Введение в цитологию микроорганизмов

Содержание

Слайд 2

Строение клетки микроорганизмов Цитология микроорганизмов

Строение клетки микроорганизмов

Цитология микроорганизмов

Слайд 3

Микроорганизмы Это группа живых организмов, которые слишком малы для того, чтобы

Микроорганизмы

Это группа живых организмов, которые слишком малы для того, чтобы быть

видимыми невооружённым глазом (их характерный размер — менее 0,1 мм).

В состав микроорганизмов входят:
прокариоты: бактерии, археи
эукариоты: некоторые грибы, протисты,

Слайд 4

Клеточная теория Клетка - это элементарная самовоспроизводящаяся единица структуры и функции

Клеточная теория

Клетка - это элементарная самовоспроизводящаяся единица структуры и функции абсолютно

всех живых существ

Клеточная теория сформулирована в середине XIX века Матиассом Шлейденом и Теодором Шванном на основе многих исследований о клетке (1838) и позже дополнена положением о возникновении клеток (1858)

Слайд 5

Основные положения клеточной теории Клетка - единица строения, жизнедеятельности, роста и

Основные положения клеточной теории

Клетка - единица строения, жизнедеятельности, роста и развития

живых организмов, вне клетки жизни нет;
Клетка - единая система, состоящая из множества закономерно связанных друг с другом элементов, представляющих собой определенное целостное образование;
Клетки всех организмов сходны по своему химическому составу, строению и функциям;
Новые клетки образуются только в результате деления исходных клеток;
Клетки многоклеточных организмов образуют ткани, из тканей органы. Жизнь организма в целом обусловлена взаимодействием составляющих его клеток;
Клетки многоклеточных организмов имеют полный набор генов, но отличаются друг от друга тем, что у них работают различные группы генов, следствием чего является морфологическое и функциональное разнообразие клеток - дифференцировка.

Примечание:
клетки прокариот и эукариот являются системами разного уровня сложности и не гомологичны;
в основе деления лежит копирование наследственной информации;
клетки многоклеточных тотипотентны

Слайд 6

Отступление от положений клеточной теории Клеточная структура не единственная форма существования

Отступление от положений клеточной теории

Клеточная структура не единственная форма существования жизни

(вирусы)
Однако обмен веществ, способность к размножению и т.п. проявляется только внутри клеток-хозяев, вне клеток вирус представляет собой сложное химическое вещество
Несоответствие по уровню организации клеток прокариот и эукариот
Эукариотическая клетка – система более высокого уровня организации и не может быть абсолютно гомологична прокариотической клетке. Гомология сводится к наличию у все элементарной мембраны, рибосом и хромосом
Многие сложноустроенные протисты следует рассматривать как надклеточные структуры, а гаметы – это особое гаплоидное поколение клеток
Слайд 7

Таксономические группы в систематике Таксон – группа организмов, обладающих заданной степенью

Таксономические группы в систематике

Таксон – группа организмов, обладающих заданной степенью однородности

Основные

ранги:
Царство (Regnum)
Отдел (Phylum)
Класс (Classis)
Порядок (Ordo)
Семейство (Familia)
Род (Genus)
Вид (Species)

Анализ нуклеотидной последовательности 16S-18S рРНК

Слайд 8

Филогенетическое дерево, построенное на основе анализа нуклеотидных последовательностей генов 16S-18S рРНК

Филогенетическое дерево, построенное на основе анализа нуклеотидных последовательностей генов 16S-18S рРНК


Слайд 9

Цитологические различия между археями, бактериями и эукариотами

Цитологические различия между археями, бактериями и эукариотами

Слайд 10

Цитологические признаки, дифференцирующие про- и эукариотические клетки

Цитологические признаки, дифференцирующие про- и эукариотические клетки

Слайд 11

Цитологические признаки, дифференцирующие про- и эукариотические клетки (продолжение)

Цитологические признаки, дифференцирующие про- и эукариотические клетки (продолжение)

Слайд 12

Микроскопия – основной метод цитологии Микроскопия (лат. μΙκροσ - мелкий, маленький

Микроскопия – основной метод цитологии

Микроскопия (лат. μΙκροσ - мелкий, маленький и

σκοποσ - вижу) -изучение объектов с использованием микроскопа.

