Ускоренные методы санитарно-микробиологических исследований

Август 8, 2022

Главная
Медицина
Ускоренные методы санитарно-микробиологических исследований

Содержание

5. Общие колиформные бактерии - микроорганизмы семейства Enterobacteriaceae, характеризующиеся наличием фермента β-галактозидазы, способного расщеплять специфические хромогенные субстраты,
6. E.coli - колиформные бактерии, характеризующиеся наличием фермента β-глюкуронидазы, способного расщеплять специфические хромогенные или флюорогенные субстраты, входящие
7. Метод одновременного определения КБ и E.coli с использованием хромогенных и флюорогенных питательных сред является высокочувствительным, специфичным,
9. 1. Входящие в состав индикаторных сред качественные пептоны и фосфатный буфер обеспечивают оптимальные условия роста КБ
10. Принцип действия хромогенных и флюорогенных питательных сред Основан на выявлении специфических ферментов - β-галактозидазы колиформных бактерий;
11. УТВЕРЖДАЮ Заместитель Главного государственного санитарного врача Российской Федерации - Главный врач Федерального центра Госсанэпиднадзора Минздрава России
12. Раздел 2. Определение ОКБ и E.coli в воде. Общие положения и область применения МР устанавливают методы
13. Определение количества ОКБ и E.coli ММФ метод основан на фильтрации нормируемого объема воды через мембранные фильтры,
14. Техника определения КБ и Е.соli ММФ Объем воды, установленный в соответствии с НД, фильтровать через МФ
16. Состав ср. Chromocult Coliform Agar (г/дм3) Пептоны - 3,0 Хлорид натрия - 5,0 Дигидрофосфат натрия однозамещенный
17. Состав ср. Chromocult Coliform Agar ES (г/дм3) Пептоны - 5,0 хлорид калия - 7,5 MOPS -10,0
23. Дифференцировка Гр (-) бактерий на хромогенных средах Chromocult Coliform Agar и Chromocult Coliform Agar ES
26. Качественное определение ОКБ и E.coli проводят методом прямого посева (метод основан на внесении стерильной гранулированной индикаторной
27. Readycult Conforms 100 В среде β-галактозидаза КБ расщепляет хромогенный субстрат (X-GAL) с образованием окрашенного продукта, который
28. Техника качественного определения ОКБ и E.coli методом прямого посева К 100 мл пробы воды (при необходимости
31. Состав ср. Readycult Conforms 100 (гр./пакет/100 мл пробы) Пептоны - 0,5 Хлорид натрия - 0,5 Сорбитол
33. Дифференцировка Гр (-) бактерий на хромогенной среде Readycult Conforms 100
35. Учет и оценка результатов по определению ОКБ и E.coli в нормируемом объеме воды методом мембранно фильтрации
38. УТВЕРЖДАЮ Заместитель Главного государственного санитарного врача Российской Федерации -Главный врач Федерального центра Госсанэпиднадзора Минздрава России Е.Н.Беляев
39. Общие положения и область применения МР устанавливают методы проведения исследований по ускоренному определению и выявлению КБ
40. Сущность методов Метод выявления КБ и E.coli основан на высеве определенного количества исследуемого образца или его
41. Принцип работы ср. Fluorocult LMX Broth на среде β-галактозидаза КБ расщепляет хромогенный субстрат (X-GAL) с образованием
42. Техника выявления КБ и E.coli в определенной навеске образца Навеску образца (или ряд десятикратных разведений) в
44. Дифференцировка Гр (-) бактерий на хромогенной среде Fluorocult LMX Broth
45. Состав среды Fluorocult LMX Broth (в г/дм3) Пептоны - 5,0 Хлорид натрия - 5,0 Сорбитол -1,0
46. При исследовании продовольственного сырья и пищевых продуктов (в том числе кисломолочных, заквасок, бактериальных концентратов и бактериальных
48. Техника определения количества КБ и E.coli При определении количества КБ и E.coli в 1г/см3 образца в
49. Дифференцировка Гр (-) бактерий на хромогенных средах Chromocult Coliform Agar и Chromocult Coliform Agar ES
50. Учет и оценка результатов Учет и оценку результатов по выявлению и количественному определению КБ и E.coli
62. ФЕДЕРАЛЬНЫЙ ЦЕНТР ГИГИЕНЫ И ЭПИДЕМИОЛОГИИ РОСПОТРЕБНАДЗОРА ФЕДЕРАЛЬНАЯ СЛУЖБА ПО НАДЗОРУ В СФЕРЕ ЗАЩИТЫ ПРАВ ПОТРЕБИТЕЛЕЙ И
63. МР устанавливают методы проведения лабораторных исследований по ускоренному выявлению бактерий рода Salmonella в пищевых продуктах, продовольственном
64. Принцип действия среды MSRV Селективная полужидкая среда MSRV с новобиоцином предназначена для ускоренного выявления бактерий рода
65. Принцип метода Метод выявления бактерий рода Salmonella основан на высеве определенного количества исследуемого образца или его
66. Техника определения 1. Навеску анализируемого образца в массе/объеме которой предусматривается отсутствие бактерий рода Salmonella в соответствии
67. Забуференная пептонная вода – Peptone Water (Buffered) Состав (г/л): Пептон - 10,0 г Хлористый натрий -
68. Модифицированная среда Раппопорта-Василиадиса (MSRV) Состав (г/л): Триптоза - 4,59 г Гидролизат казеина - 4,59 г Хлористый
89. Скачать презентацию

