Модуляция поведения экспериментальных животных после трансплантации иммунокомпетентных клеток, обработанных аминазином

возраст 3 месяца; с высоким уровнем двигательной активности в тесте «открытое поле».
Двигательная активность животных при выборе животных для эксперимента и после трансплантации ИКК оценивалась в тесте «открытое поле» (Буреш Я., с соавт., 1991).
Обработка и трансплантация клеток. Выделенные спленоциты обрабатывали in vitro аминазином из расчета 15х10 6 клеток / 150 мкг препарата в течение 25 минут. Концентрация препарата, применяемая для обработки клеток, определялась путем перерасчета терапевтической дозы, с учетом веса и особенностей метаболизма животных.
Затем, после 3-кратного отмывания, прекультивированные с аминазином спленоциты внутривенно вводили мышам-реципиентам в концентрации 15х10 6 клеток в объеме 0,3 мл физиологического раствора на одно животное. В контрольной группе животных подготовка и трансплантация спленоцитов проводилась в аналогичных условиях эксперимента, за исключением того, что последние культивировались без присутствия аминазина.
Исследование пролиферативной активности клеток после обработки in vitro аминазином оценивали стандартным методом по включению в нуклеопротеидные фракции клеток радиоактивной метки (Н3-тимидин). Результаты представляли в виде среднего счета в имп/мин.
Содержание цитокинов в лизатах головного мозга мышей-реципиентов после трансплантации спленоцитов оценивали методом ИФА (ELISA) с использованием специфических компонентов к цитокинам мыши производства фирмы “R&D Systems” (Великобритания). Принцип анализа «sandwich» - вариант твердофазного трехстадийного иммуноферментного анализа на планшетах (моноклональные антитела на подложке, конъюгат поликлональных антител с биотином) по технологии, разработанной в ЗАО “Вектор-Бест” для определения цитокинов. Чувствительность наборов для ИЛ-1β и ИЛ-4  не превышает 5 пг/мл, для ИЛ-6 и ИНФ-γ -2 пг/мл, для ФНОα -1 пг/мл.
Определение количества антителообразующих клеток в селезенке мышей. Способность мышей к иммунному ответу на эритроциты барана (ЭБ) оценивали на 5-е сутки после внутрибрюшинной иммунизации ЭБ по количеству локальных зон гемолиза в полужидкой среде модифицированным методом A.J. Cunningham (Cunningham A.J. 1965).
Определение высоты реакции гиперчувствительности замедленного типа. Мышей иммунизировали внутрибрюшинным введением эритроцитов барана (0,5% - 0,5 мл.). Разрешающую дозу указанного антигена (50% - 0,05 мл.) вводили под апоневроз задней стопы через 96 часов. Формирование реакции ГЗТ оценивали через 24 часа после разрешающей инъекции по степени опухания лапы (изменения её толщины по сравнению с позитивно-контрольной задней лапой того же животного, в которую была введена среда RPMI - 1640). Индекс реакции (ИР) определяли для каждой мыши по формуле ИР = (Ро – Рк) / Рк и выражали в процентах (Yoshikai Y., et al, 1979).
Статистическая обработка результатов. Статистическую обработку результатов исследований проводили с использованием t-критерия Стьюдента (при нормальном распределении изучаемого признака) и парного критерия Манна-Уитни в случае отклонения от нормального распределения (компьютерная программа "Statistica 6.0"); различия между группами считались достоверными при уровне значимости p < 0,05.

Цель: исследование возможности получения нейролептического эффекта у экспериментальных
животных путем трансплантации иммунокомпетентных клеток, .функциональная активность которых
была экстракорпорально изменена обработкой препаратом фенотиазинового ряда - аминазином.

< 0,01 между контрольной и опытной группами животных

спленоцитов, обработанных in vitro аминазином
(M ± SD)

Примечание: * - p < 0,01 между контрольной и опытной группами животных

иммунокомпетентных клеток, обработанных in vitro аминазином

трансплантации клеток, обработанных in vitro аминазином (M±SD).

Примечание* - p < 0,05; ** - p < 0,01 между соответствующими показателями в контрольной и опытной группах животных

в снижении пролиферативной активности клеток.
Трансплантация клеток селезенки, экстракорпорально обработанных аминазином, сопровождается у реципиентов снижением двигательной активности на фоне повышения содержания в головном мозге цитокинов ФНОα, Ил-1,Ил-6.
Трансплантация спленоцитов, обработанных экстракорпорально аминазином, вызывает у реципиентов снижение интенсивности гуморального и клеточного иммунного ответа.