Современные методы диагностики в клинической микробиологии

Август 9, 2022

Главная
Медицина
Современные методы диагностики в клинической микробиологии

Содержание

2. Микроскопический Микробиологический (бактериологический, микологический, вирусологический) Серологический Аллергологический Биологический Молекулярно-генетические Масс-спектрометрия Методы микробиологической диагностики
3. Микроскопический Микробиологический (бактериологический, микологический, вирусологический) Биологический Серологический Аллергологический Молекулярно-генетические Масс-спектрометрия! Методы микробиологической диагностики
4. Классическая микробиология Вирусология Иммунология Серологические методы и реакции ПЦР Объединение микробиологических лабораторий с КДЛ Возрождение классической
5. Контроль с помощью вакцинопрофилактики Контроль с помощью совершенствования противоэпидемических мероприятий Своевременная разработка и внедрение в практику
6. Ежегодное более чем у 100 видов микроорганизмов обнаруживают патогенетические факторы – значение в качестве условных патогенов
7. Отсутствие новых методических рекомендаций по работе с клиническим материалом Действующий Приказ N 535 «Об унификации микробиологических
8. «Этиологическая структура возбудителей инфекционных процессов в последнее десятилетие изменилась: значительно увеличился удельный вес заболеваний, вызываемых условно-патогенными
9. 750 –> 4600 видов микроорганизмов с потенциальным значением в патологии человека Факультативные (условно патогенные) возбудители инфекционных
10. МУ 4.2.2039-05. 4.2. Методы контроля. Биологические и микробиологические факторы. Техника сбора и транспортирования биоматериалов в микробиологические
11. Микроскопический метод исследования Автоматические покрасочные станции
12. Цель – идентификация микроорганизмов до определенным таксономических единиц по морфологическим и тинкториальным свойствам Основные задачи: Определить
13. Дополнительные задачи: Определить качество поступившего в лабораторию материала Определить наиболее возможного возбудителя патологического процесса в клиническом
14. Простые методы Щелочной синькой Фуксином Сложные методы По Граму По Цилю-Нильсену По Бурри-Гинсу По Леффлеру (Нейссеру)
15. Использование люминесцентных красителей Аурамин ОО, Родамин С – микобактерии Калькофлюор белый - грибы «Новые» способы окрасок
16. Люминесцентные красители (аурамин ОО, родамин С и др.) связываются с воскоподобными структурами микробной клетки. При облучении
17. В связи с этим окрашенные флюорохромными красителями препараты обычно исследуются при увеличении 250x - 450x, тогда
18. ПРИКАЗ от 21 марта 2003 г. N 109 О СОВЕРШЕНСТВОВАНИИ ПРОТИВОТУБЕРКУЛЕЗНЫХ МЕРОПРИЯТИЙ В РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
19. Микобактерии (окраска ауромин/родамин)
20. При обследовании 25 пациентов с диагнозом «зооантропонозная трихофития» использовали 2 метода диагностики: с использованием 10%-ного раствора
21. Грибы (окраска калькофлюор белый)
22. Грибы (окраска калькофлюор белый)
23. Грибы (окраска калькофлюор белый)
24. Клинический пример:
25. C.neoformans: микроскопия (нативный мазок из ликвора)
26. C.neoformans: микроскопия (окраска по Граму)
27. C.neoformans: микроскопия (окраска калькофлюор белый)
28. C.neoformans: микроскопия (окраска тушью)
29. Используется несколько красителей Дает возможность оценить морфологические и тинкториальные особенности микроорганизма (идентификация до рода (Грам +)
30. Образцы, в которых количество эпителиоцитов не превышает 10, а количество сегментоядерных лейкоцитов более 25 в поле
31. Микроскопическая картина мазка
32. Нити фибрина Щеточная кайма эпителия Коллагеновые и эластические волокна Фиброциты Измененные эритроциты Вакуоли и ядра измененных
33. Заключение должно отображать патологический процесс (количество лейкоцитов, фиброз, пролиферация), количественный и качественный состав микрофлоры, наличие возбудителей
34. Формулировка диагноза в заключении по результатам микроскопического исследования недопустима, так как она является прерогативой лечащего врача,
35. Клиническая лабораторная диагностика Том II Научное общество специалистов лабораторной медицины 2012 г. Национальное руководство
36. Микробиологический метод исследования
37. Окончательный результат с определением чувствительности к антимикробным препаратам через 4-7-10 дней Международные стандарты 48-72 часа (в
38. Микробиологический метод исследования
39. Использование специальных хромогенных сред и сред с добавлением селективных добавок Микробиологический метод исследования
40. Микробиологический метод исследования
41. Микробиологический метод исследования
42. Микробиологический метод исследования
43. Микробиологический метод исследования
44. Зачем так много? Рост на агаре через 24 часа инкубации Рост на агаре через 72 часа
45. Идентификация микроорганизмов до группы, рода, вида, подвида Возможность определения чувствительности к антимикробным препаратам Микробиологический метод исследования
46. Микробиологический метод исследования Определение продукции БЛРС Определение MRSA с помощью хромогенных сред
47. Позволяют сократить исследование до 2-3 дней В некоторых случаях до 24 часов Позволяют выделять и идентифицировать
48. Микробиологический метод исследования
49. Использования для идентификации микроорганизмов современных тест-систем позволяет не накапливать чистую культуру Идентификация проводится с использованием одной
50. Идентификация: какие варианты?
51. Автоматические анализаторы Тест-системы для полуавтоматического и ручного использования Микробиологический метод исследования
52. Автоматические анализаторы
53. Тест-системы для полуавтоматического и ручного использования
54. Тест-системы для полуавтоматического и ручного использования
55. MALDI-TOF масс-спектрометрия
61. Микробиологический метод исследования
62. Определение чувствительности к антибактериальным препаратам
64. Скачать презентацию

