Соматический эмбриогенез и его регуляция

Содержание

Слайд 2

Соматический эмбриогенез - это процесс формирования эмбрионов из клеток соматических тканей.

Соматический эмбриогенез - это процесс формирования эмбрионов из клеток соматических тканей.

Другой

вариант определения:
- это процесс, при котором незиготические клетки формируют эмбрионы, которые проходят через характерные стадии эмбрионального развития, в конечном счёте формируя новое растение (Chen et al., 2009).

Plants only

Слайд 3

Соматический эмбриогенез в природе Kalanchoe daigremontiana Garcês et al., 2009 Taylor, 1967 http://www.pharmanatur.com/France/HAMMARBYA%20PALUDOSA%201.htm Malaxis paludosa http://www.saskwildflower.ca/nat_Malaxis%20paludosa.html

Соматический эмбриогенез в природе

Kalanchoe daigremontiana

Garcês et al., 2009

Taylor, 1967

http://www.pharmanatur.com/France/HAMMARBYA%20PALUDOSA%201.htm

Malaxis paludosa

http://www.saskwildflower.ca/nat_Malaxis%20paludosa.html

Слайд 4

Tolmiea menziesii (piggyback plant) https://wyeastblog.org/2011/11/13/piggyback-plant/ Yarbrough, 1936 http://qrius.si.edu/browse/object/10980436#.WBUtCslZtDs http://www.missouriplants.com/Ferns/Asplenium_rhizophyllum_page.html Camptosorus rhizophyllus

Tolmiea menziesii (piggyback plant)


https://wyeastblog.org/2011/11/13/piggyback-plant/

Yarbrough, 1936

http://qrius.si.edu/browse/object/10980436#.WBUtCslZtDs

http://www.missouriplants.com/Ferns/Asplenium_rhizophyllum_page.html

Camptosorus rhizophyllus (walking fern)

Yarbrough, 1936

Соматический эмбриогенез

в природе
Слайд 5

Cоматический эмбриогенез in vitro Соматические эмбрионы в суспензионной культуре клеток моркови. Steward et al., 1958

Cоматический эмбриогенез in vitro

Соматические эмбрионы
в суспензионной культуре клеток моркови.

Steward et

al., 1958
Слайд 6

Примеры видов с разработанными протоколами получения соматических эмбрионов in vitro: Arabidopsis

Примеры видов с разработанными протоколами получения соматических эмбрионов in vitro:
Arabidopsis thaliana
Medicago

truncatula
Manihot esculenta
Oryza sativa
Crocus sativus
Triticum aestivum
Sequoia sempervirens
Picea abies
Cyathea delgadii

http://worldoffloweringplants.com/crocus-sativus-saffron-crocus/

http://swbiodiversity.org/seinet/taxa/index.php?taxon=51568

http://dixpix.ca/meso_america/Flora/primitive/001a_treefern.html

Cоматический эмбриогенез in vitro

Слайд 7

Получение соматических эмбрионов из суспензионной культуры Phoenix dactylifera Naik, Al-Khayri, 2016 http://imgpng.ru/download/11074

Получение соматических эмбрионов из суспензионной культуры Phoenix dactylifera

Naik, Al-Khayri, 2016

http://imgpng.ru/download/11074

Слайд 8

Osman et al., 2016 Получение соматических эмбрионов из каллусной культуры Lycium barbarum http://www.waysidegardens.com/sweet-lifeberry-shrub/p/36036/

Osman et al., 2016

Получение соматических эмбрионов из каллусной культуры Lycium barbarum

http://www.waysidegardens.com/sweet-lifeberry-shrub/p/36036/

Слайд 9

Прямой соматический эмбриогенез у Coffea canephora http://pictures11.ru/kartinki-kofe.html Quiroz-Figueroa et al., 2006

Прямой соматический эмбриогенез
у Coffea canephora

http://pictures11.ru/kartinki-kofe.html

Quiroz-Figueroa et al., 2006

Слайд 10

Типичный протокол СЭ включает в себя два этапа: 1. Культивирование растительных

Типичный протокол СЭ включает в себя два этапа:
1. Культивирование растительных эксплантов