Слайд 2

Слайд 3

Слайд 4

Слайд 5

Общие колиформные бактерии
- микроорганизмы семейства Enterobacteriaceae, характеризующиеся наличием фермента β-галактозидазы, способного

расщеплять специфические хромогенные субстраты, входящие в состав селективных индикаторных сред

Слайд 6

E.coli
- колиформные бактерии, характеризующиеся наличием фермента β-глюкуронидазы, способного расщеплять специфические хромогенные

или флюорогенные субстраты, входящие в состав селективных индикаторных сред, и фермента триптофаназы, расщепляющей триптофан
- E.coli - как индикатор фекального загрязнения регламентирован Директивой ЕС 98/83 взамен термотолерантных бактерий

Слайд 7

Метод одновременного определения КБ и E.coli с использованием хромогенных и флюорогенных

питательных сред является высокочувствительным, специфичным, позволяет сократить время исследования до 24 часов

Слайд 8

Слайд 9

1. Входящие в состав индикаторных сред качественные пептоны и фосфатный буфер

обеспечивают оптимальные условия роста КБ 2. Триптофан дает возможность проведения индольного теста для окончательного подтверждения E.coli 3. Пируват натрия восстанавливает поврежденные клетки КБ и повышает чувствительность метода 4. Использование селективных агентов с различным ингибирующим эффектом позволяет дифференцировано подходить к определению КБ и E.coli в зависимости от уровня микробной контаминации пробы воды

Достоинства хромогенных сред

Слайд 10

Принцип действия хромогенных и флюорогенных питательных сред
Основан на выявлении специфических ферментов

- β-галактозидазы колиформных бактерий; β-глюкуронидазы и триптофаназы E.coli
Специфическая активность ферментов проявляется в результате расщепления хромогенных и флюорогенных субстратов, входящих в состав индикаторных сред, с образованием флюоресцирующих или имеющих окраску продуктов, которые изменяют цвет (вызывают флюоресценцию) жидких сред или характерно окрашивают колонии на агаризованных средах

Слайд 11

УТВЕРЖДАЮ
Заместитель Главного государственного санитарного врача Российской Федерации - Главный врач Федерального

центра Госсанэпиднадзора Минздрава России
Е.Н.Беляев
10 февраля 2004 г.
№24ФЦ/513
Дата введения: 01 марта 2004 г.
Определение колиформных бактерий и Е.соМ с
использованием хромогенных и флюорогенных
индикаторных сред производства Merck (Германия)
МЕТОДИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ
Раздел 2. Определение общих колиформных бактерий и Е.соli в воде

Слайд 12

Раздел 2. Определение ОКБ и E.coli в воде. Общие положения и область

применения

МР устанавливают методы проведения лабораторных исследований по ускоренному качественному и количественному определению ОКБ и Е.соli с использованием хромогенных и флюорогенных индикаторных сред в пробах продукции безалкогольного производства, воды питьевого и хозяйственно- бытового водоснабжения, водных объектов рекреации, сточных вод и др.

