Содержание
- 2. Выделение целевого белка В настоящем разделе будут рассмотрены общие подходы к выделению целевого продукта биосинтеза -
- 3. Общая схема выделения продуктов биосинтеза
- 4. Выделение и очистка целевого продукта. На этой стадии производства осуществляется сбор белка из синтезировавших его клеток
- 5. Выделение и очистка целевого белка из культуральной среды При нахождении целевого продукта в культуральной жидкости в
- 6. Выделение и очистка целевого белка из культуральной среды Первым этапом выделения целевого продукта из культуральной среды
- 7. Флотация Метод может быть применен, если клетки продуцента в биореакторе из-за низкой смачиваемости накапливаются в поверхностных
- 8. Центрифугирование Метод основан на осаждении взвешенных в жидкости частиц с применением центробежной силы. Центрифугирование и фильтрация
- 9. Фильтрация Отделение твердой фазы (мелкодисперсный клеточный материал и др.) возможно методом фильтрации. Фильтрация - это отделение
- 10. Фильтры «поверхностного типа» Через пространство между волокнами и проходит фильтруемая жидкость. Если размер частиц превышает размер
- 11. Фильтры для глубинной фильтрации При глубинном фильтровании частицы задерживаются как на поверхности так и, главным образом,
- 12. Фильтры для глубинной фильтрации Глубинный фильтр прежде всего выполняет задачу надежного отделения клеток и фрагментов клеток
- 13. Мембранная фильтрация Отделение и концентрация целевого белка в полученном после предварительной фильтрации растворе требует применения глубинных
- 14. Мембранная фильтрация Поры мембранного материала чрезвычайно малы и измеряются в ангстремах (10–10 м). Соответственно, продавливание жидкости
- 15. Мембранная фильтрация Выделяют четыре общепринятые категории мембран. Они определены на основании размера отделяемого ими из исходной
- 16. Обратный осмос При обратном осмосе для разделения жидкости используется мембрана с наименьшим размером пор. Фактически, через
- 17. Нанофильтрация Нанофильтрация в отличие от обратного осмоса, позволяет отделять уже более крупные молекулярные объекты. В используемых
- 18. Ультрафильтрация Для ультрафильтрации используются мембраны с более крупными порами и относительно низким рабочим давлением. Соли, сахара,
- 19. Микрофильтрация При мембраной микрофильтрации, как правило, задерживаются взвешенные частицы, бактерии и глобулы жиров.
- 20. Диафильтрация. В процессе «тангенциальной» ультрафильтрации культуральная среда (либо продукт ее предварительной обработки) движется вдоль мембраны. В
- 21. Экстракция при переработке культуральной среды От лат. extractio — извлечение, процесс разделения смеси жидких или твёрдых
- 22. Очистка целевого продукта хроматографическими методами. Эффективным методом отделения целевого продукта биосинтеза (Например,белка) является многократная очистка на
- 23. Очистка целевого продукта хроматографическими методами. Многообразие вариантов хроматографического метода вызвало необходимость их систематизации. Хроматография позволяет решать
- 24. Очистка целевого продукта хроматографическими методами. В зависимости от механизма, лежащего в основе равновесного распределения, можно делить
- 25. Ионообменная хроматография Ионообменная хроматография представляет собой метод, позволяющий разделять ионы и полярные молекулы на основе их
- 26. Ионообменная хроматография Неподвижной фазой для этого типа хроматографии являются ионообменные смолы - полимерные органические соединениями, содержащими
- 27. Гидрофобная хроматография Гидрофобная хроматография представляет собой метод разделения, основанный на свойстве гидрофобности белков. Поверхность белковой глобулы
- 28. Гидрофобная хроматография Из закрепленных за счет гидрофобных взаимодействий белков в первую очередь вымываются компоненты смеси c
- 29. Хроматография гель-фильтрацией Гель-фильтрация или эксклюзионная хроматография (ситовая, гель-проникающая, гель-фильтрационная хроматография) представляет собой метод разделения молекул в
- 30. Хроматография гель-фильтрацией При обработке эпихлоргидрином полисахарида декстрана образуются различной степени выраженности поперечные связи, приводящие к формированию
- 31. Хроматография гель-фильтрацией Поскольку молекулы белков, обладающие большими молекулярной массой и размерами, не диффундируют внутрь зерен сефадекса,
- 32. Аффинная хроматография Аффинная хроматография представляет собой метод разделения биологических молекул, который основан на специфичных взаимодействиях между
- 33. Аффинная хроматография Успешная аффинная очистка требует биоспецифического лиганда, который может быть ковалентно связан с хроматографической матрицей.
- 34. Аффинная хроматография Некоторые типичные биологические взаимодействия, часто используемые в афинной хроматографии представлены ниже: Фермент - субстрат,
- 35. Аффинная хроматография Этапы афинного разделения белков. Уравновешивание Адсорбция образца и элюция несвязавшегося материала Смыв несвязавшегося материала
- 36. Выделение и очистка целевого целевого продукта биосинтеза из клеток Для выделения и очистки продуктов, находящихся внутри
- 37. Выделение и очистка целевого целевого продукта биосинтеза из клеток Осторожное и избирательное разрушение клеточной стенки возможно
- 38. Выделение и очистка целевого целевого продукта биосинтеза из клеток Экстракты разрушенных клеток можно фракционировать, подвергая их
- 39. Выделение и очистка целевого целевого продукта биосинтеза из клеток При ультрацентрифугировании различные фракции седиментируют с различной
- 40. Выделение и очистка целевого целевого продукта биосинтеза из клеток Образующуюся жидкость освобождают от сопутствующих растворимых веществ.
- 41. Выделение и очистка целевого целевого продукта биосинтеза из клеток 2. Экстракция. При твердо-жидкофазной экстракции вещество из
- 42. Инактивация вирусов и противовирусная очистка Необходимым элементом выделения и очистки целевых белков является противовирусная очистка. При
- 43. Инактивация вирусов и противовирусная очистка Вирусная инактивация может быть проведена за счет изменения рН. В кислых
- 44. Инактивация вирусов и противовирусная очистка Применяюются также хроматографические методы. Здесь можно применять аффинную, ионообменную хроматографию, хроматографию
- 45. КОНТРОЛЬНЫЕ ВОПРОСЫ Общая схема выделения белков как целевого продукта биотехнологии. Основные принципы выделения внутриклеточных и внеклеточных
- 46. Общая характеристика мембранной фильтрации. Сравнение тупиковой и тангенциальной фильтрации. Категории мембранных фильтров, выделяемых по размеру пор.
- 48. Скачать презентацию