на среде с большим содержанием ауксина: каллусообразование и индукция соматических эмбрионов
2. Развитие соматических эмбрионов на поверхности каллусов на среде без гормонов
Слайд 11

Применение соматического эмбриогенеза: трансформация растений Clarke et al., 20072/ Агробактериальная трансформация

Применение соматического эмбриогенеза: трансформация растений

Clarke et al., 20072/

Агробактериальная трансформация

http://www.petals.com/poinsettia-ranunculus-centerpiece/hda204-rd

Агробактерии

Антибиотики Селективные

агенты

Euphorbia pulcherrima

Слайд 12

Omar et al, 2016 Применение соматического эмбриогенеза: трансформация растений Трансформация протопластов Citrus sp.

Omar et al, 2016

Применение соматического эмбриогенеза: трансформация растений

Трансформация протопластов Citrus sp.

Слайд 13

Применение соматического эмбриогенеза: получение искусственных семян Fujii et al., 1987 http://www.biologydiscussion.com/plant-tissues/artificial-seeds/artificial-seeds-meaning-method-for-making-and-importance/14674

Применение соматического эмбриогенеза: получение искусственных семян

Fujii et al., 1987

http://www.biologydiscussion.com/plant-tissues/artificial-seeds/artificial-seeds-meaning-method-for-making-and-importance/14674

Слайд 14

Sharma et al., 2013 Применение соматического эмбриогенеза: получение искусственных семян

Sharma et al., 2013

Применение соматического эмбриогенеза: получение искусственных семян

Слайд 15

Применение соматического эмбриогенеза: фундаментальные исследования Регенерация Эмбриогенез Восстановление небольших участков организма

Применение соматического эмбриогенеза: фундаментальные исследования

Регенерация

Эмбриогенез

Восстановление небольших
участков организма после повреждения

Органогенез

Соматический
эмбриогенез

Зиготический
эмбриогенез

Гаметический


эмбриогенез
Слайд 16

Сходство соматического и зиготического эмбриогенеза Zimmerman, 1993

Сходство соматического и зиготического эмбриогенеза

Zimmerman, 1993

Слайд 17

ZWILLE PROTODERMAL FACTOR 2 WUSCHEL MONOPTEROS WOX5 PIN1 YODA REVOLUTA KANADY

ZWILLE

PROTODERMAL FACTOR 2

WUSCHEL

MONOPTEROS

WOX5

PIN1

YODA

REVOLUTA

KANADY

BABYBOOM

SHORTROOT

LONESOME HIGHWAY

Гены, участвующие в зиготическом эмбриогенезе

Слайд 18

ZWILLE PROTODERMAL FACTOR 2 WUSCHEL MONOPTEROS WOX5 PIN1 YODA REVOLUTA KANADY

ZWILLE

PROTODERMAL FACTOR 2

WUSCHEL

MONOPTEROS

WOX5

PIN1

YODA

REVOLUTA

KANADY

BABYBOOM

SHORTROOT

LONESOME HIGHWAY

Гены, участвующие в зиготическом эмбриогенезе

Слайд 19

Изучение СЭ 1) Разработка методов получения соматических эмбрионов у разных видов

Изучение СЭ
1) Разработка методов получения соматических эмбрионов у разных видов растений


2) Выявление факторов, влияющих на СЭ
3) Поиск маркеров и участников СЭ и выяснение механизмов их работы
Слайд 20

Внешние факторы, влияющие на СЭ Температура Освещённость Компоненты среды: - Желатинизирующий

Внешние факторы, влияющие на СЭ

Температура
Освещённость
Компоненты среды:
- Желатинизирующий агент
-

Источник углерода
- Аминокислоты
Слайд 21

Изучение СЭ 1) Разработка методов получения соматических эмбрионов у разных видов

Изучение СЭ
1) Разработка методов получения соматических эмбрионов у разных видов растений