Слайд 13

Определение количества ОКБ и E.coli ММФ
метод основан на фильтрации нормируемого объема

воды через мембранные фильтры, инкубации посевов на агаризованных хромогенных индикаторных средах, последующем выявлении и подсчете характерно окрашенных колоний, выросших на фильтре

Слайд 14

Техника определения КБ и Е.соli ММФ
Объем воды, установленный в соответствии

с НД, фильтровать через МФ с соблюдением требований ГОСТ 30712, МУК 4.2.1018-01
МФ поместить на поверхность среды:
- Chromocult Coliform Agar - при исследовании проб воды с низким уровнем микробной контаминации (питьевая вода)
- или на поверхность среды усиленной селективности Chromocult Coliform Agar ES - при исследовании проб воды с высоким уровнем микробной контаминации (вода поверхностных водоемов, сточные воды)
3. Посевы инкубировать при температуре (37±1 )°С в течение 21±3 часов
4. После инкубирования подсчитать характерно окрашенные колонии, выросшие на фильтре:
- Колиформные бактерии (за исключением E.coli) образуют колонии розового (до красного) цвета
- E.coli образуют колонии темно-синего (до фиолетового) цвета
5. Для подтверждения E.coli на среде Chromocult Coliform Agar нанести каплю реактива Ковача на характерно окрашенные колонии (индольный тест). Изменение цвета реагента до розово-красного в течение нескольких секунд подтверждает наличие E.coli.
6. Для подсчета количества ОКБ сложить количество характерно окрашенных колоний

Слайд 15

Слайд 16

Состав ср. Chromocult Coliform Agar (г/дм3)
Пептоны - 3,0
Хлорид натрия -

5,0
Дигидрофосфат натрия однозамещенный - 2,2
Гидрофосфат натрия двузамещенный - 2,7
Пируват натрия -1,0
Триптофан -1,0
Агар-агар -10,0
Сорбитол -1,0
Тергитол-7 - 0,15
1-изопропил-β-D-1-тио-галактопиранозид (IPTG) - 0,1
хромогенные субстраты:
- 6-хлор-3-индолил-β-D-галактопиранозид (Salmon-GAL) - 0,15
- 5-бром-4-хлор-3-индолил-β-D-глюкуронид (X-GLUC) - 0,1

Слайд 17

Состав ср. Chromocult Coliform Agar ES (г/дм3)
Пептоны - 5,0
хлорид калия

- 7,5
MOPS -10,0
Соли желчных кислот -1,15
Пропионовая кислота - 0,5
Агар-агар -10,0
1-изопропил-β-D-1-тио-галактопиранозид (IPTG) - 0,1
хромогенные субстраты:
- 6-хлор-3-индолил-β-D-галактопиранозид (Salmon-GAL) - 0,15
- 5-бром-4-хлор-3-индолил-β-D-глюкуронид (X-GLUC) - 0,1

Слайд 18

Слайд 19

Слайд 20

Слайд 21

Слайд 22

Слайд 23

Дифференцировка Гр (-) бактерий на хромогенных средах Chromocult Coliform Agar и

Chromocult Coliform Agar ES

Слайд 24

Слайд 25

Слайд 26

Качественное определение ОКБ и E.coli
проводят методом прямого посева (метод основан на

внесении стерильной гранулированной индикаторной среды в нормируемый объем воды, инкубации посевов, учете изменения цвета и флюоресценции среды с образцами

Слайд 27

Readycult Conforms 100
В среде β-галактозидаза КБ расщепляет хромогенный субстрат (X-GAL) с

образованием окрашенного продукта, который изменяет цвет среды со светло-желтого на сине-зеленый. Фермент β-глюкуронидаза E.coli расщепляет флюорогенный субстрат (MUG) с образованием флюоресцирующего (при воздействии УФ) продукта