Слайд 2

Микроскопический
Микробиологический (бактериологический, микологический, вирусологический)
Серологический
Аллергологический
Биологический
Молекулярно-генетические
Масс-спектрометрия
Методы микробиологической диагностики

Слайд 3

Микроскопический
Микробиологический (бактериологический, микологический, вирусологический)
Биологический
Серологический
Аллергологический
Молекулярно-генетические
Масс-спектрометрия!
Методы микробиологической диагностики

Слайд 4

Классическая микробиология
Вирусология
Иммунология
Серологические методы и реакции
ПЦР
Объединение микробиологических лабораторий с КДЛ
Возрождение классической микробиологии
«Судьба»

микробиологии в России в XX веке

Слайд 5

Контроль с помощью вакцинопрофилактики
Контроль с помощью совершенствования противоэпидемических мероприятий
Своевременная разработка и

внедрение в практику методических рекомендаций по микробиологической диагностике

Облигатные возбудители инфекционных заболеваний

Слайд 6

Ежегодное более чем у 100 видов микроорганизмов обнаруживают патогенетические факторы –

значение в качестве условных патогенов
Регулярные пересмотры классификаций микроорганизмов с изменением таксономического положения и наименований
Внедрение в практику принципиально новых методов исследования

Факультативные (условно патогенные) возбудители инфекционных заболеваний

Слайд 7

Отсутствие новых методических рекомендаций по работе с клиническим материалом
Действующий Приказ N

535 «Об унификации микробиологических (бактериологических) методов исследования, применяемых в клинико-диагностических лабораториях лечебно-профилактических учреждений» от 22 апреля 1985 г.

Факультативные (условно патогенные) возбудители инфекционных заболеваний

Слайд 8

«Этиологическая структура возбудителей инфекционных процессов в последнее десятилетие изменилась: значительно увеличился

удельный вес заболеваний, вызываемых условно-патогенными микроорганизмами (около 200 видов условно-патогенных микроорганизмов). Возрастает роль неспорообразующих анаэробов и некоторых других видов микроорганизмов, роль которых в инфекционной патологии ранее была неизвестна»

Приказ N 535 от 22 апреля 1985 г

Слайд 9

750 –> 4600 видов микроорганизмов с потенциальным значением в патологии человека
Факультативные

(условно патогенные) возбудители инфекционных заболеваний

Слайд 10

МУ 4.2.2039-05. 4.2.
Методы контроля. Биологические и микробиологические факторы.
Техника сбора

и транспортирования биоматериалов в микробиологические лаборатории.
Методические указания
Дата введения: 01.07.2006

Забор и транспортировка материала

Слайд 11

Микроскопический метод исследования
Автоматические покрасочные станции

Слайд 12

Цель – идентификация микроорганизмов до определенным таксономических единиц по морфологическим и

тинкториальным свойствам
Основные задачи:
Определить морфологию микроорганизмов
Определить цвет, в который окрашиваются определенные структуры клетки микроорганизмов
Определить наличие или отсутствие микроорганизма в исследуемом материале

Микроскопический метод исследования

Слайд 13

Дополнительные задачи:
Определить качество поступившего в лабораторию материала
Определить наиболее возможного возбудителя патологического

