Непрерывное культивирование микроорганизмов. Лекция 8

Содержание

Слайд 2

Одним из недостатков хемостата является его склонность к вымыванию культуры. Для

Одним из недостатков хемостата является его склонность к вымыванию культуры.
Для борьбы

с этим явлением используется комплекс «ферментер-сепаратор».
Слайд 3

Схема: ферментер-сепаратор

Схема: ферментер-сепаратор

Слайд 4

Материальный баланс биомассы в сепараторе Связь между FC (сгущенная биомасса) и F (концентрация биомассы)

Материальный баланс биомассы в сепараторе

Связь между FC (сгущенная биомасса) и
F

(концентрация биомассы)
Слайд 5

Концентрация биомассы: Производительность данного комплекса: удельная скорость роста биомассы в ферментере

Концентрация биомассы:

Производительность данного комплекса:

удельная скорость роста биомассы в ферментере

Слайд 6

Связь концентрации субстрата со скоростью разбавления а – коэффициент рециркуляции, в – коэффициент сгущения биомассы

Связь концентрации субстрата со скоростью разбавления

а – коэффициент рециркуляции,
в –

коэффициент сгущения биомассы
Слайд 7

При работе комплекса «ферментер-сепаратор» концентрация субстрата на выходе из ферментера S

При работе комплекса «ферментер-сепаратор» концентрация субстрата на выходе из ферментера S

уменьшается по сравнению с обычным хемостатом, а производительность системы по биомассе Qкомпл. увеличивается.
Слайд 8

основные направления использования комплекса «ферментер-сепаратор»: повышение производительности системы непрерывного культивирования, если

основные направления использования комплекса «ферментер-сепаратор»:

повышение производительности системы непрерывного культивирования, если этого

невозможно достичь просто за счет повышения исходной концентрации субстрата So, например при очистке сточных вод или утилизации малоконцентрированных растворов субстрата;
более полное потребление из среды субстрата.
Слайд 9

Двухстадийный хемостат Двухстадийный хемостат – это два последовательно соединенных аппарата непрерывного

Двухстадийный хемостат

Двухстадийный хемостат – это два последовательно соединенных аппарата непрерывного культивирования,

при котором среда, выходящая из первого аппарата, поступает во второй.
Слайд 10

Слайд 11

Балансовые уравнения для второго аппарата

Балансовые уравнения для второго аппарата

Слайд 12

Особенности двухстадийного хемостата: 1. Удельная скорость роста биомассы во втором аппарате

Особенности двухстадийного хемостата:

1. Удельная скорость роста биомассы во втором аппарате не равна

скорости разбавления, как в одностадийном хемостате, а меньше ее. Следовательно, концентрация биомассы во втором аппарате никогда не может стать равной нулю при любом разбавлении.
Задавая высокую скорость разбавления во втором аппарате, можно не беспокоиться, что произойдет вымывание культуры. Значение удельной скорости роста во втором хемостате будет возрастать, и будет возрастать экономический коэффициент
Слайд 13

2. Концентрация субстрата во втором аппарате всегда меньше, чем в первом.

2. Концентрация субстрата во втором аппарате всегда меньше, чем в первом. Для

дополнительного прироста биомассы требуется субстрат, который расходуется из запаса, имеющегося во входящем потоке.
Пример: выращивание кормовых дрожжей на парафинах нефти. Остаточный субстрат вместе с биомассой идет в кормовой продукт, но то, что хорошо для микроорганизмов, — не всегда хорошо для животных. В системе очистки стоков - остаточная концентрация субстрата, ее снижение - цель всего процесса.

Особенности двухстадийного хемостата:

Слайд 14

3. Концентрация биомассы во втором аппарате всегда больше, чем в первом.

3. Концентрация биомассы во втором аппарате всегда больше, чем в первом.

Существующая в первом аппарате биомасса проходит через второй аппарат транзитом, а к ней добавляется приросшая в нем биомасса.
4. Общая продуктивность двухстадийного хемостата не превышает суммарной продуктивности эквивалентной по объему системы из двух параллельно работающих одностадийных хемостатов. Но при этом больше концентрация биомассы в выходном потоке, что облегчает выделение и концентрирование биомассы, И другая особенность, снижается остаточная концентрация субстрата.

Особенности двухстадийного хемостата:

Слайд 15

5. Важная особенность двухстадийного и многостадийного хемостатов: последующие аппараты должны быть

5. Важная особенность двухстадийного и многостадийного хемостатов: последующие аппараты должны быть

более интенсивными по массопередаче кислорода, так как они «обслуживают» большую концентрацию биомассы.

