Спектрофлуориметрия

Содержание

Слайд 2

Флуориметрия (молекулярная эмиссионная спектроскопия) это физико-химический метод исследования растворов и твёрдых

Флуориметрия (молекулярная эмиссионная спектроскопия) это физико-химический метод исследования растворов и твёрдых

веществ, основанный на изучении спектров излучения молекул в ультрафиолетовой (200-400 нм), видимой (400-760 нм) и инфракрасной (>760 нм) областях спектра которое возникает при облучении вещества светом с определенной длиной волны или в результате химической реакции.
Слайд 3

В зависимости от способа возбуждения люминофора различают: Излучение, возбуждаемое каким-либо источником

В зависимости от способа возбуждения люминофора различают:

Излучение, возбуждаемое каким-либо источником энергии

и не обусловленное нагреванием веществ, продолжающееся в течение времени, значительно превышающего период световых колебаний, называют люминесценцией.

фотолюминесценцию – свечение вещества, возникающее под действием излучения в УФ и видимой областях спектра;

хемилюминесценция – свечение вещества, возникающее под действием энергии химических реакций;

сонолюминесценция – свечение вещества, возникающее под действием ультразвука;

Слайд 4

радиолюминесценция – свечение вещества в результате возбуждения ионизирующим излучением; электролюминесценция – свечение под действием электрического поля.

радиолюминесценция – свечение вещества в результате возбуждения ионизирующим излучением;

электролюминесценция – свечение

под действием электрического поля.
Слайд 5

Флуориметрия и спектрофлуориметрия. Под первым методом понимают количественный анализ при фиксированной

Флуориметрия и спектрофлуориметрия.
Под первым методом понимают количественный анализ при фиксированной

длине волны возбуждающего излучения.
Второй метод предполагает сканирование как по длине волны возбуждения, так и по длине волны флуоресценции.
Среди приборов также выделяют флуориметры (приборы, которые на канале возбуждения и/или флуоресценции имеют простой светофильтр)
спектрофлуориметры (приборы со сканирующими монохроматорами в обоих каналах).
Слайд 6

Общая схема спектрофлуориметра

Общая схема спектрофлуориметра

Слайд 7

Три типа образцов: а) разбавленные растворы или газы, для которых поглощение

Три типа образцов:
а) разбавленные растворы или газы, для которых поглощение

возбуждающего света мало для всех исследуемых длин волн; стеклообразные замороженные растворы;
б) концентрированные растворы;
в) непрозрачные твердые тела и кристаллические или заморозамороженные при низкой температуре растекавшиеся растворы, непрозрачные жидкие растворы.
Слайд 8

Общая схема спектрофлуориметра

Общая схема спектрофлуориметра

Слайд 9

Монохроматор Схема монохроматора Черни-Тёрнера Формула для расчета размера щели

Монохроматор

Схема монохроматора Черни-Тёрнера

Формула для расчета размера щели

Слайд 10

Общая схема спектрофлуориметра Кюветы Клееные кюветы Кюветы, полученные спеканием Паяные кюветы

Общая схема спектрофлуориметра

Кюветы

Клееные
кюветы

Кюветы, полученные спеканием

Паяные кюветы

Слайд 11

Общая схема спектрофлуориметра Фотоумножитель

Общая схема спектрофлуориметра

Фотоумножитель

Слайд 12

Общая схема спектрофлуориметра

Общая схема спектрофлуориметра

Слайд 13

Спектрофлуориметрия: практические аспекты Чувствительность фотоприемников зависит от длины волны света. Для

Спектрофлуориметрия: практические аспекты

Чувствительность фотоприемников зависит от длины волны света. Для получения

истинного спектра флуоресценции измеренные зависимости интенсивности от длины волны должны быть исправлены с учетом спектральной чувствительности фотоприемника.
Интенсивность возбуждающего света также зависит от длины волны. Для получения истинного спектра возбуждения флуоресценции прибор должен иметь канал сравнения, в который помещают вещество, играющее роль счетчика фотонов.
Эффект внутреннего фильтра. Если оптическая плотность исследуемого образца мала (< 0.1), то интенсивность флуоресценции примерно одинакова в любой точке вдоль пути возбуждающего света через образец.
Вторичное поглощение. Еще один эффект, который может приводить к ошибкам измерения флуоресценции – вторичное поглощение (реабсорбция). Эффект реабсорбции возникает, если спектры поглощения и флуоресценции перекрываются и оптическая плотность образца в области перекрывания значительна.
Слайд 14