процесса в клиническом материале
Выявить взаимоотношения микроорганизмов с клетками организма-хозяина
По определенным признакам взаимоотношений микроорганизмов с клетками организма-хозяина клиницист может поставить предварительный или окончательный диагноз

Микроскопический метод исследования

Слайд 14

Простые методы
Щелочной синькой
Фуксином
Сложные методы
По Граму
По Цилю-Нильсену
По Бурри-Гинсу
По Леффлеру (Нейссеру)
Наиболее распространенные способы

окрасок клинического материала для определения микрофлоры

Слайд 15

Использование люминесцентных красителей
Аурамин ОО, Родамин С – микобактерии
Калькофлюор белый - грибы
«Новые»

способы окрасок клинического материала для определения микрофлоры

Слайд 16

Люминесцентные красители (аурамин ОО, родамин С и др.) связываются с воскоподобными

структурами микробной клетки. При облучении окрашенных клеток возбуждающим светом они начинают светиться оранжевым или ярко-желтым светом на черном или темно-зеленом фоне.
За счет свечения вокруг клетки образуется ореол, благодаря которому видимые размеры светящейся клетки превышают ее физические размеры.

Люминесцентные красители для выявления микобактерий

Слайд 17

В связи с этим окрашенные флюорохромными красителями препараты обычно исследуются при

увеличении 250x - 450x, тогда как окрашенные фуксином - при увеличении 800x - 1000x. Разница в увеличении позволяет микроскописту видеть одновременно в 4 -10 раз большее поле зрения, что существенно сокращает время, необходимое для просмотра мазка. Подсчитано, что если микроскопическое исследование необходимой площади мазка при окраске по Ziehl-Neelsen продолжается приблизительно 10 минут, то для исследования той же площади мазка методом люминесцентной микроскопии потребуется только 2 - 3 минуты.

Люминесцентные красители для выявления микобактерий

Слайд 18

ПРИКАЗ
от 21 марта 2003 г. N 109
О СОВЕРШЕНСТВОВАНИИ ПРОТИВОТУБЕРКУЛЕЗНЫХ

МЕРОПРИЯТИЙ
В РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

Слайд 19

Микобактерии (окраска ауромин/родамин)

Слайд 20

При обследовании 25 пациентов с диагнозом «зооантропонозная трихофития» использовали 2 метода

диагностики: с использованием 10%-ного раствора едкого калия (КОН) — 1-я группа и 10%-ного раствора КОН с добавлением калькофлюора белого — 2-я группа. Было установлено, что во 2-й группе положительный результат составил 88% случаев (22 больных), а в 1-й группе — 76% случаев (19 больных). Таким образом, использование калькофлюора белого на 11% повысило диагностические возможности микроскопии.

Микроскопия грибов с использованием калькофлюора белого

З.Р. Хисматуллина, Д.Р. Попова, О.Р. Мухамадеева, Г.Р. Мустафина. Башкирский государственный медицинский университет, г. Уфа

Слайд 21

Грибы (окраска калькофлюор белый)

Слайд 22

Грибы (окраска калькофлюор белый)

Слайд 23

Грибы (окраска калькофлюор белый)

Слайд 24

Клинический пример:

Слайд 25

C.neoformans: микроскопия (нативный мазок из ликвора)

Слайд 26

C.neoformans: микроскопия (окраска по Граму)

Слайд 27

C.neoformans: микроскопия (окраска калькофлюор белый)

Слайд 28

C.neoformans: микроскопия (окраска тушью)

Слайд 29

Используется несколько красителей
Дает возможность оценить морфологические и тинкториальные особенности микроорганизма (идентификация

до рода (Грам +) и его взаимоотношения с клетками организма-хозяина

Сложные методы окраски Окраска по Граму

Слайд 30

Образцы, в которых количество эпителиоцитов не превышает 10, а количество сегментоядерных

лейкоцитов более 25 в поле зрения, используются для дальнейшего исследования.

Оценка качества клинического материала до начала работы

Слайд 31

Микроскопическая картина мазка

Слайд 32

Нити фибрина
Щеточная кайма эпителия
Коллагеновые и эластические волокна
Фиброциты
Измененные эритроциты
Вакуоли и ядра измененных

макрофагов
Осадки красителей
Жировые капли

Причины ошибок при микроскопическом исследовании

Слайд 33

Заключение должно отображать патологический процесс (количество лейкоцитов, фиброз, пролиферация), количественный и

качественный состав микрофлоры, наличие возбудителей микозов
Заключение формируется не в виде диагноза, а как развернутое описание микроскопической картины

Заключение по результатам микроскопического исследования

Слайд 34

Формулировка диагноза в заключении по результатам микроскопического исследования недопустима, так как

она является прерогативой лечащего врача, а не лабораторного работника.

