Туберкулёз Дифтерия

Содержание

Слайд 2

Классификация возбудителя туберкулеза Семейство Mycobacteriaceae Род Mycobacterium Вид M. tuberculosis (tuberculum

Классификация возбудителя туберкулеза

Семейство Mycobacteriaceae
Род Mycobacterium
Вид M. tuberculosis (tuberculum – бугорок)
М.

bovis
M. leprae
M. cansassii
M. xenopi
M. ulcerans
*- патогенные виды
Слайд 3

Характеристика возбудителя туберкулеза 21 гр. по Берджи (гр+ палочки, аэроб) Неподвижны,

Характеристика возбудителя туберкулеза

21 гр. по Берджи (гр+ палочки, аэроб)
Неподвижны, спор, капсулы

нет
В клеточной стенке большое количество липидов (миколовая кислота и липоиды – до 40% от сухого веса), что определяет следующие свойства:
Кислотоустойчивость (5-10% кислоты)
Уст-ть к щелочам и спирту
Уст-ть к высушиванию, УФ, дез. Средствам
Вызывают сенсибилизацию организма
Слайд 4

Главный фактор патогенности – токсический гликолипид – Корд-фактор Располагается на поверхности

Главный фактор патогенности – токсический гликолипид – Корд-фактор

Располагается на поверхности и

в толще клеточной стенки
По химической природе – полимер: 1 мол-ла дисахарида тригалозы+ миколовая жирная к-та+миколиновая жирная кислота
Его функции:
Токсическое действие на ткани
Защита от фагоцитоза
Подавляет миграцию лейкоцитов
Слайд 5

Микробиологическая диагностика Бактериоскопический Экспресс-диагностика (ПЦР, РИФ) Бактериологический – основной Биологический Метод кожно-аллергических проб

Микробиологическая диагностика

Бактериоскопический
Экспресс-диагностика (ПЦР, РИФ)
Бактериологический – основной
Биологический
Метод кожно-аллергических проб

Слайд 6

Бактериоскопический метод Нередко материал содержит мало бактерий туберкулеза и для повышения

Бактериоскопический метод

Нередко материал содержит мало бактерий туберкулеза и для повышения вероятности

их обнаружения используют методы обогащения: центрифугирование и флотацию. В первом случае исследуемый материал обрабатывают смесью растворов NaCl и NaOH (гомогенизация), центрифугируют и микроскопируют осадок. Второй метод включает обработку материала смесью NaOH, дистиллированной воды и ксилола (или бензола). Образец энергично встряхивают; образующаяся пена всплывает и захватывает микобактерии. Пену отсасывают и готовят мазки.
Окраска по Циль-Нильсену - туберкулезные микобактерии визуализируются как ярко-красные, тонкие, изящные, в одиночку или группами, большей частью лежащие вне клеток палочки.
Окраска аурамином – в люмин. микроскопе – M.tub. Золтисто-оранжевого цв, атипичные формы – зеленый.
Слайд 7

Микобактерии туберкулеза в препарате после окраски по Циль-Нильсену.

Микобактерии туберкулеза в препарате после окраски по Циль-Нильсену.

Слайд 8

Возбудители туберкулеза в мазке мокроты. На фоне слизи, окрашено в синий

Возбудители туберкулеза в мазке мокроты. На фоне слизи, окрашено в синий

цвет, тонкие рубиновые палочки туберкулезных бактерий. Окраска по Цилю-Нильсону.
Слайд 9

Флуоресценция туберкулезных бактерий после окраски аурамином.

Флуоресценция туберкулезных бактерий после окраски аурамином.

Слайд 10

Бактериологический метод Для повышения эффективности выделения возбудителя туберкулеза и уничтожения контаминирующей

Бактериологический метод

Для повышения эффективности выделения возбудителя туберкулеза и уничтожения контаминирующей микрофлоры

применяют методы обогащения или обрабатывают материал 6-12% серной кислотой. Основной недостаток бактериологического метода — длительность получения результата вследствие медленного роста микобактерий (от 2 до 12 нед). В связи с этим разработаны ускоренные микрометоды выделения возбудителя туберкулеза.
Слайд 11

Один из распространённых методов выделения возбудителя туберкулеза, метод Прайса, заключается в

Один из распространённых методов выделения возбудителя туберкулеза, метод Прайса, заключается в

