Ионообменная хроматография в разделении белков

Слайд 2

Перед изучением свойств белка необходимо получить его чистый препарат Первая стадия

Перед изучением свойств белка необходимо получить его чистый препарат
Первая стадия разрушения

клеток - грубый экстракт
Существуют различные виды фракционирования, одним из наиболее популярных является хроматография ( колоночная, ионообменная, афинная, эксклюзионная и др)
Слайд 3

Что же такое хроматография? Хроматогра́фия — метод разделения и анализа смесей

Что же такое хроматография?

Хроматогра́фия — метод разделения и анализа смесей веществ,

а также изучения физико-химических свойств веществ
Основан на распределении веществ между двумя фазами
В зависимости от используемого матрикса белки могут разделяться по заряду, гидрофобности, размеру и способности связывать конкретные химические группы
Слайд 4

Ионообменная хроматография Ионообменная хроматография основана на различии знака и величины заряда

Ионообменная хроматография

Ионообменная хроматография основана на различии знака и величины заряда белков

при определенном значении ph
Носитель, которым заполняют колонку представляет собой синтетический полимер смолу, содержащий связанные заряженные группы.
Носитель с анионными группами называют катионообменником, а с катионными группами – анионообменниками.
При выборе ионообменной хроматографии руководствуются изоэлектрической точкой белка, при значении рн выше точки белок имеет отрицательный заряд, и при значении меньше положительный
Белок, несущий суммарный положительный заряд, движется в жидкой фазе медленнее, чем белок, несущий отрицательный заряд, поскольку продвижение первого белка тормозиться за счет взаимодействия с носителем.
Слайд 5