Проточная цитометрия. Иммунофенотипирование

Содержание

Слайд 2

Моноклональные антитела

Моноклональные антитела

Слайд 3

Моноклональные антитела

Моноклональные антитела

Слайд 4

Поликлональные и моноклональные антитела 03/06/16

Поликлональные и моноклональные антитела

03/06/16

Слайд 5

Гибридомная технология Гибридо́ма — гибридная клеточная линия, полученная в результате слияния

Гибридомная технология

Гибридо́ма — гибридная клеточная линия, полученная в результате слияния клеток двух

видов: способных к образованию антител В-лимфоцитов полученных из селезёнки иммунизированного животного (чаще всего мыши), и раковых клеток миеломы. Слияние клеток производится с помощью нарушающего мембраны агента, такого, как полиэтиленгликоль  или вирус  Сёндай. Поскольку раковые клетки миеломы «бессмертны», то есть способны делиться большое количество раз, после слияния и соответствующей селекции  гибридома, производящая моноклональные антитела против антигена может поддерживаться долгое время. В 1984 г. за открытие принципа получения моноклональных антител Мильштейн, Кёлер  и Ерне  получили Нобелевскую премию по физиологии и медицине.
Слайд 6

Гибридомная технология

Гибридомная технология

Слайд 7

Принцип иммунноцитохимии 03/06/16

Принцип иммунноцитохимии

03/06/16

Слайд 8

Люминисцентная иммунноцитохимия 03/06/16

Люминисцентная иммунноцитохимия

03/06/16

Слайд 9

Иммунногистохимия 03/06/16

Иммунногистохимия

03/06/16

Слайд 10

Иммунногистохимия 03/06/16

Иммунногистохимия

03/06/16

Слайд 11

Y X Z Y Z X Принцип гидродинамического фокусирования

Y

X

Z

Y

Z

X

Принцип гидродинамического фокусирования

Слайд 12

FSC vs SSC рассеяние света под малыми углами (от 1° до

FSC vs SSC

рассеяние света под малыми углами (от 1° до

10°) (FSC- размеры клеток)
рассеяние света под углом 90° (SSC- соотношение ядро/цитоплазма, неоднородность и гранулярность клеток)
Слайд 13

Принципы работы 1) использование системы гидрофокусировки, которая обеспечивает прохождение клеток в

Принципы работы
1) использование системы гидрофокусировки, которая обеспечивает прохождение клеток в потоке

поодиночке;
2) облучение клетки лазерным излучением;
3) регистрации сигналов светорассеяния и флуоресценции от каждой клетки, причём степень световой дисперсии позволяет получить представление о размерах и структуре клетки
Кроме того, в ходе анализа учитывается уровень флуоресценции химических соединений, входящих в состав клетки (аутофлуоресценция) или внесённых в образец перед проведением проточной цитометрии.
Слайд 14

Устройство проточного цитометра

Устройство проточного цитометра

Слайд 15

Методики, выполняемые на проточном цитофлуориметре: Иммунофенотипирование острых лейкозов Иммунофенотипирование лимфопролиферативных заболеваний

Методики, выполняемые на проточном цитофлуориметре:

Иммунофенотипирование острых лейкозов
Иммунофенотипирование лимфопролиферативных заболеваний
Определение количества жизнеспособных

ГСК в трансплантате
Оценка минимальной остаточной болезни
Оценка ПНГ
Оценка иммунного статуса
Определение HLAB27
Слайд 16

Образцы для проточной цитометрии кровь костный мозг ликвор суставная жидкость плевральная

Образцы для проточной цитометрии

кровь
костный мозг
ликвор
суставная жидкость
плевральная жидкость
асцитическая жидкость
суспензированные клетки тканей

(например, опухолей)
Слайд 17

Пробоподготовка

Пробоподготовка

Слайд 18

Пробоподготовка 03/06/16

Пробоподготовка

03/06/16

Слайд 19

Пробоподготовка Отмывка буфером Лизис эритроцитов Отмывка 03/06/16 рррроооиС рСтабильность 24-48 часов при комнатной температуре