Заключение по результатам микроскопического исследования

Слайд 35

Клиническая лабораторная диагностика
Том II
Научное общество специалистов лабораторной медицины
2012 г.
Национальное руководство

Слайд 36

Микробиологический метод исследования

Слайд 37

Окончательный результат с определением чувствительности к антимикробным препаратам через 4-7-10 дней
Международные

стандарты 48-72 часа (в идеале первые сутки после получения клинического материала)

Микробиологический метод исследования

Слайд 38

Микробиологический метод исследования

Слайд 39

Использование специальных хромогенных сред и сред с добавлением селективных добавок
Микробиологический метод

исследования

Слайд 40

Микробиологический метод исследования

Слайд 41

Микробиологический метод исследования

Слайд 42

Микробиологический метод исследования

Слайд 43

Микробиологический метод исследования

Слайд 44

Зачем так много?
Рост на агаре через 24 часа инкубации
Рост на агаре

через 72 часа инкубации

Слайд 45

Идентификация микроорганизмов до группы, рода, вида, подвида
Возможность определения чувствительности к антимикробным

препаратам

Микробиологический метод исследования Хромогенные среды

Слайд 46

Микробиологический метод исследования
Определение продукции БЛРС
Определение MRSA с помощью хромогенных

сред

Слайд 47

Позволяют сократить исследование до 2-3 дней
В некоторых случаях до 24 часов
Позволяют

выделять и идентифицировать микроорганизмы при первичном посеве
Сокращают расходы на дополнительную идентификацию

Микробиологический метод исследования Хромогенные среды

Слайд 48

Микробиологический метод исследования

Слайд 49

Использования для идентификации микроорганизмов современных тест-систем позволяет не накапливать чистую культуру
Идентификация

проводится с использованием одной или нескольких колоний, выросших на чашке с первичным посевом
Сокращение исследования на один день

Микробиологический метод исследования

Слайд 50

Идентификация: какие варианты?

Слайд 51

Автоматические анализаторы
Тест-системы для полуавтоматического и ручного использования
Микробиологический метод исследования

Слайд 52

Автоматические анализаторы

Слайд 53

Тест-системы для полуавтоматического и ручного использования

Слайд 54

Тест-системы для полуавтоматического и ручного использования

Слайд 55

MALDI-TOF масс-спектрометрия

Слайд 56

Слайд 57

Слайд 58

Слайд 59

Слайд 60

Слайд 61

Микробиологический метод исследования

Слайд 62

Современные методы диагностики в клинической микробиологии

Содержание

Контроль с помощью вакцинопрофилактикиКонтроль с помощью совершенствования противоэпидемических мероприятийСвоевременная разработка и

Ежегодное более чем у 100 видов микроорганизмов обнаруживают патогенетические факторы –

Отсутствие новых методических рекомендаций по работе с клиническим материаломДействующий Приказ N

«Этиологическая структура возбудителей инфекционных процессов в последнее десятилетие изменилась: значительно увеличился

750 –> 4600 видов микроорганизмов с потенциальным значением в патологии человекаФакультативные

МУ 4.2.2039-05. 4.2. Методы контроля. Биологические и микробиологические факторы. Техника сбора

Микроскопический метод исследованияАвтоматические покрасочные станции

Цель – идентификация микроорганизмов до определенным таксономических единиц по морфологическим и

Дополнительные задачи:Определить качество поступившего в лабораторию материалаОпределить наиболее возможного возбудителя патологического

Простые методыЩелочной синькойФуксиномСложные методыПо ГрамуПо Цилю-НильсенуПо Бурри-ГинсуПо Леффлеру (Нейссеру)Наиболее распространенные способы

Использование люминесцентных красителейАурамин ОО, Родамин С – микобактерииКалькофлюор белый - грибы«Новые»

Люминесцентные красители (аурамин ОО, родамин С и др.) связываются с воскоподобными

В связи с этим окрашенные флюорохромными красителями препараты обычно исследуются при

ПРИКАЗ от 21 марта 2003 г. N 109 О СОВЕРШЕНСТВОВАНИИ ПРОТИВОТУБЕРКУЛЕЗНЫХ

Микобактерии (окраска ауромин/родамин)

При обследовании 25 пациентов с диагнозом «зооантропонозная трихофития» использовали 2 метода

Грибы (окраска калькофлюор белый)

Грибы (окраска калькофлюор белый)

Грибы (окраска калькофлюор белый)

Клинический пример:

C.neoformans: микроскопия (нативный мазок из ликвора)