оптический

просвечи-вающий электронный

сканирующий электронный

Виды микроскопов

сканирующие

атомно-силовой

туннельный

ближне-польный

Слайд 13

Микроскопия – основной метод цитологии Виды микроскопии: Оптическая микроскопия - Светопольная

Микроскопия – основной метод цитологии

Виды микроскопии:
Оптическая микроскопия
- Светопольная оптическая микроскопия
- Микроскопия

при боковом освещении
- Темнопольная оптическая микроскопия
- Дисперсионно-окрашивающая микроскопия
- Фазово-контрастная микроскопия
- Дифференциально-интерференсная контрастная микроскопия
- Флуоресцентная микроскопия
- Деконволюционная микроскопия
- Рентгеновская микроскопия
Электронная микроскопия
Сканирующая микроскопия
- Сканирующая туннельная микроскопия
- Силовая микроскопия
- Ближнепольная сканирующая оптическая микроскопия
Слайд 14

Микроскопия – основной метод цитологии Разрешающая способность – минимальное расстояние между

Микроскопия – основной метод цитологии

Разрешающая способность – минимальное расстояние между двумя

точками, которые видны отдельно.

λ - длина волны света, используемого для освещения объекта;
n – коэффициент преломления среды;
α - угол между оптической осью объектива и наиболее отклоняющимся лучом, попадающим в объектив

В световом микроскопе при длине волны видимого света 400-700 нм максимальная разрешающая способность составляем 200-350 нм

Слайд 15

Оптическая микроскопия Ограничения: Позволяет рассмотреть только темные или хорошо отражающие объекты

Оптическая микроскопия

Ограничения:
Позволяет рассмотреть только темные или хорошо отражающие объекты
Предел разрешающей способности

равен 0,2 мкм
- Четкое изображение может быть получено лишь в фокусной зоне

Источник света

Линза конденсора

Предметное стекло

Линза объектива

Линза окуляра

Слайд 16

Светопольная оптическая микроскопия Современный микроскоп Окрашенные клетки в светлом поле

Светопольная оптическая микроскопия

Современный микроскоп

Окрашенные клетки в светлом поле

Слайд 17

Использование иммерсии в оптической микроскопии В 1878 г. создан серийный иммерсионный

Использование иммерсии в оптической микроскопии

В 1878 г. создан серийный иммерсионный объектив

Показатель

преломления стекла 1,52

Влияние иммерсионной среды на числовую апертуру объектива.
2α = угол поля зрения объектива (числовая апертура = n2·y sinα)
1 — достигнут предельный угол полного отражения (= arcsin (n2/n1 ^ 41°); косое световое отверстие;
2 — полное отражение

n3

n2

n1

Слайд 18

Темнопольная оптическая микроскопия Рассеянный свет Образец Темнопольная пластинка Источник света Линза

Темнопольная оптическая микроскопия

Рассеянный свет

Образец

Темнопольная пластинка

Источник света

Линза конденсора

Часть света рассеивается образцом

Линза объектива

Блокирование

прямого света
Слайд 19

Темнопольная оптическая микроскопия Лептоспира Эритроциты крови

Темнопольная оптическая микроскопия

Лептоспира

Эритроциты крови

Слайд 20

Фазово-контрастная оптическая микроскопия Объектив Конденсор 1 – Диафрагма конденсора 2 –

Фазово-контрастная оптическая микроскопия

Объектив

Конденсор

1 – Диафрагма конденсора
2 – Предметное стекло
3 – Фазовая

пластинка
4 – Основное изображение

Измененная волна
S+D

S - волна

D - волна

Слайд 21

Фазово-контрастная оптическая микроскопия Клетка при фазово-контрастном микроскопировании Клетка при обычном (слева) и фазово-контрастном (справа) микроскопировании

Фазово-контрастная оптическая микроскопия

Клетка при фазово-контрастном микроскопировании

Клетка при обычном (слева) и фазово-контрастном

(справа) микроскопировании
Слайд 22

Поляризационная оптическая микроскопия Линза объектива Линза конденсора Фильтр Волластона Призма Волластона

Поляризационная оптическая микроскопия

Линза объектива

Линза конденсора

Фильтр Волластона

Призма Волластона

Источник света

Образец

Поляризационный фильтр

Поляризационный фильтр

Окуляр

Слайд 23

Поляризационная оптическая микроскопия Ориентация призмы Ориентация призмы Ориентация призмы Построение изображения

Поляризационная оптическая микроскопия

Ориентация призмы

Ориентация призмы

Ориентация призмы

Построение изображения при различной ориентации призмы

Волластона

Поляризационная картинка клеток Sacharomyces cerevisiae

Слайд 24

Флуоресцентная оптическая микроскопия

Флуоресцентная оптическая микроскопия

Слайд 25

Люминесцентный оптический микроскоп

Люминесцентный оптический микроскоп

Слайд 26

Изучение объекта с использованием различных фильтров и итоговая комбинация изображений Люминесцентная