Пробоподготовка

Отмывка буфером
Лизис эритроцитов
Отмывка

03/06/16

рррроооиС

рСтабильность 24-48 часов при комнатной температуре

Слайд 20

Диагностические панели F FifhhhhFITC PE PER CP APC CD3 CD4 CD45

Диагностические панели

F

FifhhhhFITC PE PER CP APC

CD3 CD4 CD45 CD8

C CCD19

CD10 CD45 CD20

CCD34 CD13 CD45 CD15

CCD16 CD56 CD45 CD3

Слайд 21

Графики DOT PLOT 03/06/16

Графики DOT PLOT

03/06/16

Слайд 22

Компенсация

Компенсация

Слайд 23

Преимущества проточной цитометрии

Преимущества проточной цитометрии

Слайд 24

SSC vs CD45

SSC vs CD45

Слайд 25

Кластеры дифференцировки (CD) 03/06/16

Кластеры дифференцировки (CD)

03/06/16

Слайд 26

03/06/16

03/06/16

Слайд 27

Принципы диагностики гемопоэтических неоплазий Сопоставление с нормальными аналогами Определение аберрантного опухолевого иммунофенотипа 03/06/16

Принципы диагностики гемопоэтических неоплазий

Сопоставление с нормальными аналогами
Определение аберрантного опухолевого иммунофенотипа

03/06/16

Слайд 28

Основные типы аберрантности фенотипа лейкозных клеток Коэкспрессия антигенов нескольких клеточных линий.

Основные типы аберрантности фенотипа лейкозных клеток

Коэкспрессия антигенов нескольких клеточных линий.
Асинхронная экспрессия

антигена- одновременная экспрессия ранних и поздних антигенов, которые в норме находятся на разных этапах дифференцировки клеток.
Избыточная экспрессия антигена- плотность распределения антигена на лейкозной клетке больше, чем на нормальной клетке костного мозга.
Отсутствие или низкий уровень экспрессии антигена, характерного для данной стадии дифференцировки (потеря клеткой ряда поверхностных маркеров)
Фенотипический профиль, практически не встречающийся в норме.
Слайд 29

CD45 CD45 CD45 CD45 CD7 SSC SSC SSC SSC Выделение опухолевых клеток

CD45

CD45

CD45

CD45

CD7

SSC

SSC

SSC

SSC

Выделение опухолевых клеток

Слайд 30

Острые миелобластные лейкозы

Острые миелобластные лейкозы

Слайд 31

Слайд 32

Слайд 33

Диагностика морфологического варианта AML не является задачей иммунофенотипирования

Диагностика морфологического
варианта AML
не является задачей иммунофенотипирования

Слайд 34

ОМЛ с минимальной дифференцировкой бластов 3-5% всех ОМЛ Бласты неспецифические, больших/средних

ОМЛ с минимальной дифференцировкой бластов

3-5% всех ОМЛ
Бласты неспецифические, больших/средних размеров
липиды(-),

PAS(+)диффузный фон
+ CD117, CD34, CD38, cytMPO
+/- HLA-DR, CD13, CD33
Коэкспрессия в 50-70% TdT, CD7, CD2, CD4, CD10
Слайд 35

ОМЛ с минимальной дифференцировкой бластов 3-5% всех ОМЛ Бласты неспецифические, больших/средних

ОМЛ с минимальной дифференцировкой бластов

3-5% всех ОМЛ
Бласты неспецифические, больших/средних размеров
липиды(-),

PAS(+)диффузный фон
+ CD117, CD34, CD38, cytMPO
+/- HLA-DR, CD13, CD33
Коэкспрессия в 50-70% TdT, CD7, CD2, CD4, CD10
Слайд 36

ОМЛ острый миелобластный лейкоз без созревания 15% всех ОМЛ Бласты более

ОМЛ острый миелобластный лейкоз без созревания

15% всех ОМЛ
Бласты более полиморфны, наличие

азурофильной зернистости или п.Ауэра менее 10% клеток
МПО(+)>3%, липиды(+), α-эстераза(слабо+), PAS(+) в диффузной форме
+ СD33, CD13, CD117, CD65, cMPO, HLADR, CD38
+/- CD11b, CD15, CD34(менее выражена, чем у М0)
Коэкспрессия CD4
Слайд 37

ОМЛ острый миелобластный лейкоз с созреванием Бласты средних и крупных размеров,

ОМЛ острый миелобластный лейкоз с созреванием
Бласты средних и крупных размеров, наличие