Особенности двухстадийного хемостата:

Слайд 16

6. Двухстадийный хемостат часто оказывается удобным для тех процессов, в которых

6. Двухстадийный хемостат часто оказывается удобным для тех процессов, в которых

целевым продуктом является не биомасса, а продукт метаболизма.
Обычно для оптимального протекания процессов биосинтеза продуктов метаболизма требуются условия, отличающиеся от фазы роста микроорганизмов: более низкая скорость протока, меньшая концентрация в среде лимитирующего субстрата. В этом случае в первом аппарате поддерживают условия, оптимальные для роста микроорганизмов, а во втором — для биосинтеза продуктов метаболизма
Слайд 17

Метод импульсных добавок для подбора оптимальной среды в хемостате В ферментер

Метод импульсных добавок для подбора оптимальной среды в хемостате

В ферментер подаются

четыре потока различных субстратов, выходящий из аппарата поток жидкости будет равен:
Слайд 18

Как обнаружить реакцию культуры микроорганизмов на подачу того или иного источника

Как обнаружить реакцию культуры микроорганизмов на подачу того или иного источника

питания?
- Концентрация биомассы изменяется медленно,
- Ее трудно измерять.
Слайд 19

Для аэробных процессов используют параметр, пропорциональный общей скорости роста биомассы. -

Для аэробных процессов используют параметр, пропорциональный общей скорости роста биомассы.
- Интенсивность

дыхания культуры или скорость потребления кислорода, или образования углекислого газа.
Слайд 20

Fвозд. И ССО2 – измеряют газоанализатором Q CO2 - скорость образования

Fвозд. И ССО2 – измеряют газоанализатором

Q CO2 - скорость образования углекислого

газа;
G CO2 - общее количество углекислого газа на весь объем ферментера
Слайд 21

Метод импульсных добавок 1. В аппарат вносят дозу одного из субстратов

Метод импульсных добавок

1. В аппарат вносят дозу одного из субстратов

сверх его непрерывной подачи. При этом концентрация этого субстрата сначала кратковременно возрастает, а затем снижается до исходного уровня. Интенсивность дыхания тоже кратковременно возрастает и как бы повторяет кривую изменения концентрации субстрата, если в среде имеет место его недостаток. Если недостатка нет, то никакого эффекта добавление субстрата не вызывает.
Слайд 22

Метод импульсных добавок 2. Можно последовательно менять скорость подпитки субстрата и

Метод импульсных добавок

2. Можно последовательно менять скорость подпитки субстрата и

наблюдать за изменением интенсивности дыхания.
Изменение расхода субстрата прекращается, если очередное его увеличение не привело к увеличению интенсивности дыхания
Слайд 23

Метод импульсных добавок является удобным способом корректировки подачи субстратов в непрерывном хемостате

Метод импульсных добавок является удобным способом корректировки подачи субстратов в непрерывном

хемостате
Слайд 24

Непрерывное культивирование с внешним регулированием параметров турбидостат; респиростат; рН-стат; теплостат; оксистат; нутристат

Непрерывное культивирование с внешним регулированием параметров

турбидостат;
респиростат;
рН-стат;
теплостат;
оксистат;
нутристат

Слайд 25

турбидостат Скорость разбавления в аппарате не поддерживается на постоянном уровне, а

турбидостат

Скорость разбавления в аппарате не поддерживается на постоянном уровне, а регулируется

в зависимости от концентрации биомассы.
способ измерения концентрации биомассы — определение степени поглощения светового потока суспензией. Он называется турбидиметрическим.
Слайд 26

Слайд 27

Интенсивность дыхания культуры пропорциональна росту, образованию продукта и поддержанию жизнедеятельности

Интенсивность дыхания культуры пропорциональна росту, образованию продукта и поддержанию жизнедеятельности

Слайд 28

респиростат с помощью газоанализаторов кислорода или углекислого газа можно измерять интенсивность

респиростат

с помощью газоанализаторов кислорода или углекислого газа можно измерять интенсивность дыхания

культуры
регулируя интенсивность дыхания, можно регулировать и концентрацию биомассы, а следовательно, скорость подачи субстрата
Слайд 29

Лучше не поддерживать дыхание на постоянном уровне, а все время искать скорость разбавления, обеспечивающую его максимум

Лучше не поддерживать дыхание на постоянном уровне, а все время искать

скорость разбавления, обеспечивающую его максимум
Слайд 30

оксистат подачу питательной среды в аппарат (скорость разбавления) осуществляют таким образом,

оксистат

подачу питательной среды в аппарат (скорость разбавления) осуществляют таким образом, чтобы

поддерживать постоянное, относительно малое значение концентрации растворенного кислорода в среде
Слайд 31

Скорость потребления кислорода QО2 пропорциональна сумме его затрат на рост биомассы,

Скорость потребления кислорода QО2 пропорциональна сумме его затрат на рост биомассы,

образование продукта и поддержание жизнедеятельности культуры

Величина QO2 связана с концентрацией растворенного кислорода

Слайд 32

как всякий субстрат, растворенный кислород влияет на скорость роста биомассы и

как всякий субстрат, растворенный кислород влияет на скорость роста биомассы и

через него — на Qo2 , часто по зависимости Моно
Слайд 33

при возрастании С скорость роста биомассы сначала увеличивается очень быстро, но

при возрастании С скорость роста биомассы сначала увеличивается очень быстро, но

выше некоторого критического значения Скр, скорость роста (и как следствие — скорость потребления кислорода) уже практически не зависит от величины С.
Слайд 34

Оксистат – способ ведения непрерывного процесса ферментации (способ Господки)

Оксистат – способ ведения непрерывного процесса ферментации (способ Господки)

Слайд 35

рН-стат Рост микроорганизмов зачастую сопровождается выделением в среду некоторых кислот (закислением).