Слайд 28

Техника качественного определения ОКБ и E.coli методом прямого посева
К 100

мл пробы воды (при необходимости исследуют 3 объема по 100 мл) добавить среду Readycult Conforms 100. Закрыть флакон и перемешать до полного растворения гранулированной среды. Проба окрашивается в светло-желтый цвет
Посев инкубировать при температуре (37±1 )°С в течение 21±3 часов или при комнатной температуре (20-25)°С до 48 часов
После инкубации отметить наличие изменения цвета среды с пробами
Отсутствие изменения цвета среды указывает на отсутствие в исследуемых пробах воды КБ и E.coli
Изменение цвета среды со светло-желтого на сине-зеленый подтверждает наличие КБ
Для проб, в которых среда изменила свой цвет проверить наличие флюоресценции при облучении УФ лампой. Флюоресценция среды указывает на возможное наличие E.coli
Для подтверждения E.coli к флюоресцирующей среде добавить 2,5 см3 реактива Ковача (индольный тест). Образование красного слоя на поверхности культуральной жидкости указывает на образование индола и подтверждает наличие E.coli

Слайд 29

Слайд 30

Слайд 31

Состав ср. Readycult Conforms 100 (гр./пакет/100 мл пробы)
Пептоны - 0,5
Хлорид

натрия - 0,5
Сорбитол - 0,1
Триптофан - 0,1
Гидрофосфат калия двузамещенный - 0,27
Дигидрофосфат калия - 0,2
Лаурилсульфат натрия - 0,1
1-изопропил-β-D-1-тио-галактопиранозид (IPTG) - 0,01
хромогенный субстрат:
- 5-бром-4-хлор-3-индолил-β-D-галактопиранозид (X-GAL) - 0,008 флюорогенный субстрат:
- 4-метилумбеллиферил-β-D-глюкуронид (MUG) - 0,005

Слайд 32

Слайд 33

Дифференцировка Гр (-) бактерий на хромогенной среде Readycult Conforms 100

Слайд 34

Слайд 35

Учет и оценка результатов
по определению ОКБ и E.coli в нормируемом

объеме воды методом мембранно фильтрации или методом прямого посева проводят по МУК 4.2.1018-01, МУ 2.1.5.800-99, ГОСТ 30712, МУ 2.1.4.1184-03 в зависимости от типа воды

Слайд 36

Слайд 37

Слайд 38

УТВЕРЖДАЮ
Заместитель Главного государственного санитарного врача Российской Федерации -Главный врач Федерального центра

Госсанэпиднадзора Минздрава России
Е.Н.Беляев
10 февраля 2004 г.
№24ФЦ/513
Дата введения: 01 марта 2004 г.
Определение колиформных бактерий и Е.соli с
использованием хромогенных и флюорогенных
индикаторных сред производства Merck (Германия)
МЕТОДИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ
Раздел 1. Определение колиформных бактерий и Е.соli в пищевых продуктах, продовольственном сырье, смывах с объектов внешней среды

Слайд 39

Общие положения и область применения
МР устанавливают методы проведения исследований по ускоренному определению

и выявлению КБ и Е.соli с использованием хромогенных и флюорогенных индикаторных сред в образцах пищевых продуктов (кроме кисломолочных продуктов, заквасок, бактериальных концентратов и бактериальных препаратов молочнокислых бактерий), продовольственного сырья, смывов с объектов внешней среды

Слайд 40

Сущность методов
Метод выявления КБ и E.coli основан на высеве определенного количества

исследуемого образца или его разведений в жидкие селективные хромогенные среды, инкубации посевов и учете изменения цвета и флюоресценции среды с образцами, подтверждении образования индола для E.coli
Метод определения количества КБ и E.coli основан на высеве определенного количества образца или его разведений на агаризованные хромогенные селективные среды, инкубации посевов, выявлении и подсчете характерно окрашенных колоний