азурофильной зернистости или п.Ауэра
МПО(+), липиды(+) α-эстераза(слабо+), PAS(+) в диффузной форме
+ СD33, CD13, CD117, CD65, cMPO, CD38
+/- 50-60% HLADR, CD34;
Возрастает экспрессия CD11b, CD15, CD65
Коэкспрессия CD2, CD7, CD10 (чаще, чем при М1)
Слайд 38

ОМЛ М3 острый промиелоцитарный лейкоз Гипергранулярный и гипогранулярный вариант (М3v) Бласты

ОМЛ М3 острый промиелоцитарный лейкоз

Гипергранулярный и гипогранулярный вариант (М3v)
Бласты средних размеров с

полиморфизмом ядер (лопастные, бобовидной формы), нет нуклеол, ЦП голубого цвета с обильной азурофильной зернистостью, п.Ауэра.
Бластов с зернистостью не менее 40% от общего числа бластов
МПО(+++), липиды(+),
α-эстераза(-)
+ СD33, CD13, CD117, CD65, cMPO, CD38
+/- CD34(низкий уровень экспрессии), CD11b,CD15
HLADR-
Коэкспрессия CD2
Слайд 39

ОМЛ острый миеломонобластный лейкоз 20% всех ОМЛ Две популяции бластов: миелобласты(М1

ОМЛ острый миеломонобластный лейкоз

20% всех ОМЛ
Две популяции бластов: миелобласты(М1 илиМ2) и

монобласты(М5а или М5b)
Монобласты: α-эстераза(+),ингибируется фторидом Na
+ СD33, CD13, CD117, CD65, cMPO, CD38; CD11b, CD11c, CD15,CD14, CD64, HLADR
+/- CD4(моноцитоидная направленность) , CD2+ коррелирует с М4эоз+ аномалии 16 хромосомы, CD34+/-
Слайд 40

ОМЛ острый монобластный лейкоз 10% всех ОМЛ М5a-без созревания, M5b- с

ОМЛ острый монобластный лейкоз

10% всех ОМЛ
М5a-без созревания, M5b- с созреванием
Морфологические критерии

монобластов
α-эстераза(+),ингибируется фторидом Na
+/- MPO, CD11b, CD11c, CD36, CD4, HLADR, CD33, CD65, CD14, CD64, CD13, CD15
+/- CD117, CD34(чаще негативны)
Слайд 41

ОМЛ острый эритромиелоз 5% всех ОМЛ Два типа бластов: эритроидные и

ОМЛ острый эритромиелоз

5% всех ОМЛ
Два типа бластов: эритроидные и миелоидные
Высокая

экспрессия GlyA++; CD71
HLADR+, CD38+, CD34+/-(преобладание ранних эритроидных предшественников БОЕ-Э)
Миелоидный компонент- CD13, CD33, MPO
Коэкспрессия CD7+/-
Слайд 42

ОМЛ острый мегакариобластный лейкоз 5% Бласты с гиперхромией ядерного хроматина, отростчатой,

ОМЛ острый мегакариобластный лейкоз

5%
Бласты с гиперхромией ядерного хроматина, отростчатой, резко базофильной

цитоплазмой
МПО(-), α-эстераза(слабо+), PAS в диффузной форме в отдельных клетках
+ CD41a, CD42b, CD61
+ миелоидные антигены CD13, CD33; CD117+/-
+/- линейно неограниченные антигены HLADR, CD38, CD34
Слайд 43

SSC CD45 CD33 CD61 CD13 CD34 CD42a CD7 CD117 Острый миелоидный лейкоз при синдроме Дауна

SSC

CD45

CD33

CD61

CD13

CD34

CD42a

CD7

CD117

Острый миелоидный лейкоз при синдроме Дауна

Слайд 44

Острые лимфобластные лейкозы

Острые лимфобластные лейкозы

Слайд 45

Слайд 46

В-линейные острые лимфобластные лейкозы (EGIL)

В-линейные острые лимфобластные лейкозы (EGIL)

Слайд 47

В-линейные острые лимфобластные лейкозы Pro-B (BI) Common B (BII) pre-pre-B Pre-B (BIII) B-ALL (BIV)

В-линейные острые лимфобластные лейкозы

Pro-B (BI)

Common B
(BII) pre-pre-B

Pre-B (BIII)

B-ALL (BIV)

