Содержание
- 2. Реакции иммунитета – реакции между АГ и АТ или между АГ и сенсибилизированными лимфоцитами Происходят в
- 3. Особенности: Высокочувствительны (улавливают АГ в малых количествах) Строго специфичны (позволяют отличить близкие по составу АГ) Широко
- 4. Серологические (гуморальные) реакции – р-ции АГ+АТ (АТ всегда находятся в жидкой среде, сыворотке) Serum - сыворотка
- 5. Взаимодействие АГ-АТ основано на принципе взаимного узнавания, обусловленного их комплементарностью (избирательной «прилипаемостью» молекул)
- 6. Способы достижения комплементарности конформационная (пространственная) комплементарность - соответствие поверхностей выступ-углубление АГ АТ
- 7. Способы достижения комплементарности Электростатическая комплементарность – достигается противоположными электрическими зарядами: против «+» заряда располагается «-» в
- 8. Способы достижения комплементарности Комбинация электростатической и конформационной (пространственной) комплементарности АГ АТ + - + - -
- 9. типы ИР (иммунологических реакций) Агглютинации Преципитации Лизиса Опсонизации Нейтрализации Связывания комплемента Соответственно каждому из феноменов in
- 10. компоненты серологических реакций
- 11. Участники феномена взаимодействия (АГ+АТ): Молекулы АГ, участвующих в РА и РП – поливалентны АТ – двухвалентны
- 12. Возникновение в серологических р-ях крупных агрегатов, видимых невооруженным глазом, объясняется т. сети (т. образования сетевых структур)
- 13. Фазы серологических р-ций (р-ций взаимодействия между АГ и АТ): 1-я фаза – специфическая – адсорбция АТ
- 14. 2-я фаза – неспецифическая – комплекс АГ+АТ взаимодействует с неспецифическими факторами среды, в которой идет р-ция,
- 15. Х-р видимой фазы зависит от состояния АГ и условий среды, в которой происходит его взаимодействие с
- 16. Применение серологических р-ий Для серодиагностики (выявление АТ в сыворотке б-ого) Для серотипирования (идентификации) – определение вида
- 17. Применение серологических реакций
- 18. Приготовление иммунной (диагностической) сыворотки: Получают из крови людей или животных, иммунизированных по схеме соответствующим АГ (вакциной)
- 19. иммунные сыворотки Нативные (неадсорбированные) адсорбированные
- 20. Недостаток нативных сыв-к: Наличие в них групповых АТ (АТ к МКО, имеющим общие АГ) такие АГ
- 21. Адсорбированные сыв-ки – строго специфичны (реагируют только с гомологичным АГ) АТ к другим (гетерогенным) АГ удалены
- 22. Моноклональные АТ синтезированы к одному классу, подклассу, аллотипу, имеют один вид легких цепей, однозначную аффинность (можно
- 23. Гибридомы – клетки, вырабатывающие in vitro моноклональные АТ (каждая популяция АТ синтезируется одним клоном, т.е. отдельной
- 24. Реакция агглютинации (РА) – склеивание и выпадение в осадок микробов или других клеток под действием АТ
- 25. Постановка реакции: РА на стекле (ориентировочная) РА развернутая (в пробирках)
- 26. РА на стекле
- 27. РА развернутая
- 28. РА развернутая Титр агглютинирующей сыв-ки – ее максимальное разведение, в котором она агглютинирует гомологичные клетки Учет
- 29. Агглютинация: Мелкозернистая (О-агглютинация – при работе с АТ к О-соматическому АГ) Хлопьевидная (Н-агглютинация) наступает быстрее, образующийся
- 30. Титр сыворотки б-го сравнивают с диагностическим («законодательным») титром Если равен или выше – заболевание, ниже –
- 31. Реакция гемагглютинации (по механизму действия): РГА – серологическая (Er агглютинируются с АТ (гемагглютининами) РГА – несерологическая,
- 32. Реакция непрямой гемагглютинации (РНГА, РПГА) Er, с адсорбированным на поверхности растворимым АГ, приобретают способность агглютинироваться при
- 33. Реакция непрямой гемагглютинации (РНГА, РПГА)
- 34. Реакция преципитации (РП) – выпадение в осадок специфического иммунного комплекса, состоящего из растворимого АГ (лизат, экстракт,