Слайд 41

Принцип работы ср. Fluorocult LMX Broth
на среде β-галактозидаза КБ расщепляет

хромогенный субстрат (X-GAL) с образованием окрашенного продукта, который изменяет цвет среды со светло-желтого на сине-зеленый. Фермент β-глюкуронидаза E.coli расщепляет флюорогенный субстрат (MUG) с образованием флюоресцирующего (при воздействии УФ) продукта

Слайд 42

Техника выявления КБ и E.coli в определенной навеске образца
Навеску образца (или

ряд десятикратных разведений) в массе/объеме которой предусматривается отсутствие КБ и E.coli в соответствии с СанПиН 2.3.2.1078-01, внести в среду Fluorocult LMX Brot
Соотношение между количеством/массой высеваемого образца или его эквивалентным разведением и питательной средой -1:9 по объему. Жидкие образцы можно не разводить. Твердые образцы измельчить в гомогенизаторе
Тампоны со смывами, взятые с объектов окружающей среды погрузить в пробирку с 5 см3 среды Fluorocult LMX Broth
Проверить наличие фоновой флюоресценции образца (особенно для проб, содержащих морепродукты) при облучении УФ-лампой
Посевы инкубировать при температуре (37±1 )°С в течение 21±3 часов
После инкубации отметить наличие изменения цвета среды с образцами (смывами)
Отсутствие изменения цвета среды учитывать как отсутствие в исследуемых образцах (смывах) КБ и E.coli
Изменение цвета среды со светло-желтого на сине-зеленый подтверждает наличие КБ
Для образцов, в которых среда изменила свой цвет, проверить наличие флюоресценциии при облучении УФ лампой. Флюоресценция среды указывает на возможное наличие E.coli
Для подтверждения E.coli к флюоресцирующей среде добавить 1 см3 реактива Ковача (индольный тест). Образование красного слоя на поверхности культуральной жидкости указывает на образование индола и подтверждает наличие E.coli

Слайд 43

Слайд 44

Дифференцировка Гр (-) бактерий на хромогенной среде Fluorocult LMX Broth

Слайд 45

Состав среды Fluorocult LMX Broth (в г/дм3)
Пептоны - 5,0
Хлорид натрия -

5,0
Сорбитол -1,0
Триптофан - 1,0
Гидрофосфат калия двузамещенный - 2,7
Дигидрофосфат калия - 2,0
Лаурилсульфат натрия -1,0
1-изопропил-β-D-1-тио-галактопиранозид (IPTG) - 0,1
хромогенный субстрат:
- 5-бром-4-хлор-3-индолил- β-D-галактопиранозид (X-GAL) - 0,008
10. флюорогенный субстрат:
- 4-метилумбеллиферил- β-D-глюкуронид (MUG) - 0,005

Слайд 46

При исследовании продовольственного сырья и пищевых продуктов (в том числе кисломолочных,

заквасок, бактериальных концентратов и бактериальных препаратов молочнокислых бактерий) в соответствии с ГОСТ 30518, ГОСТ 30726 для подтверждения принадлежности микроорганизмов к КБ и E.coli, пересеять образцы с жидких селективных сред на поверхность хромогенных сред Chromocult Coliform Agar или Chromocult Coliform Agar ES с последующей их идентификацией

Слайд 47

Слайд 48

Техника определения количества КБ и E.coli
При определении количества КБ и E.coli

в 1г/см3 образца в соответствии с ГОСТ 30518, ГОСТ 30726 проводить посев навески образца (или его разведения) в объеме 0,1 или 0,2 см3 поверхностным методом, а в объеме 1 см3 - глубинным методом на агаризованные среды Chromocult Coliform Agar или Chromocult Coliform Agar ES
Подготовку чашек Петри со средой к посеву и посевы поверхностным и глубинным методами провести по ГОСТ 26670. Жидкие образцы можно не разводить. Твердые образцы измельчить в гомогенизаторе
Посевы инкубировать при температуре (37±1 )°С в течение 21± 3 часов
После инкубации подсчитать характерно окрашенные колонии, выросшие на чашках Петри. КБ (за исключением E.coli) образуют колонии розового (до красного) цвета. E.coli образуют колонии темно-синего (до фиолетового) цвета
Для подтверждения E.coli на среде Chromocult Coliform Agar нанести каплю реактива Ковача непосредственно на характерно окрашенные колонии (индольный тест). Изменение цвета реагента до розово-красного в течение нескольких секунд подтверждает наличие E.coli
Для подсчета количества КБ бактерий сложить количество характерно окрашенных колоний