Слайд 48

FSC SSC CD19 SSC CD45 SSC TdT CD79a CD10 CD10 CD20

FSC

SSC

CD19

SSC

CD45

SSC

TdT

CD79a

CD10

CD10

CD20

CD45

CD34

CD58

CD10

Kappa

Lambda

Kappa cyt

Lambda cyt

μ cyt

μ cyt

Слайд 49

В-II OЛЛ

В-II OЛЛ

Слайд 50

FSC SSC SSC SSC SSC SSC CD19 CD45 CD79a CD22 SSC

FSC

SSC

SSC

SSC

SSC

SSC

CD19

CD45

CD79a

CD22

SSC

SSC

SSC

SSC

TdT

CD33

CD13

MPO

CD10

CD10

CD10

CD10

CD10

CD34

CD34

CD34

CD34

CD34

CD34

CD34

CD45

CD45

CD45

CD20

CD20

CD20

CD22

CD22

CD58

CD58

Слайд 51

Диагноз: BI/BII-ALL, CD13+CD33+

Диагноз: BI/BII-ALL, CD13+CD33+

Слайд 52

T-линейные острые лимфобластные лейкозы

T-линейные острые лимфобластные лейкозы

Слайд 53

Слайд 54

T-линейные острые лимфобластные лейкозы

T-линейные острые лимфобластные лейкозы

Слайд 55

SSC Пациент C. FSC CD19 CD7 CD33 CD22 CD13 CD2 CD5

SSC

Пациент C.

FSC

CD19

CD7

CD33

CD22

CD13

CD2

CD5

CD1a

CD4

CD8

CD99

CD3 cyt

CD3

CD45

Слайд 56

Диагноз: TIII-ALL

Диагноз: TIII-ALL

Слайд 57

SSC CD45 FSC CD19 CD7 CD33 CD22 CD13 CD34 CD99 CD117

SSC

CD45

FSC

CD19

CD7

CD33

CD22

CD13

CD34

CD99

CD117

CD2

CD5

CD1a

CD4

CD8

TdT

CD3

TCRαβ

TCRγδ

Пациент Н.

Слайд 58

Диагноз: TIV-ALL, CD33+

Диагноз: TIV-ALL, CD33+

Слайд 59

Определение линейной принадлежности опухолевых клеток (ВОЗ, 2008) Миелоидная линия Миелопероксидаза, определенная

Определение линейной принадлежности опухолевых клеток (ВОЗ, 2008)

Миелоидная линия
Миелопероксидаза, определенная любым методом
или
Не

менее двух моноцитарных антигенов (НСЭ, CD11c, CD64, CD14, лизоцим)
Т-линия
Цитоплазматическая экспрессия CD3, определенная методом проточной цитометрии с использованием антител к ε цепи рецептора
или
Мембранная экспрессия CD3
В-линия
Яркая экспрессия CD19 и как минимум одного из следующих антигенов: CD10, cytCD22, cytCD79a
или
Слабая экспрессия CD19 и яркая экспрессия как минимум одного из следующих антигенов: CD10, cytCD22, cytCD79a
Слайд 60

Острый бифенотипический лейкоз EGIL

Острый бифенотипический лейкоз EGIL

Слайд 61

Острый бифенотипический лейкоз Диагноз выставляется при сумме баллов больше 2 для

Острый бифенотипический лейкоз

Диагноз выставляется при сумме баллов больше 2 для миелоидной

и одной из лимфоидных линий
Слайд 62

Хронические лимфопролиферативные заболевания

Хронические лимфопролиферативные заболевания

Слайд 63

Слайд 64

03/06/16

03/06/16

Слайд 65

Дифференциальная диагностика ХЛПЗ методом проточной цитометрии CD19+ CD19+CD5+ CD19+CD5- ХЛЛ CD19+CD5+CD23+ Лимфома зоны мантии CD19+CD5+CD23-

Дифференциальная диагностика ХЛПЗ методом проточной цитометрии


CD19+

CD19+CD5+

CD19+CD5-

ХЛЛ
CD19+CD5+CD23+

Лимфома зоны мантии
CD19+CD5+CD23-

Слайд 66

СD 19

СD 19

Слайд 67

Слайд 68

Слайд 69

Слайд 70

Типичный иммунофенотип ХЛЛ и случаи с атипичным иммунофенотипом CD19+ CD5+ CD20dim+