Устройство спектрофлуориметра Флюорат-02-Панорама 6 – кювета; 9 – фотоэлектронный умножитель; 11

Устройство спектрофлуориметра Флюорат-02-Панорама

6 – кювета;
9 – фотоэлектронный умножитель;
11 – ФЭУ

фотометрического канала;
12 - ФЭУ опорного канала

1 - ксеноновая лампа;
2 - отсекающие устройство;
3, 8 – монохроматоры;
4, 7 – светофильтры;
5, 10 – светоделители;

Программа Panorama Pro

Слайд 15

Cary Eclipse разрабатывался как спектрофлюориметр широкого профиля для проведения исследовательских работ

Cary Eclipse разрабатывался как спектрофлюориметр широкого профиля для проведения исследовательских работ

и рутинных измерений, обладающий максимальной чувствительностью, скоростью и мощным пакетом программного обеспечения, превосходящим все современные аналоги.

Спектрофлуориметр FP-8600 - это прибор исследовательского класса, работающий в ближнем ИК диапазоне для изучения новых материалов, таких как углеродные нанотрубки, красителей, флуоресцирующих в БИК области спектра, повышающих флуоресцентных стекол

Спектрофлуориметр DeltaFlex

Спектрофлуориметр QuantaMaster

Слайд 16

Судебная экспертиза Технология

Судебная экспертиза

Технология

Слайд 17

Слайд 18

В флуориметрах используется сравнительно простая электроника. Спектрофлуориметрические методы обладают высокой чувствительностью

В флуориметрах используется сравнительно простая электроника.
Спектрофлуориметрические методы обладают высокой чувствительностью

и позволяют работать с крайне малыми концентрациями вещества
Чувствительность флуориметров легко менять в широком диапазоне, усиливая ток фотоумножителя.
Спектрофлуориметры обладают хорошей спектральной селективностью, поскольку благодаря стоксовому сдвигу можно использовать два монохроматора — один настроенный на длину волны возбуждающего света, а другой — на длину волны флуоресценции.
Во флуориметре не требуется кюве­ты сравнения, но надо иметь калибровочную кривую.

Основная трудность, возникающая при флуориметрическйх изменениях, — это тушение флуоресценции, когда энергия воз­буждения молекул переходит не в световую, а в тепловую энергию их движения.

Преимущества и недостатки флуориметрии по сравнению со спектрофотометрией.

Сканирующий спектрофлуориметр

Спектрофотометр

Слайд 19

Список литературы: http://chem.msu.su/rus/vmgu/145/281.pdf - ВОЗМОЖНОСТИ СПЕКТРОФЛУОРИМЕТРА «ФЛЮОРАТ-02-ПАНОРАМА» В АНАЛИЗЕ СМЕСИ ФЛУОРЕСЦЕНТНЫХ

Список литературы:

http://chem.msu.su/rus/vmgu/145/281.pdf - ВОЗМОЖНОСТИ СПЕКТРОФЛУОРИМЕТРА «ФЛЮОРАТ-02-ПАНОРАМА» В АНАЛИЗЕ СМЕСИ ФЛУОРЕСЦЕНТНЫХ КРАСИТЕЛЕЙ

Е.М. Басова*, В.М. Иванов, О.К. Апендеева*
http://referatwork.ru/category/obrazovanie/view/597138_spektrofluorimetry - Спектрофлуориметрия: практические аспекты
Эмануэль Н.М., Кузьмин М.Г. Экспериментальные методы химической кинетики
http://www.lumex.ru/catalog/flyuorat-02-panorama.php - Анализатор жидкости «ФЛЮОРАТ®-02-ПАНОРАМА»
http://www.agilent.com/en-us/products/fluorescence/fluorescence-systems/cary-eclipse-fluorescence-spectrophotometer - Cary Eclipse Fluorescence Spectrophotometer
https://studfiles.net/preview/4372705/page:2/ - Спектрофлуориметры
https://megalektsii.ru/s16446t6.html - Спектрофлуориметрия.
https://lektsia.com/7x482a.html - Спектрофотометрия. Спектрофлуориметрия.