Слайд 49

Дифференцировка Гр (-) бактерий на хромогенных средах Chromocult Coliform Agar и

Chromocult Coliform Agar ES

Слайд 50

Учет и оценка результатов
Учет и оценку результатов по выявлению и количественному

определению КБ и E.coli в определенной навеске образца провести по ГОСТ 26670
Учет и оценку результатов смывов провести в соответствии с НД по контролю за микробиологической обсемененностью окружающей среды на предприятиях торговли, общественного питания и лечебно-профилактических учреждений

Слайд 51

Слайд 52

Слайд 53

Слайд 54

Слайд 55

Слайд 56

Слайд 57

Слайд 58

Слайд 59

Слайд 60

Слайд 61

Слайд 62

ФЕДЕРАЛЬНЫЙ ЦЕНТР ГИГИЕНЫ И ЭПИДЕМИОЛОГИИ РОСПОТРЕБНАДЗОРА
ФЕДЕРАЛЬНАЯ СЛУЖБА ПО НАДЗОРУ В СФЕРЕ

ЗАЩИТЫ ПРАВ ПОТРЕБИТЕЛЕЙ И БЛАГОПОЛУЧИЯ ЧЕЛОВЕКА
Ускоренный метод выявления бактерий рода Salmonella с использованием среды MSRV производства Merck KGaA (Германия)
МЕТОДИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ
Москва 2006

Слайд 63

МР устанавливают методы проведения лабораторных исследований по ускоренному выявлению бактерий

рода Salmonella в пищевых продуктах, продовольственном сырье и объектах окружающей среды с использованием модифицированной среды Раппопорта-Василиадиса (MSRV)

Слайд 64

Принцип действия среды MSRV
Селективная полужидкая среда MSRV с новобиоцином предназначена

для ускоренного выявления бактерий рода Salmonella в пищевых продуктах, продовольственном сырье и объектах окружающей среды; является модификацией среды Раппопорта-Василиадиса
В полужидкой среде MSRV происходит диффузный рост подвижных штаммов бактерий рода Salmonella в агаре, с образованием непрозрачных зон роста. Рост и подвижность других микроорганизмов подавляются селективными агентами (новобиоцин, хлористый магний, малахитовый зеленый) и повышенной температурой инкубации (41оС)

Слайд 65

Принцип метода
Метод выявления бактерий рода Salmonella основан на высеве

определенного количества исследуемого образца или его разведений в жидкую неселективную среду, инкубировании посевов и последующем выявлении подвижных штаммов бактерий рода Salmonella, образующих светлый ореол при диффузном росте в селективной полужидкой среде MSRV с новобиоцином, имеющих типичные биохимические и серологические характеристики

Слайд 66

Техника определения
1. Навеску анализируемого образца в массе/объеме которой предусматривается отсутствие бактерий

рода Salmonella в соответствии с СанПиН 2.3.2. 1078-01, внести в забуференную ПВ. Соотношение массы (объема) образца и питательной средой 1:9 по объему. Тампоны со смывами, взятые с объектов окружающей среды погрузить в пробирки с 5 см3 забуференной ПВ
2. Посевы инкубировать при температуре (37±1)ºС в течение 18±2 ч.
3. После инкубирования обогащенную культуру в количестве 0,1 см3 наносят в центр чашки Петри со средой MSRV
4. Посевы в чашках (не переворачивая, крышка сверху) инкубируют в аэробных условиях при температуре (41±1)ºС в течение 15±3 ч.
5. Диффузный рост подвижных культур в агаре с образованием светлого ореола (зоны подвижности) указывает на наличие бактерий рода Salmonella. Рост микроорганизмов в месте посева без диффузного роста в агаре указывает на наличие неподвижных штаммов бактерий рода Salmonella или других энтеробактерий
6. Бохимическое и серологическое подтверждение принадлежности выделенных культур к бактериям рода Salmonella проводят по ГОСТ 30519 (культуру для биохимического и серологического подтверждения берут с края зоны подвижности)