Типичный иммунофенотип ХЛЛ и случаи с атипичным иммунофенотипом

CD19+ CD5+ CD20dim+ CD23+

CD22+/- СD79b+/- CD43+ CD200+ sIgM dim
Атипичные варианты CD 5dim CD20bright+ CD23+/- CD22bright СD79bright CD43- дифференциальная диагностика с лимфомой зоны мантии, лимфомой маргинальной зоны, лимфоплазмоцитарной лимфомой
Слайд 71

Лимфома зоны мантии Типичный иммунофенотип CD19CD19+ CD5+ CD20bright+ CD23- CD22bright+ СD79b++

Лимфома зоны мантии

Типичный иммунофенотип

CD19CD19+ CD5+ CD20bright+ CD23- CD22bright+ СD79b++ CD43- CD200-


Атипичные варианты: CD 5dim CD23+/- -дифференциальная диагностика с ХЛЛ, лимфомой маргинальной зоны, лимфоплазмоцитарной лимфомой
Слайд 72

Дифференциальный диагноз атипичных случаев CD19+CD5+CD23+/- ХЛЛ CD200+ Лимфома зоны мантии CD200-

Дифференциальный диагноз атипичных случаев

CD19+CD5+CD23+/-

ХЛЛ CD200+

Лимфома зоны мантии CD200-

Слайд 73

Лимфома зоны мантии Необходимо цитогенетическое и/или иммунногистохимическое подстверждение Транслокация t (11;14)

Лимфома зоны мантии

Необходимо цитогенетическое и/или иммунногистохимическое подстверждение
Транслокация t (11;14) определяется в

цитогенетической лаборатории методом FISH
Экспрессия циклина D1 (иммуногистохимия)
Слайд 74

Дифференциальная диагностика CD19+CD5- лимфом CD19+CD5- CD19+CD10+ CD19+CD10- Фолликулярная лимфома Диффузная B-крупноклеточная

Дифференциальная диагностика CD19+CD5- лимфом

CD19+CD5-

CD19+CD10+

CD19+CD10-

Фолликулярная лимфома

Диффузная B-крупноклеточная лимфома

Лимфома маргинальной зоны,
лимфоплазмоцитарная лимфома

CD25+ CD103+CD305+

(LAIR1) –волосато-клеточный лейкоз
Слайд 75

Дифференциальная диагностика Волосато-клеточный лейкоз – морфология, иммуннофенотипирование, цитохимия –тартрат-резистентная кислая фосфатаза,

Дифференциальная диагностика

Волосато-клеточный лейкоз – морфология, иммуннофенотипирование, цитохимия –тартрат-резистентная кислая фосфатаза, мутации BRAF V600E,

MAP2K1
Лимфоплазмоцитарная лимфома, макроглобулинемия Вальденстрема– морфология, иммуннофенотипирование, секреция IgM (парапротеинемия) мутацияMYD88 L265P 
Фолликулярная лимфома – иммунофенотирование ,транслокация t (14:18)
Лимфома маргинальной зоны – иммуннофенотипирование,иммунногистохимическое исследование
Слайд 76

Слайд 77

Множественная миелома CD38bright CD138+ CD45+, small subset CD45low or negative CD19-,

Множественная миелома

CD38bright
CD138+
CD45+, small subset CD45low or negative
CD19-, CD20-, CD22-
CD79a+/-, CD56+/-
CD117+/-
sIg++

Слайд 78

*Provisional entities # change from 2008 Mature T- and NK-cell Neoplasms

*Provisional entities
# change from 2008

Mature T- and NK-cell Neoplasms
WHO classification

2016

LPD: lymphoproliferative disorder; TFH: T follicular helper

Слайд 79

Слайд 80

Слайд 81

Пример 4 Популяция лимфоцитов SSClow CD45bright Лимфоциты представлены (>76%) Т-лимфоцитами с

Пример 4

Популяция лимфоцитов SSClow CD45bright

Лимфоциты представлены (>76%) Т-лимфоцитами с аберрантным иммунофенотипом

:
CD45+bright CD3+ CD2+ CD8+ CD5+dim CD57 + TCR αβ+
Слайд 82

Минимальная остаточная болезнь (minimal residual disease) – состояние, обусловливающее развитие рецидива

Минимальная остаточная болезнь (minimal residual disease) – состояние, обусловливающее развитие рецидива