- 35. Основные методы постановки РП: Р. кольцепреципитации РП в агаре (геле): - радиальная иммунодиффузия (по Манчини) -
- 36. радиальная иммунодиффузия (по Манчини) : АГ, диффундируя в гель, образует с антителами кольцевые зоны преципитации вокруг
- 37. Экспресс-диагностика сифилиса (ЭДС). Реакция микропреципитации на примере экспресс-диагностики сифилиса (ЭДС) реакция выполняется для скрининга сывороток при
- 38. Иммуноэлектрофорез - сочетание метода электрофореза и иммунопреципитации: смесь антигенов вносится в лунки геля и разделяется в
- 39. Реакции лизиса (иммунный цитолиз) – растворение клеток под воздействием АТ при участии комплемента. Для реакции необходимы
- 40. РСК применяют для идентификации АГ в серодиагностике (напр. р. Вассермана) участвуют: С′ две системы АГ+АТ: основная
- 41. Отсутствие гемолиза регистрируют как «+» результат РСК
- 42. Реакция иммунофлюоресценции - РИФ (метод Кунса) - метод экспресс-диагностики для выявления антигенов микробов или определения антител
- 43. Непрямой метод РИФ - выявление комплекса антиген - антитело с помощью антиглобулиновой (против антитела) сыворотки, меченной
- 44. РИФ (ПИФ) РНИФ (НИФ) высокая специфичность, чувствительность, положительна на 3—4-й неделе после заражения сифилисом
- 45. Радиоиммунный метод (РИА) - основан на реакции антиген - антитело с применением антигенов или антител, меченных
- 46. После взаимодействия АГ с АТ отделяют образовавшийся радиоактивный иммунный комплекс и определяют его радиоактивность в соответствующем
- 47. твердофазный РИА – меченные АГ или АТ, сорбированные в лунках полистироловых панелей
- 48. Иммуноферментный анализ (ИФА) - выявление АГ с помощью соответствующего АТ, конъюгированного с ферментом-меткой (пероксидазой хрена, бета-галактозидазной
- 49. ИФА После соединения антигена с меченой ферментом иммунной сывороткой в смесь добавляют субстрат/хромоген Субстрат расщепляется ферментом
- 50. Твердофазный ИФА - вариант теста, когда один из компонентов иммунной -реакции (антиген или антитело ) сорбирован
- 51. Конкурентный ИФА для определения антигенов: искомый антиген(1) и меченый ферментом антиген(2) конкурируют друг с другом за
- 52. Иммуноблоттинг (син. вестернблоттинг) - высокочувствительный метод выявления белков, основанный на сочетании электрофореза и ИФА Антигены возбудителя
- 53. Метод переноса пятен ДНК первоначально разработал Сазен (Southern) - фамилия означает ЮЖНЫЙ; метод получил название сазенблоттинг
- 54. Иммунная электронная микроскопия (ИЭМ)- электронная микроскопия микробов, чаще вирусов, обработанных соответствующими антителами Вирусы, обработанные иммунной сывороткой,
- 55. Реакция иммунного прилипания (РИП) основана на активации системы комплемента корпускулярными антигенами (бактериями, вирусами), обработанными иммунной сывороткой
- 56. (Препаратмикроскопия ультратонкого среза стафилококка, инкубированного с сывороткой и форменными элементами крови. Иммунное прилипание стафилококков к эритроциту
- 57. АТ иммунной сыворотки способны нейтрализовать повреждающее действие микробов или их токсинов на чувствительные клетки и ткани,
- 58. Реакцию нейтрализации (РН) проводят путем введения смеси антиген - антитело животным или в чувствительные тест-объекты (культуру
- 59. При отсутствии у животных и тест-объектов повреждающего действия микроорганизмов или их антигенов, токсинов говорят о нейтрализующем
- 60. Реакция нейтрализации вирусов в культуре клеток: А - цитопатогенный эффект (ЦПЭ) в результате размножения вирусов; Б
- 61. Благодарю за внимание
- 62. Реакция флоккуляции (по Рамону) ( лат . f1оecus - хлопья шерсти) - появление опалесценции или хлопьевидной
- 63. Антиген Качества антигена иммуногенность чужеродность антигенность специфичность
- 64. Реакция коагглютинации - для определения антигенов с помощью антител, адсорбированных на белке А клеток стафилококка (антительный
- 66. Скачать презентацию