Слайд 67

Забуференная пептонная вода – Peptone Water (Buffered)
Состав (г/л):
Пептон - 10,0

г
Хлористый натрий - 5,0 г
Натрий фосфорнокислый двузамещенный - 9,0 г
Калий фосфорнокислый однозамещенный - 1,5 г

Слайд 68

Модифицированная среда Раппопорта-Василиадиса (MSRV)
Состав (г/л):
Триптоза - 4,59 г
Гидролизат казеина

- 4,59 г
Хлористый натрий - 7,34 г
Калий фосфорнокислый однозамещенный - 1,47 г
Хлористый магний безводный - 10,93 г
Малахитовый зеленый - 0,037 г
Новобиоцин - 20,0 мг
Агар-агар - 2,7 г

Слайд 69

Слайд 70

Слайд 71

Слайд 72

Слайд 73

Слайд 74

Слайд 75

Слайд 76

Слайд 77

Слайд 78

Слайд 79

Слайд 80

Слайд 81

Слайд 82

Слайд 83

Слайд 84

Слайд 85

Слайд 86

Слайд 87

Ускоренные методы санитарно-микробиологических исследований

Содержание

Общие колиформные бактерии- микроорганизмы семейства Enterobacteriaceae, характеризующиеся наличием фермента β-галактозидазы, способного

E.coli- колиформные бактерии, характеризующиеся наличием фермента β-глюкуронидазы, способного расщеплять специфические хромогенные

Метод одновременного определения КБ и E.coli с использованием хромогенных и флюорогенных

1. Входящие в состав индикаторных сред качественные пептоны и фосфатный буфер

Принцип действия хромогенных и флюорогенных питательных средОснован на выявлении специфических ферментов

УТВЕРЖДАЮЗаместитель Главного государственного санитарного врача Российской Федерации - Главный врач Федерального

Раздел 2. Определение ОКБ и E.coli в воде. Общие положения и область

Определение количества ОКБ и E.coli ММФметод основан на фильтрации нормируемого объема

Техника определения КБ и Е.соli ММФ Объем воды, установленный в соответствии

Состав ср. Chromocult Coliform Agar (г/дм3) Пептоны - 3,0Хлорид натрия -

Состав ср. Chromocult Coliform Agar ES (г/дм3) Пептоны - 5,0хлорид калия

Дифференцировка Гр (-) бактерий на хромогенных средах Chromocult Coliform Agar и

Качественное определение ОКБ и E.coliпроводят методом прямого посева (метод основан на

Readycult Conforms 100В среде β-галактозидаза КБ расщепляет хромогенный субстрат (X-GAL) с

Техника качественного определения ОКБ и E.coli методом прямого посева К 100

Состав ср. Readycult Conforms 100 (гр./пакет/100 мл пробы) Пептоны - 0,5Хлорид

Дифференцировка Гр (-) бактерий на хромогенной среде Readycult Conforms 100

Учет и оценка результатов по определению ОКБ и E.coli в нормируемом

УТВЕРЖДАЮЗаместитель Главного государственного санитарного врача Российской Федерации -Главный врач Федерального центра

Общие положения и область применения МР устанавливают методы проведения исследований по ускоренному определению

Сущность методовМетод выявления КБ и E.coli основан на высеве определенного количества

Принцип работы ср. Fluorocult LMX Broth на среде β-галактозидаза КБ расщепляет

Техника выявления КБ и E.coli в определенной навеске образцаНавеску образца (или

Дифференцировка Гр (-) бактерий на хромогенной среде Fluorocult LMX Broth

Состав среды Fluorocult LMX Broth (в г/дм3)Пептоны - 5,0Хлорид натрия -

При исследовании продовольственного сырья и пищевых продуктов (в том числе кисломолочных,