следующем. Материал помещают на предметное стекло, обрабатывают серной кислотой, отмывают физиологическим раствором и вносят в питательную среду, дополненную цитратной лизированной кровью.
Стекло вынимают через 3-4 сут и окрашивают но Цилю-Нильсену. При микроскопии обнаруживают микроколонии микобактерии возбудителя туберкулеза. Вирулентные бактерии образуют змеевидные, а невирулентные — аморфные микроколонии.
Слайд 12

Слайд 13

Основные питательные среды Среда Левенштейна – Йенсена (аспарагин – источник азота,

Основные питательные среды

Среда Левенштейна – Йенсена (аспарагин – источник азота, яйца,

картофельная мука, глицерин, малахитовая зелень) – на фоне зеленоватого цвета среды бородавчатые желтого цвета колонии в R-форме, шероховатые, с неровными краями.
Слайд 14

Среда Финна – глютамат натрия (источник азота) +малахитовая зелень Среда Новая

Среда Финна – глютамат натрия (источник азота) +малахитовая зелень
Среда Новая –

гликокол (источник азота) + малахитовая зелень. Колонии мелкие, морщинистые (манная крупа), шероховатые (R-форма). Петлей снимается вся колония.
Среда Сотона – жидкая. Солевой р-р (цитрат железа + фосфат калия) + аспарагин + глицерин. Рост: поверхностная пленка со специфическим запахом.
Слайд 15

Идентификация Проба на каталазную активность – чистую культуру возбудителя прогревают 30

Идентификация

Проба на каталазную активность – чистую культуру возбудителя прогревают 30 мин.

при Т=68оС и проводят тест (у патогенного возбудителя фермент каталаза термолаби-лен, а у атипичных видов - термостабилен)
Ниациновый тест (проба Конно) – M.tub. Синтезирует никотин в среду Сотона. При добавлении цианистого калия к среде образуется ниацин, который при соединении с 5% хлорамином дает ярко-желтое окрашивание.
Слайд 16

Биологическая проба Биологическая проба является по праву наиболее рациональным диагностическим приемом.

Биологическая проба

Биологическая проба является по праву наиболее рациональным диагностическим приемом. Материал

может быть введен под кожу или в полость живота морским свинкам. При наличии в материале вирулентных туберкулезных микобактерий обычно на 10-12-й день в месте его введения под кожей образуется уплотнение, переходящее в дальнейшем в незаживающую язву. Свинки погибают от генерализованного туберкулеза через два – четыре месяца. Ускоренная биологическая проба: через регионарный лимфатический узел морской свинки вводят несколько капель наследуемого материала. На 8—10-й день увеличенный лимфатический узел вырезают и исследуют бактериоскопически в препаратах-отпечатках на присутствие туберкулезных микобактерий.
Слайд 17

Для выявления аллергии применяют внутрикожную пробу Манту. Для постановки туберкулиновых проб

Для выявления аллергии применяют внутрикожную пробу Манту. Для постановки туберкулиновых проб

выпускают готовые к употреблению ампулированные растворы PPD (сухой очищенный туберкулин-глицериновый экстракт бульонной культуры микобактерии) с   активностью   2   туберкулиновых единиц (2 ТЕ) в 0,1 мл. Внутрикожное введение туберкулинаДля выявления аллергии применяют внутрикожную пробу Манту. Для постановки туберкулиновых проб выпускают готовые к употреблению ампулированные растворы PPD (сухой очищенный туберкулин-глицериновый экстракт бульонной культуры микобактерии) с   активностью   2   туберкулиновых единиц (2 ТЕ) в 0,1 мл. Внутрикожное введение туберкулина производят на наружной поверхности верхней трети правого плечаДля выявления аллергии применяют внутрикожную пробу Манту. Для постановки туберкулиновых проб выпускают готовые к употреблению ампулированные растворы PPD (сухой очищенный туберкулин-глицериновый экстракт бульонной культуры микобактерии) с   активностью   2   туберкулиновых единиц (2 ТЕ) в 0,1 мл. Внутрикожное введение туберкулина производят на наружной поверхности верхней трети правого плеча (после предварительной обработки кожи 70% спиртом) специальным туберкулиновым или однограммовым шприцем строго внутрикожно. Вводят 0,1 мл PPD; при правильной технике проведения пробы в коже образуется белая папула размером 5—8 мм в диаметре. Проверка реакции при пробе Манту производится через 48—72 часа и считается положительной при наличии инфильтрата не менее 5 мм в диаметре. Гиперемия, окружающая инфильтрат, не учитывается.

Положительные и резко положительные реакции (более 16 мм) подтверждают наличие сенсибилизации организма, а отрицательная туберкулиновая реакция (менее 5 мм) может указывать на отсутствие заболевания или на излечение. В случае тяжелого заболевания отрицательная туберкулиновая реакция может свидетельствовать об истощении защитных сил организма.