C.neoformans: микроскопия (окраска по Граму)

C.neoformans: микроскопия (окраска калькофлюор белый)

C.neoformans: микроскопия (окраска тушью)

Используется несколько красителейДает возможность оценить морфологические и тинкториальные особенности микроорганизма (идентификация

Образцы, в которых количество эпителиоцитов не превышает 10, а количество сегментоядерных

Микроскопическая картина мазка

Нити фибринаЩеточная кайма эпителияКоллагеновые и эластические волокнаФиброцитыИзмененные эритроцитыВакуоли и ядра измененных

Заключение должно отображать патологический процесс (количество лейкоцитов, фиброз, пролиферация), количественный и

Формулировка диагноза в заключении по результатам микроскопического исследования недопустима, так как

Клиническая лабораторная диагностикаТом IIНаучное общество специалистов лабораторной медицины2012 г.Национальное руководство

Микробиологический метод исследования

Окончательный результат с определением чувствительности к антимикробным препаратам через 4-7-10 днейМеждународные

Микробиологический метод исследования

Использование специальных хромогенных сред и сред с добавлением селективных добавокМикробиологический метод

Микробиологический метод исследования

Микробиологический метод исследования

Микробиологический метод исследования

Микробиологический метод исследования

Зачем так много?Рост на агаре через 24 часа инкубацииРост на агаре

Идентификация микроорганизмов до группы, рода, вида, подвидаВозможность определения чувствительности к антимикробным

Микробиологический метод исследования Определение продукции БЛРС Определение MRSA с помощью хромогенных

Позволяют сократить исследование до 2-3 днейВ некоторых случаях до 24 часовПозволяют

Микробиологический метод исследования

Использования для идентификации микроорганизмов современных тест-систем позволяет не накапливать чистую культуруИдентификация

Идентификация: какие варианты?

Автоматические анализаторыТест-системы для полуавтоматического и ручного использованияМикробиологический метод исследования

Автоматические анализаторы

Тест-системы для полуавтоматического и ручного использования

Тест-системы для полуавтоматического и ручного использования

MALDI-TOF масс-спектрометрия

Микробиологический метод исследования

Определение чувствительности к антибактериальным препаратам

Похожие презентации

Контроль с помощью вакцинопрофилактики
Контроль с помощью совершенствования противоэпидемических мероприятий
Своевременная разработка и

Отсутствие новых методических рекомендаций по работе с клиническим материалом
Действующий Приказ N

750 –> 4600 видов микроорганизмов с потенциальным значением в патологии человека
Факультативные

МУ 4.2.2039-05. 4.2.
Методы контроля. Биологические и микробиологические факторы.
Техника сбора

Микроскопический метод исследования
Автоматические покрасочные станции

Дополнительные задачи:
Определить качество поступившего в лабораторию материала
Определить наиболее возможного возбудителя патологического

Простые методы
Щелочной синькой
Фуксином
Сложные методы
По Граму
По Цилю-Нильсену
По Бурри-Гинсу
По Леффлеру (Нейссеру)
Наиболее распространенные способы

Использование люминесцентных красителей
Аурамин ОО, Родамин С – микобактерии
Калькофлюор белый - грибы
«Новые»

ПРИКАЗ
от 21 марта 2003 г. N 109
О СОВЕРШЕНСТВОВАНИИ ПРОТИВОТУБЕРКУЛЕЗНЫХ

Используется несколько красителей
Дает возможность оценить морфологические и тинкториальные особенности микроорганизма (идентификация

Нити фибрина
Щеточная кайма эпителия
Коллагеновые и эластические волокна
Фиброциты
Измененные эритроциты
Вакуоли и ядра измененных

Клиническая лабораторная диагностика
Том II
Научное общество специалистов лабораторной медицины
2012 г.
Национальное руководство

Окончательный результат с определением чувствительности к антимикробным препаратам через 4-7-10 дней
Международные

Использование специальных хромогенных сред и сред с добавлением селективных добавок
Микробиологический метод

Зачем так много?
Рост на агаре через 24 часа инкубации
Рост на агаре

Идентификация микроорганизмов до группы, рода, вида, подвида
Возможность определения чувствительности к антимикробным

Микробиологический метод исследования
Определение продукции БЛРС
Определение MRSA с помощью хромогенных

Позволяют сократить исследование до 2-3 дней
В некоторых случаях до 24 часов
Позволяют

Использования для идентификации микроорганизмов современных тест-систем позволяет не накапливать чистую культуру
Идентификация

Автоматические анализаторы
Тест-системы для полуавтоматического и ручного использования
Микробиологический метод исследования