Культивирование бактерий и изучение куртуральных свойств

Содержание

Слайд 2

Содержание : Культивирование бактерий. Выделение чистой культуры бактерий .Культуральные и биохимические

Содержание :

Культивирование бактерий.
Выделение чистой культуры бактерий .Культуральные и биохимические свойства бактерий,

их значение для дифференциации бактерий.
Способы посева микроорганизма.
Методы культивирования.
Методы выделений чистых культур микроорганизмов.
Культуральные свойства.
Ферментативная активность.
Сохранение культур.
Особенности культивирования риккетсий и хламидий.Культивирование анаэробов.
Слайд 3

Культивирование бактерий Микроорганизмы культивируют на искусственных питательных средах. В зависимости от

Культивирование бактерий

Микроорганизмы культивируют на искусственных питательных средах. В зависимости от

пищевых потребностей того или другого вида питательные среды должны содержать соответствующие исходные вещества, необходимые для пластического метаболизма.Условия культивирования зависят от свойств микроорганизмов. Большинство патогенных микроорганизмов выращивают на питательных средах при температуре 37С в течение 1-2 суток,они должны быть стерильными ,иметь оптимальное значение pH, осмотическое давление, окислительно-восстановительный потенциал.
Различают среды:
1)По консистенции- жидкие, полужидкие и плотные.
2)По составу- простые и сложные.
3)По источнику – естественные и синтетические(искусственные)
4)По назначению – основные, универсальные, специальные ,элективные, дифференциально-диагностические ,транспортные ,обогащенные, индикаторные.
Слайд 4

Выделение чистой культуры бактерий. Культуральные и биохимические свойства бактерий, их значение

Выделение чистой культуры бактерий. Культуральные и биохимические свойства бактерий, их значение

для дифференциации бактерий.

Чистую культуру можно получить из единичной клетки или отдельной колонии. Клетку извлекают микропипеткой или микропетлей под микроскопическим контролем и переносят сосуд со средой.
Другим способом является изготовление серии препаратов «Висячая капля»из сильно разведенной суспензии.

Слайд 5

Способы посева микроорганизмов. Пробирку с посевным материалом и пробирку со средой

Способы посева микроорганизмов.

Пробирку с посевным материалом и пробирку со средой держат

слегка наклонно в левой руке между большим и указательным пальцами, так, чтобы края пробирок были на одном уровне ,а их основания находились поверх кости. В правой руке держат бактериальную петлю и стерилизуют ее над пламенем горелки. Вынимают обе пробирки одновременно. Края пробирок обжигают над пламенем горелок. Прокаленную петлю вводят через пламя горелки в пробирку с посевныи материалом, охлаждают и ,набрав немного материала ,осторожно переносят в пробирку со средой .При посеве в жидкую среду посевной материал растирают на стенке пробирки над жидкостью и смывают средой.

Изучив характер роста культуры на чашке, со стороны дна отмечают восковым карандашом нужный для посева участка. Чашку с посевным материалом ставят перед собой крышкой вверх. Левой рукой прикрывают крышкой и вводят под нее обожженную петлю. Остудив петлю, набирают посевной материал с отмеченного участка. Вынимают петлю ,закрывают чашку и в левую руку берут пробирку со средой. Посев производят так же , как с пробирки в пробирку. После посева чашку переворачивают вверх дном.

Слайд 6

Методы культивирования Для успешного культивирования необходимы оптимальные условия : температура ,

Методы культивирования

Для успешного культивирования необходимы оптимальные условия : температура ,

влажность , аэрация (снабжение воздухом).
Температура – создают в термостате 37 С.
Влажность- питательные вещества проникают в клетку только в растворенном виде.
Сроки культивирования – большинство патогенных микробов культивируют в течении 18-24 часов ,но есть виды, растущие медленно ( до 4-6 недель).
Аэрация – потребность микробов в свободном кислороде.
Пассивная аэрация – культивирование на плотных и жидких средах в сосудах ,закрытых ватным тампоном или в чашках Петри.
Активную аэрацию применяют в глубинном культивировании микробов, когда их выращивают в больших обьемах.
Слайд 7

Методы выделения чистых культур микроорганизмов. 1) Рассев петлей ( посев штрихами)

Методы выделения чистых культур микроорганизмов.

1) Рассев петлей ( посев штрихами)
2)

Бактериостатический метод ( метод ингибирования)
Слайд 8

Культуральные свойства Разные виды м/о по- разному растут на средах :

Культуральные свойства

Разные виды м/о по- разному растут на средах

: одни хорошо растут на простых средах ,другие – только на специальных. М/о могут давать пышный рост или скудный . Культуры могут быть бесцветными, сероватыми, серо-голубыми. На плотных средах м/о образуют сплошной налет или изолированные колонии. В полужидких средах м/о вызывают помутнение толщи среды. В жидких м/о образуют равномерную муть , дают осадок на пленку.
Слайд 9

Ферментативная активность По ней можно установить видовую и типовую принадлежность, определить

Ферментативная активность

По ней можно установить видовую и типовую принадлежность, определить

его варианты ( биовары).
Протеолетические свойства ( способность расщеплять белки, полипептиды) изучают на средах с желатином, молоком, сывороткой , пептоном.
Гемолитические свойства ( способность разрушать эритроциты) изучают на средах с кровью. Жидкие среды становятся прозрачными ,а на плотных средах вокруг колонии появляется прозрачная зона.
Слайд 10

Сохранение культур Длительное сохранение культур – лиофилизация – высушивание в ваккуме

Сохранение культур

Длительное сохранение культур – лиофилизация – высушивание в ваккуме

из замороженного состояния позволяет создать состояния анабиоза. Высушивание проводят в специальных аппаратах.
Хранят культуры при 4 С , лучше при -30 С …+70С.
Длительно сохранять культуры можно также в жидком азоте (-196 С) в специальных приборах.
Методы непродолжительного состояния культур следующие :
1) Субкультивирование;
2) сохранение под слоем масла ;
3) хранение при – 20 ..+70С.