Изучение объекта с использованием различных фильтров и итоговая комбинация изображений

Люминесцентная оптическая

микроскопия

Флуоресцентная картинка клеток Sacharomyces cerevisiae

Препарат риккетсий

Слайд 27

Конфокальный лазерный микроскоп

Конфокальный лазерный микроскоп

Слайд 28

А – сканирующая головка и системный блок со встроенным лазерным модулем:

А – сканирующая головка и системный блок со встроенным лазерным модулем:

1 – лазеры, 2 – система зеркал, 3 – АОПФ, 4 –светоделительное устройство, 5 – система зеркал-сканеров, 6 – объектив, 7 – детектор проходящего света, 8 – конфокальная диафрагма, 9 – призма, 10 – щель (шторки), 11 – коллиматор, 12 – ФЭУ.
Б – спектральный принцип выделения измеряемого сигнала.

Оптическая система ЛСКМ

А

Б

Слайд 29

Принцип работы ЛСКМ Фотоэлектронный умножитель Источник лазерного излучения Лучи флуорес-ценции в

Принцип работы ЛСКМ

Фотоэлектронный умножитель

Источник лазерного излучения

Лучи флуорес-ценции в фокусе

Конфокальная диафрагма

Лучи флуоресценции

не фокусе

Дихроматное зеркало

Объектив

Возбуждающие лучи

Уровни фокусировки

Слайд 30

Сравнение изображений, полученных флуоресцентной микроскопией (верхний ряд) и лазерной конфокальной микроскопией

Сравнение изображений, полученных флуоресцентной микроскопией (верхний ряд) и лазерной конфокальной микроскопией

Слайд 31

Получении серии изображений с помощью ЛКСМ с шагом 5 мкм

Получении серии изображений
с помощью ЛКСМ с шагом 5 мкм

Слайд 32

Предпосылки создания электронного микроскопа Гипотеза волновой природы электрона, выдвинутая в 1924

Предпосылки создания электронного микроскопа

Гипотеза волновой природы электрона, выдвинутая в 1924 году

Луи де Бройлем и экспериментально подтвержденная в 1927 году К. Дэвиссоном и Л. Джермером в США и Дж. Томсоном в Англии.

В 1931 году Р. Руденберг получил патент на просвечивающий электронный микроскоп, а в 1932 году М. Кнолль и Э. Руска построили первый просвечивающий микроскоп

1897 г. - Открытие электрона как частицы Дж. Дж. Томсоном

Электрон (от греч. «ήλεκτρον» - янтарь) - стабильная элементарная частица, одна из основных структурных единиц вещества.

Слайд 33

Просвечивающая электронная микроскопия

Просвечивающая электронная микроскопия

Слайд 34

Микрофотографии окрашенных микроорганизмов А – Salmonella typhimurium окрашенная 0,5% молибдатом аммония

Микрофотографии окрашенных микроорганизмов

А – Salmonella typhimurium окрашенная 0,5% молибдатом аммония (треугольниками

указаны пили, стрелкой укзан жгутик). Шкала 250 нм
Б – Бактериофаг (треугольниками указаны хвостовые нити, черной стрелкой указан головки фагов содержащие ДНК, белой стрелкой указаны пустые головки). Шкала 50 нм
Слайд 35

Сканирующая электронная микроскопия Сканирующий электронный микроскоп фокусирующие линзы анод образец экран монитор

Сканирующая электронная микроскопия

Сканирующий электронный микроскоп

фокусирующие линзы

анод

образец

экран

монитор

Слайд 36

Фотография, полученная с помощью сканирующей электронной микроскопии Metarhizium anisopliae и Agrobacterium tumefaciens

Фотография, полученная с помощью сканирующей электронной микроскопии

Metarhizium anisopliae и Agrobacterium tumefaciens

Слайд 37

Атомно-силовая микроскопия Фотодиод Лазер Кантилевер и наконечник Образец Система детекции и коррекции Образец

Атомно-силовая микроскопия

Фотодиод

Лазер

Кантилевер и наконечник

Образец

Система детекции и коррекции

Образец

Слайд 38

Изображение Myxococcus xanthus, полученное с помощью атомно-силовой микроскопии

Изображение Myxococcus xanthus, полученное с помощью атомно-силовой микроскопии

Слайд 39

Сканирующая туннельная микроскопия образец ток игла Пьезоэлектронная трубка с электродами Модуль

Сканирующая туннельная микроскопия

образец

ток

игла

Пьезоэлектронная трубка с электродами

Модуль управления

Модуль обработки и вывода изображения