и связанное с сохранением опухолевых клеток в крайне низких концентрациях, ниже предела чувствительности морфологических методов
Слайд 83

Основные методы мониторинга МОБ Количественная полимеразная цепная реакция Определение химерного гена

Основные методы мониторинга МОБ

Количественная полимеразная цепная реакция
Определение химерного гена
Определение химерного транскрипта
Определение

клональных перестроек генов тяжелых цепей ИГ и ТкР
Многоцветная проточная цитометрия
Слайд 84

Проточная цитометрия Преимущества Воспроизводимость исследования Применимость (>95% ОЛЛ) Относительно низкая стоимость

Проточная цитометрия

Преимущества
Воспроизводимость исследования
Применимость (>95% ОЛЛ)
Относительно низкая стоимость
Относительно короткое время выполнения
Дополнительная

информация об опухолевых и нормальных клетках
Недостатки
Низкая чувствительность 3-4-цветной проточной цитометрии
Сложность применения >6-цветной проточной цитометрии
Слайд 85

Определение МОБ при ХЛЛ методом проточной цитометрии Кровь или костный мозг?

Определение МОБ при ХЛЛ методом проточной цитометрии

Кровь или костный мозг?
Определение

клональности – CD19+ CD5+ каппа/лямбда – самый дешевый и быстрый метод. Недостатки – ложноположительные результаты, трудности определения рестрикции легких цепей на малых популяциях. Чувствительность – 1%
Слайд 86

Стандартизованные методы Принцип- выделение аберрантной популяции по наиболее чувствительным и специфичным

Стандартизованные методы

Принцип- выделение аберрантной популяции по наиболее чувствительным и специфичным маркерам
International

standardized approach for flow cytometric residual disease monitoring in chronic lymphocytic leukaemia AC Rawstron et al 2007
CD19,CD5,CD20,CD22,CD43,CD38,СD79b,CD81,каппа,ламбда
Слайд 87

http://www.ericll.org http://www.cll-mrd.org

http://www.ericll.org
http://www.cll-mrd.org

Слайд 88

Чувствительность и лимит детекции 1 клетка на 10 000 клеток или

Чувствительность и лимит детекции

1 клетка на 10 000 клеток или 0.01%

(1 клетка на 100 -1%)
Лимитом детекции (LOD) считается обнаружение хотя бы 20 ХЛЛ-событий
То есть чтобы получить LOD=0,01% надо проанализировать
200 000 лейкоцитов
Лимитом количественного определения(LOQ) считается обнаружение хотя бы 50 ХЛЛ событий.
Чтобы получить LOQ=0,01% надо проанализировать 500 000 лейкоцитов
Слайд 89

Стандартная форма ответа по определению МОБ методом проточной цитометрии Общее количество

Стандартная форма ответа по определению МОБ методом проточной цитометрии

Общее количество проанализированных

лейкоцитов
% В-лимфоцитов от всех лейкоцитов
% ХЛЛ-лимфоцитов от всех лейкоцитов
Лимит детекции, лимит количественного определения
Например: Проанализировано 685 315 лейкоцитов
B-лимфоциты -1.3% от всех лейкоцитов
ХЛЛ- клетки – 0.08% от всех лейкоцитов
LOD= 20/685315 *100=0,029%
LOQ = 50/685315 *100=0,073%
Обнаружена МОБ при ХЛЛ
Слайд 90

Определение МОБ при острых лейкозах 03/06/16

Определение МОБ при острых лейкозах

03/06/16

Слайд 91

Определение лейкоз-ассоциированного иммунофенотипа Выявление иммунофенотипа, определенного при диагностике Метод «пустых мест» Сравнение иммунофенотипа с базами данных

Определение лейкоз-ассоциированного
иммунофенотипа

Выявление иммунофенотипа,
определенного при диагностике

Метод «пустых мест»

Сравнение иммунофенотипа
с базами

данных
Слайд 92

CD10 BCP 1 BCP 2 BCP 3 Зрелые В-лимфоциты Нормальное созревание

CD10

BCP 1

BCP 2

BCP 3

Зрелые
В-лимфоциты

Нормальное созревание В-лимфоцитов

CD20

CD45

CD34

TdT

CD99

CD38

CD11a

CD44

CD58

Слайд 93

CD20 CD20 CD10 CD10 CD10 CD10 CD34 CD34 Нормальный КМ Восстанавливающийся КМ Особенности регенерирующего костного мозга

CD20

CD20

CD10

CD10

CD10

CD10

CD34

CD34

Нормальный КМ

Восстанавливающийся КМ

Особенности регенерирующего костного мозга

Слайд 94

CD10 CD20

CD10

CD20

Слайд 95

CD10 CD45 CD20 CD58 CD19 День 0 День 15 День 36 Пациент С. 0,302% 0,006%

CD10

CD45

CD20

CD58

CD19

День 0

День 15

День 36

Пациент С.

