Микробиологическая диагностика дифтерии

Содержание

Слайд 2

Тема лекции: Микробиологическая диагностика дифтерии

Тема лекции:

Микробиологическая
диагностика
дифтерии

Слайд 3

План лекции: 1. Определение заболевания «дифтерия». Краткий исторический очерк. 2. Биологические

План лекции:

1. Определение заболевания «дифтерия». Краткий исторический очерк.
2. Биологические свойства возбудителя.
3.

Патогенез и клинические проявления.
4. Методы лабораторной диагностики.
5. Лечение дифтерии. Методы профилактики.
Слайд 4

Дифтерия – острое инфекционное заболевание, которое проявляется глубокой интоксикацией организма дифтерийным

Дифтерия –

острое инфекционное заболевание, которое проявляется глубокой интоксикацией организма дифтерийным токсином

и характерным фибринозным воспалением в месте локализации возбудителя.
Слайд 5

История вопроса 1883 – 1884 гг. – Ф. Леффлер и Э.

История вопроса

1883 – 1884 гг. – Ф. Леффлер и Э. Клебс

выделили и получили чистую культуру возбудителя.
1888г – Э. Ру и А. Иерсен обнаружили экзотоксин.
1892г – Э. Беринг получил антитоксическую сыворотку.
1923г – Г. Рамон предложил иммунизацию дифтерийным анатоксином.
Слайд 6

Возбудитель дифтерии Corynebacterium diphtheriae (лат.)

Возбудитель дифтерии
Corynebacterium diphtheriae (лат.)

Слайд 7

Дифтерийная палочка — грамположительные палочковидные бактерии рода Corynebacterium. Corynebacterium diphtheriae —

Дифтерийная палочка  —

грамположительные палочковидные бактерии рода Corynebacterium.
Corynebacterium diphtheriae — крупные, прямые, слегка изогнутые

полиморфные палочковидные бактерии.
Длина 1—6 мкм и шириной 0,3—0,8 мкм с утолщениями на концах.
Слайд 8

У истинно дифтерийной палочки - на полюсах клеток локализуются метахроматические зёрна

У истинно дифтерийной палочки - на полюсах клеток локализуются метахроматические зёрна волютина,

придавая клеткам характерную форму «булавы».
Этих «зерен» - 2.
Слайд 9

Зёрна волютина (тельца Бабеша-Эрнста) окрашиваются метиленовым синим по Нейссеру. Клетки бактерий

Зёрна волютина (тельца Бабеша-Эрнста) окрашиваются метиленовым синим по Нейссеру.
Клетки бактерий на микропрепаратах располагаются

одиночно, или, вследствие особенностей деления клеток, располагаются в форме латинской буквы V или Y.
Спор и капсул не образуют.
Слайд 10

Схематическое воспроизведение мазка

Схематическое воспроизведение мазка

Слайд 11

Слайд 12

Чистая культура возбудителя

Чистая культура возбудителя

Слайд 13

Коринебактерии (окр. синькой)

Коринебактерии (окр. синькой)

Слайд 14

ФИЗИОЛОГИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА

ФИЗИОЛОГИЧЕСКИЕ
СВОЙСТВА

Слайд 15

Культуральные свойства: Хемоорганогетеротроф, факультативный анаэроб. Палочки дифтерии растут только на сложных

Культуральные свойства:

Хемоорганогетеротроф, факультативный анаэроб.
Палочки дифтерии растут только на сложных питательных средах,

содержащих сыворотку (свёрнутая лошадиная сыворотка – среда Ру, смесь бычьей сыворотки с сахарным бульоном - ср. Леффлера).
На кровяном агаре с теллуритом (ср. Клаубера) - колонии чёрного цвета.
Слайд 16

Слайд 17

Колонии C.diphtheriae (сывороточный агар)

Колонии C.diphtheriae (сывороточный агар)

Слайд 18

По культурально-морфологическим и фермента-тивным свойствам различают 3 биовара: gravis, mitis и intermedius.

По культурально-морфологическим и фермента-тивным свойствам различают 3 биовара: gravis, mitis и intermedius.

Слайд 19

Тип gravis - сбраживает крахмал. Типы mitis и intermedius -нет.

Тип gravis - сбраживает крахмал. 
Типы mitis и intermedius -нет.

Слайд 20

Тип Gravis: Имеет R- форму колоний. Эти колонии - крупные шероховатые.