Слайд 18

Классификация и характеристика возбудителя дифтерии Род Corynebacterium (coryne – булава, bacterium

Классификация и характеристика возбудителя дифтерии

Род Corynebacterium (coryne – булава, bacterium –

палочка)
Вид C.diphtheriae (пленка, перепонка)
Тонкие гр+ палочки, утолщенные на концах за счет зерен волютина
Неподвижна, спор не образует,
есть микрокапсула
Характерен полиморфизм
Имеются коринеформные бактерии,
не обладающие патогенностью-
дифтероиды
Слайд 19

Факторы патогенности Адгезины – поверхностные структуры липидной и белковой природы (корд-фактор,

Факторы патогенности

Адгезины – поверхностные структуры липидной и белковой природы (корд-фактор, микрокапсула)
Ферменты

– каталаза, нейраминидаза (усиливает действие токсических белков) , гиалуронидаза (отек), гемолизин, фибринолизин – разрушает фибринозную плёнку Þ распространение очага. дермонекротоксин
Дифтерийный гистотоксин – основной фактор патогенности – блокирует синтез белка в клетках, наиболее снабженных кровью (миокард, периф. и ЦНС, почки и др.)
Агрессины – подавление фагоцитоза
Слайд 20

Слайд 21

Окраска по Нейссеру. Для дифтерийной палочки хар-но наличие полярно расположенных зерен

Окраска по Нейссеру. Для дифтерийной палочки хар-но наличие полярно расположенных зерен

волютина и положение в виде буквы «V». Дифтероиды и псевдодифтерийная палочка не имеют зерен волютина или содержат их не на концах, а по длине палочки. Кроме того, сами бактерии располагаются в виде «частокола»
Слайд 22

Биовары У этого возбудителя выделяют биотипы - gravis, mitis, intermedius, отличающиеся

Биовары

У этого возбудителя выделяют биотипы - gravis, mitis, intermedius, отличающиеся по

морфологии, антигенным и биохимическим свойствам, тяжести заболеваний у человека. Тип gravis чаще вызывает вспышки и более тяжелое течение, для него характерны крупные с неровными краями и радиальной исчерченностью колонии в виде маргаритки (R- формы). Тип mitis вызывает преимущественно легкие спорадические заболевания, образует на плотных средах мелкие гладкие колонии с ровными краями (S- формы). Тип intermedius занимает промежуточное положение, образует на плотных средах переходные по характеристикам RS- формы, однако еще более мелкие. На жидких средах вызывают помутнение сред, образуют крошковидный осадок.
Слайд 23

Теллуритовая среда Клауберга (питательный агар с теллуритом натрия, глицерином и дефибринированной

Теллуритовая среда Клауберга (питательный агар с теллуритом натрия, глицерином и дефибринированной

кровью). На ней задерживается рост кокков и другой микрофлоры зева, что способствует размножению бактерий дифтерии.
Слайд 24

Идентификация Способность бактерий дифтерии продуцировать токсин устанавливают в реакции преципитации в

Идентификация

Способность бактерий дифтерии продуцировать токсин устанавливают в реакции преципитации в агаре.

Для этого в чашку Петри с питательным агаром, содержащим 15—20%.лошадиной сыворотки, 0,3% мальтозы и 0,03% цистина, кладут полоску фильтровальной бумаги (1,5 X 6 см), пропитанную антитоксической противодифтерийной сывороткой, содержащей 5000 АЕ/мл. Чашку подсушивают при 37°С в течение 30 мин и засевают исследуемые культуры в виде перпендикулярных к бумаге штрихов на расстоянии 0,6—0,8 см от края бумаги. В качестве контроля используют заведомо токсигенную культуру. Посевы инкубируют при 37°С до следующего дня. При размножении токсигенной культуры в месте соединения токсина с антитоксином в плотной питательной среде образуется преципитат в виде белых линий — «усов»
Слайд 25

Проба ПИЗУ Для определения цистиназы в столбик питательного агара с циститом

Проба ПИЗУ

Для определения цистиназы в столбик питательного агара с циститом уколом

засевают исследуемую культуру. Посевы инкубируют при 37° С до следующего дня. Истинные дифтерийные палочки вызывают почернение среды по ходу посева (в результате образования сульфида свинца), вокруг которого появляется зона коричневого цвета, а на глубине 1 см от поверхности в среде образуется коричневое «облачко».