0,302%

0,006%

Слайд 96

Диагностика ПНГ методом проточной цитометрии

Диагностика ПНГ методом проточной цитометрии

Слайд 97

Образец заключения по ПНГ Тип биоматериала Периферическая кровь Лейкоциты 3.22 109/л

Образец заключения по ПНГ

Тип биоматериала Периферическая кровь Лейкоциты 3.22 109/л
По данным

проточной цитометрии картина крови представлена
Гранулоциты 40.53 % Моноциты 9.64 % Лимфоциты 42.31 %
Процент от гранулоцитов FLAER-/CD24- 12.990 %
Процент от моноцитовFLAER-/CD14- 13.230 %
ПНГ клон от эритроцитов:
Нормальные эритроциты 96.35 %
Клон тип II (частичная потеря GPI) 0.60 %
Клон тип III (полная потеря GPI) 3.05 %
Суммарный ПНГ клон эритроцитов 3.65 %
Заключение: По данным проточной цитометрии выявлен ПНГ-клон.

03/06/16

Слайд 98

Стандартизация метода определения количества ГСК в трансплантате с международным протоколом ISHAGE

Стандартизация метода определения количества ГСК в трансплантате с международным протоколом ISHAGE
Пример

: пациентка А, клеточный концентрат периферической крови после афереза
-Вес пациента-90 кг
-Вес био.мат-ла- 150г
-Кол-во ЯСК в литре- 243,4*109/л
-Кол-во ЯСК в дозе- 36,5*109
-Нежизнеспособные кл.(7AAD)- 1.3*109
-Жизнеспособные мононуклеары % от жив.ЯСК- 87,92%
-Абсолют.кол-во жизнеспособных мононуклеаров- 30,94 *109
-CD34+CD45+ от жиз.ЯСК- 0,88%
-CD34+CD45+ от жиз.мононукл.- 0,99%
-Абс.кол-во CD34+CD45+ - 308 *109
-Абс.кол-во CD34+CD45+ на 1кг веса реципиента- 3,42 *109
- Предыдущая
Александр Сергеевич Пушкин (1799 – 1837). Баллада Песнь о вещем Олеге
Следующая -
Алгоритм построения изометрической проекции детали по чертежу

Похожие презентации

Инфекцияның таралу жолдары
Язвенный гингивит
Спаечная непроходимость кишечника. Оценка эффективности противоспаечной терапии
Социально-психологические условия формирования девиантного поведения школьников
Стандарты наблюдения здорового ребенка: международный опыт
Профилактика гриппа и других ОРВИ, менингококковой инфекции
Некардиогенная торакалгия
Наркотики та їх вплив
Уход за ушами
Иммунопрофилактика
Гемофилия
Общие вопросы онкологии
СРС: Қазақстанда тағамдық уланудың таралуы
Хромосомные мутации
Липидограмма крови
Мышцы тазового пояса и свободной нижней конечности. Поверхностная группа мышц, формирующих рельеф конечности
Психотропные лекарственные средства
Возрастные особенности дыхательной системы
Коммуникативные кризисы и факторы организационного стресса
От социальной гигиены к общественному здоровью
Как информационные технологии помогают в подборе и контроле терапии гемофилии А
Обеспечение профилактика развития сердечно-сосудистых заболеваний и сердечно-сосудистых осложнений
Лекарственные травы Оренбуржья
Руководство для ведения пациентов с острым коронарным синдромом с подъемом сегмента ST
Принципы системы оздоровления
Первая помощь при кровотечениях. Виды кровотечений
История оториноларингологии. Анатомия и физиология слухового анализатора
Классификация заболеваний слизистой оболочки полости рта
Вы можете прислать нам Вашу презентацию и мы опубликуем ее на сайте.
Обратная связь
Для правообладателей
Email: Нажмите что бы посмотреть