Тип Gravis:

Имеет R- форму колоний.
Эти колонии - крупные шероховатые.
На

плотных питательных средах, на среде с теллуром чёрного цвета. На жидких питательных средах — плёнка и зернистый осадок.
Слайд 21

Тип mitis: Образует колонии S- формы: гладкие с блестящей поверхностью на

Тип mitis:

Образует колонии S- формы: гладкие с блестящей поверхностью на плотных питательных

средах, на среде с теллуром чёрного цвета.
На жидких питательных средах — диффузное помутнение.
Слайд 22

Тип intermedius: промежуточная форма между двумя вышеперечисленными. На плотных питательных средах

Тип intermedius:

промежуточная форма между двумя вышеперечисленными. На плотных питательных средах — мелкие

колонии, в процессе роста на жидких средах дают помутнение и осадок.
Слайд 23

Факторы патогенности 1. Поверхностные структуры белкового и липидного происхождения (корд-фактор). 2.

Факторы патогенности

1. Поверхностные структуры белкового и липидного происхождения (корд-фактор).
2. Миколовые кислоты

микрокапсулы.
3. Ферменты и токсины.
Слайд 24

Ферменты адгезии и инвазии: 1. Нейраминидаза. 2. N-ацетилнейрамиатлиаза. 3. Гиалуронидаза –

Ферменты адгезии и инвазии:

1. Нейраминидаза.
2. N-ацетилнейрамиатлиаза.
3. Гиалуронидаза – обеспечивает отек тканей!
4.

Гемолизин.
5. Дермонекротоксин.
Слайд 25

Токсигенность (Ру, 1888 г.) Возбудителем заболевания являются токсигенные штаммы Corynebacterium diphtheriae.

Токсигенность (Ру, 1888 г.)

Возбудителем заболевания являются токсигенные штаммы Corynebacterium diphtheriae. 
Токсигенные коринебактерии дифте-рии обладают геном tox+, детермини-рующим синтез дифтерийного экзотоксина. 

Слайд 26

Способность токсигенных коринебактерий дифтерии к токсинообразованию не утра- чивается и не

Способность токсигенных коринебактерий дифтерии к токсинообразованию не утра- чивается и не изменяется: 
1. При длительной циркуляции в коллективах иммунных лиц.
 2. В процессе  лечения больных противодиф-терийной сывороткой

или санации бактерионосителей антибиотиками. 
Слайд 27

Экзотоксин состоит из 2-х фрагментов: 1. А – проявляет ферментативной активностью.

Экзотоксин состоит из 2-х фрагментов:

1. А – проявляет ферментативной активностью.
2. В

– обладает рецептор связывающей активностью.
Механизм действия: ингибирует синтез белка, в т.ч в миокарде (миокардит)!
А так же – блокирует синтез белка в миокарде, а так же демиелинизация нервных волокон.
Слайд 28

Устойчивость во внешней среде Возбудитель Д. может длительно сохраня-ться на фибринозных

Устойчивость во внешней среде

Возбудитель Д. может длительно сохраня-ться на фибринозных пленках, удаленных из очага воспаления (до 3-5 мес.), на

поверх- ности сухих предметов и в пыли (до 2 мес.), в продуктах питания (до 2-3 нед.), в трупах -  
(до 2 нед.). 
Быстро погибают под воздействием прямого солнечного света, 
дезинфицирующих средств, при влажной 
уборке.
Слайд 29

Эпидемиология инфекции: Источник инфекции – больной человек. Инкубационный период – чаще 2-7 сут.

Эпидемиология инфекции:

Источник инфекции – больной человек.
Инкубационный период – чаще 2-7 сут.

Слайд 30

КЛИНИЧЕСКИЕ ПРОЯВЛЕНИЯ ДИФТЕРИИ

КЛИНИЧЕСКИЕ ПРОЯВЛЕНИЯ ДИФТЕРИИ

Слайд 31

Клинические формы дифтерии (Д) Д. ву́львы - отек половых губ, изъязвления

Клинические формы дифтерии (Д)

Д. ву́львы - отек половых губ, изъязвления и гнойные

выделения.
Д.гла́за  - отек век, фибринозный налет на конъюнктиве век.
Д. ко́жи – сыпь и геморрагические пятна, пустулы.
Д.но́са - серозно-кровянистые выделения (ринит).
Д.ра́ны  – осложнение раневого процесса.
Д. токси́ческая – обширные фибринозные пленчатые налеты в зеве, выраженным регионарным лимфаденитом, отеком шейной клетчатки и явлениями интоксикации.
Слайд 32

Распространенная дифтерия ротоглотки: серовато-белые отторгающиеся налеты на гиперемированных с цианотичным оттенком небных миндалинах, дужках и язычке.