рН-стат

Рост микроорганизмов зачастую сопровождается выделением в среду некоторых кислот (закислением). Замедление

же роста при недостатке субстрата вызывает, наоборот, защелачивание культуры, выражающееся в повышении рН. В некоторых процессах величина рН используется как параметр, в зависимости от которого в аппарат подается питательная среда.
Слайд 36

Скорость подачи субстрата регулируется таким образом, чтобы величина рН поддерживалась на

Скорость подачи субстрата регулируется таким образом, чтобы величина рН поддерживалась на

некотором постоянном уровне.
Исключают регулирование рН другими способами — подачей в аппарат щелочи или кислоты.
Слайд 37

нутристат подача питательной среды в аппарат осуществляется так, чтобы поддерживать заданное значение концентрации субстрата S

нутристат

подача питательной среды в аппарат осуществляется так, чтобы поддерживать заданное значение

концентрации субстрата S
Слайд 38

В хемостате специально следить за концентрацией субстрата не нужно — она

В хемостате специально следить за концентрацией субстрата не нужно — она

устанавливается сама собой в зависимости от скорости разбавления:
Слайд 39

Другая ситуация возникает, когда удельная скорость роста зависит от концентрации субстрата

Другая ситуация возникает, когда удельная скорость роста зависит от концентрации субстрата

S по уравнению Андрюса, т. е. когда функция μ(S) проходит через экстремум
Слайд 40

Трудно поддерживать необходимую концентрацию в зоне ингибирования роста, если эта повышенная

Трудно поддерживать необходимую концентрацию в зоне ингибирования роста, если эта повышенная

концентрация способствует оптимальной скорости биосинтеза продукта метаболизма.
Этот способ имеет неудобство: необходимо непрерывно измерять концентрацию субстрата в аппарате, что не всегда просто осуществить
Слайд 41

теплостат Скорость тепловыделения обычно связана с ростом микроорганизмов. Зависимость скорости тепловыделения

теплостат

Скорость тепловыделения обычно связана с ростом микроорганизмов. Зависимость скорости тепловыделения от

температуры подобна зависимости удельной скорости роста от температуры.
Слайд 42

Преимущества и недостатки непрерывного способа культивирования микроорганизмов ПРЕИМУЩЕСТВА 1. Рост биомассы

Преимущества и недостатки непрерывного способа культивирования микроорганизмов

ПРЕИМУЩЕСТВА
1. Рост биомассы можно поддерживать

неопределенно долго.
2. Можно исключить влияние физических или химических факторов на рост и на образование продукта при постоянной скорости роста.
3. Можно за счет разбавления поддерживать постоянную концентрацию биомассы.
Слайд 43

Преимущества: 4. Можно длительно поддерживать рост, лимитированный одним заданным субстратом, и

Преимущества:

4. Можно длительно поддерживать рост, лимитированный одним заданным субстратом, и изучать

влияние лимитирования на состав клеток и их активность.
5. Состав среды можно оптимизировать методом импульсных добавок.
6. При непрерывном культивировании удобно определять кинетические константы, выход биомассы.
7. Результаты, полученные при непрерывном культивировании, часто более надежны и воспроизводимы, чем в периодическом процессе.
Слайд 44

Преимущества: 8. Процесс имеет большую производительность и относительно малое непродуктивное время

Преимущества:

8. Процесс имеет большую производительность и относительно малое непродуктивное время (лишь

в период запуска).
9. Облегчены механизация и автоматизация.
10. При постоянстве технологических режимов постоянно и качество продукта.
11. Невысокий износ измерительных приборов в связи со стерилизацией.
12. Снижается опасность контакта обслуживающего персонала с микроорганизмами.
13. Непрерывные процессы можно использовать для автоселекции микроорганизмов.
Слайд 45

Недостатки: 1. Меньшая гибкость, регулировать можно лишь некоторые параметры (скорость разбавления,

Недостатки:

1. Меньшая гибкость, регулировать можно лишь некоторые параметры (скорость разбавления, среду,

концентрацию кислорода, температуру).
2. Более высокие требования к постоянству качества сырья.
3. Большие капитальные вложения (непрерывная стерилизация среды, автоматизация и т. д.).
4. Трудно обеспечить непрерывное дозирование нерастворимых твердых субстратов