех методов составляет 105

у.е.

Серологические реакции

Содержание

СЕРОЛОГИЧЕСКИЕ (от лат. serum - сыворотка) РЕАКЦИИ — реакции взаимодействия антигена

Серологические реакции протекают в 2 фазы: 1-я фаза - специфическая

Виды серологических реакций:1.Реакции агглютинации; 2. Реакции преципитации; 3.Реакции нейтрализации; 4.Реакции связывания

РЕАКЦИЯ АГГЛЮТИНАЦИИРА — склеивание антителами антигенов (бактерии, эритроциты) в присутствии электролита

Реакция агглютинации на стекле. На предметном стекле к капле иммунной диагностической

Реакция агглютинации в пробирках.К разведениям сыворотки крови больного в электролите добавляют

Реакция агглютинации в пробирках

РЕАКЦИЯ ПРЕЦИПИТАЦИИ Проводят в пробирках, наслаивая растворённый в электролите АГ

РП применяют для определения антигена при диагностике инфекций (сибирская язва, менингит);

Сущность реакции в том, что антигены и антитела, помещенные в разные

РЕАКЦИЯ НЕЙТРАЛИЗАЦИИ. РН основана на способности АТ иммунной сыворотки нейтрализовать действие

РЕАКЦИЯ СВЯЗЫВАНИЯ КОМПЛЕМЕНТАРСК основана на адсорбции (оседании) комплемента на комплексе АГ—АТ.РСК