Распространенная дифтерия ротоглотки: серовато-белые отторгающиеся налеты на гиперемированных с цианотичным оттенком

небных миндалинах, дужках и язычке.
Слайд 33

Токсическая форма Д.

Токсическая форма Д.

Слайд 34

Слайд 35

Дифтерия («бычья шея») Выраженный отек шеи. Ребенок не может закрыть рот.

Дифтерия («бычья шея»)
Выраженный отек шеи. Ребенок не может закрыть рот. Язык

приподнят. Ринит. Субфебрильная температура. Ребенок погиб от миокардита. Антитоксина не было. Лаос.
Слайд 36

Дифтерия кожи

Дифтерия кожи

Слайд 37

Осложнения дифтерии связаны с повреждением нервных и других клеток крайне ядовитым

Осложнения дифтерии

связаны с повреждением нервных и других клеток крайне ядовитым дифтерийным

токсином.
Миокардиты, нарушения работы нервной системы, которые обычно проявляются в виде параличей. Чаще всего дифтерия осложняется параличами мягкого нёба, голосовых связок, мышц шеи, дыхательных путей и конечностей.
Из-за паралича дыхательных путей может наступить асфиксия (при крупе), провоцирующая летальный исход.
Слайд 38

Иммунитет при дифтерии После перенесённого заболевания формируется стойкий иммунитет, но через

Иммунитет при дифтерии

После перенесённого заболевания формируется стойкий иммунитет, но через 10-11

лет 5-7% переболевших может заболеть повторно.
Повторное заболевание носит нетяжёлый характер и переносится легче.
Слайд 39

Диагностика дифтерии: Материал для исследования берут 2 тампонами: дифтерийные пленки, полученные

Диагностика дифтерии:

Материал для исследования берут 2 тампонами: дифтерийные пленки, полученные со

слизистых оболочек носа и ротоглотки, глаз, гениталий, кожи и др. 
Посев на питательные среды необходимо осуществить не позднее 2-4 часов после взятия материала. – выделение чистой культуры.
Слайд 40

Бактериоскопическое исследование: Окраска по методу Нейссера для выявления телец Бабеша-Эрнста. ВНИМАНИЕ!

Бактериоскопическое исследование:

Окраска по методу Нейссера для выявления телец Бабеша-Эрнста.
ВНИМАНИЕ!
Следует дифференцировать

от других зернистообразующих бактерий – стрептобацилл.
Слайд 41

Бактериологическое исследование: 1. Посев материала от больного на питательные среды: Клауберга,

Бактериологическое исследование:

1. Посев материала от больного на питательные среды: Клауберга, Маклеода

и/или кровяной агар.
2. Далее часть колонии пересевают на среду Ру.
3. После выделения чистой культуры – посев на среды Гисса.
Слайд 42

Определение токсигенности: 1. На морских свинках массой 250 гр. - подкожно

Определение токсигенности:

1. На морских свинках массой 250 гр. - подкожно или

внутрикожно (0,5-1,0 мл) живой культуры.
2. In vitro – реакция преципитации в агаровом геле с использованием стандартных штаммов заведомо токсигенных и не токсигенных референс-штаммов C.diphteriae.
3. ПЦР-диагностика –выявление фрагмента А гена tox.
Слайд 43

Серологическая диагностика: Определение нарастания титра антитоксических антител производится с помощью РНГА

Серологическая диагностика:

Определение нарастания титра антитоксических антител производится с помощью РНГА и

имеет вспомогательное диагностическое значение.
Эта реакция используется для определения напряженности противодифтерийного иммунитета для решения вопроса о необходимости проведения ревакцинации.
Слайд 44

Специфическая профилактика адсорбированная коклюшно-дифтерийно-столбнячная вакцина (АКДС-вакцина), адсорбированный дифтерийно-столбнячный анатоксин (АДС-анатоксин), адсорбированный

Специфическая профилактика
адсорбированная коклюшно-дифтерийно-столбнячная вакцина (АКДС-вакцина),
адсорбированный дифтерийно-столбнячный анатоксин (АДС-анатоксин),
адсорбированный дифтерийно-столбнячный анатоксин

с уменьшенным содержанием антигенов (АДС-М-анатоксин),
адсорбированный дифтерийный анатоксин с уменьшенным содержанием антигена
(АД-М-анатоксин).

Вакцинация – в 3 месяца.
Ревакцинация – 1,5-2 года, 9-16 лет, далее через каждые 10 лет.

Слайд 45

Для лечения применяется Антитоксическая противодифтерийная сыворотка. Антибиотики.

Для лечения применяется

Антитоксическая
противодифтерийная
сыворотка.
Антибиотики.