Техника определения количества КБ и E.coliПри определении количества КБ и E.coli

Дифференцировка Гр (-) бактерий на хромогенных средах Chromocult Coliform Agar и

Учет и оценка результатовУчет и оценку результатов по выявлению и количественному

ФЕДЕРАЛЬНЫЙ ЦЕНТР ГИГИЕНЫ И ЭПИДЕМИОЛОГИИ РОСПОТРЕБНАДЗОРАФЕДЕРАЛЬНАЯ СЛУЖБА ПО НАДЗОРУ В СФЕРЕ

МР устанавливают методы проведения лабораторных исследований по ускоренному выявлению бактерий

Принцип действия среды MSRV Селективная полужидкая среда MSRV с новобиоцином предназначена

Принцип метода Метод выявления бактерий рода Salmonella основан на высеве

Техника определения1. Навеску анализируемого образца в массе/объеме которой предусматривается отсутствие бактерий

Забуференная пептонная вода – Peptone Water (Buffered) Состав (г/л):Пептон - 10,0

Модифицированная среда Раппопорта-Василиадиса (MSRV) Состав (г/л):Триптоза - 4,59 г Гидролизат казеина

Общие колиформные бактерии
- микроорганизмы семейства Enterobacteriaceae, характеризующиеся наличием фермента β-галактозидазы, способного

E.coli
- колиформные бактерии, характеризующиеся наличием фермента β-глюкуронидазы, способного расщеплять специфические хромогенные

Принцип действия хромогенных и флюорогенных питательных сред
Основан на выявлении специфических ферментов

УТВЕРЖДАЮ
Заместитель Главного государственного санитарного врача Российской Федерации - Главный врач Федерального

Определение количества ОКБ и E.coli ММФ
метод основан на фильтрации нормируемого объема

Техника определения КБ и Е.соli ММФ
Объем воды, установленный в соответствии

Состав ср. Chromocult Coliform Agar (г/дм3)
Пептоны - 3,0
Хлорид натрия -

Состав ср. Chromocult Coliform Agar ES (г/дм3)
Пептоны - 5,0
хлорид калия

Качественное определение ОКБ и E.coli
проводят методом прямого посева (метод основан на

Readycult Conforms 100
В среде β-галактозидаза КБ расщепляет хромогенный субстрат (X-GAL) с

Техника качественного определения ОКБ и E.coli методом прямого посева
К 100

Состав ср. Readycult Conforms 100 (гр./пакет/100 мл пробы)
Пептоны - 0,5
Хлорид

Учет и оценка результатов
по определению ОКБ и E.coli в нормируемом

УТВЕРЖДАЮ
Заместитель Главного государственного санитарного врача Российской Федерации -Главный врач Федерального центра

Общие положения и область применения
МР устанавливают методы проведения исследований по ускоренному определению

Сущность методов
Метод выявления КБ и E.coli основан на высеве определенного количества

Принцип работы ср. Fluorocult LMX Broth
на среде β-галактозидаза КБ расщепляет

Техника выявления КБ и E.coli в определенной навеске образца
Навеску образца (или

Состав среды Fluorocult LMX Broth (в г/дм3)
Пептоны - 5,0
Хлорид натрия -

Техника определения количества КБ и E.coli
При определении количества КБ и E.coli

Учет и оценка результатов
Учет и оценку результатов по выявлению и количественному

ФЕДЕРАЛЬНЫЙ ЦЕНТР ГИГИЕНЫ И ЭПИДЕМИОЛОГИИ РОСПОТРЕБНАДЗОРА
ФЕДЕРАЛЬНАЯ СЛУЖБА ПО НАДЗОРУ В СФЕРЕ

Принцип действия среды MSRV
Селективная полужидкая среда MSRV с новобиоцином предназначена

Принцип метода
Метод выявления бактерий рода Salmonella основан на высеве

Техника определения
1. Навеску анализируемого образца в массе/объеме которой предусматривается отсутствие бактерий

Забуференная пептонная вода – Peptone Water (Buffered)
Состав (г/л):
Пептон - 10,0

Модифицированная среда Раппопорта-Василиадиса (MSRV)
Состав (г/л):
Триптоза - 4,59 г
Гидролизат казеина