2) Выявление факторов, влияющих на СЭ
3) Поиск маркеров, регуляторов и участников СЭ и выяснение механизмов их работы
Слайд 22

Регуляторы СЭ 1) Фитогормоны 2) Транскрипционные факторы 3) Эпигенетические регуляторы

Регуляторы СЭ
1) Фитогормоны
2) Транскрипционные факторы
3) Эпигенетические регуляторы

Слайд 23

Гормональные регуляторы СЭ Ауксин Цитокинин Этилен Абсцизовая кислота Гиббереллины

Гормональные регуляторы СЭ

Ауксин
Цитокинин
Этилен
Абсцизовая кислота
Гиббереллины

Слайд 24

Ауксин – основной регулятор СЭ Ауксиновые максимумы при формировании каллусов и

Ауксин – основной регулятор СЭ

Ауксиновые максимумы при формировании каллусов и соматических

эмбрионов

Su et al., 2009

Слайд 25

Индукция зиготического эмбриогенеза Ауксин необходим для поляризации клеток, как при зиготическом, так и при соматическом эмбриогенезе

Индукция зиготического эмбриогенеза

Ауксин необходим для поляризации клеток, как при зиготическом, так

и при соматическом эмбриогенезе
Слайд 26

Цитокинины: первые после ауксинов Присутствуют в большинстве протоколов СЭ Избыток цитокининов

Цитокинины: первые после ауксинов

Присутствуют в большинстве протоколов СЭ
Избыток цитокининов приводит

к смене типа регенерации с соматического эмбриогенеза на побегообразование
Известно несколько случаев, когда цитокинины без помощи ауксина стимулировали соматический эмбриогенез. Например – у Heliantus annuus

Thomas et al., 2004

Слайд 27

Этилен: неоднозначный эффект У M. truncatula этилен стимулирует соматический эмбриогенез Mantiri

Этилен: неоднозначный эффект

У M. truncatula этилен стимулирует соматический эмбриогенез

Mantiri et al.,

2008

А у Coffea arabica соматические эмбрионы можно получить лишь при ингибировании этиленового ответа.

Giridhar et al., 2004

Слайд 28

Этилен: неоднозначный эффект Обработка каллусов ACC (1-aminocyclopropane-1-carboxylic acid) - предшественником этилена

Этилен: неоднозначный эффект

Обработка каллусов ACC (1-aminocyclopropane-1-carboxylic acid)
- предшественником этилена

Подавление СЭ

у мутантов
с конститутивным этиленовым ответом

Bai et al., 2013

Слайд 29

Этилен: неоднозначный эффект Bai et al., 2013 Нарушение распределения ауксина при

Этилен: неоднозначный эффект

Bai et al., 2013

Нарушение распределения ауксина при обработке ACC

(предшественник этилена)

Нарушение экспрессии генов YUCCA у мутантов
с конститутивным этиленовым ответом

Без ACC

Добавлен ACC

Слайд 30

Абсцизовая кислота: отвечает за качество В большинстве случаев не индуцирует развитие

Абсцизовая кислота: отвечает за качество

В большинстве случаев не индуцирует развитие соматических

эмбрионов, но повышает их качество ☺
ОДНАКО: у моркови возможна индукция СЭ у проростков в суспензионной культуре за счёт одной лишь АБК
Слайд 31

Гиббереллины - ингибиторы СЭ Предположительно, ингибируют индукцию соматического эмбриогенеза in vivo

Гиббереллины - ингибиторы СЭ

Предположительно, ингибируют индукцию соматического эмбриогенеза in vivo

ОДНАКО: В

культуре Cocos nucifera – стимулируют индукцию соматических эмбрионов и их прорастание

Wang et al., 2004

Montero-Cortes et al., 2010

Слайд 32

Белки-регуляторы и участники СЭ

Белки-регуляторы и участники СЭ

Слайд 33

Рецепторная киназа SERK Ассоциирована с соматическим эмбриогенезом у A.thaliana, M.truncatula, H.annuus,

Рецепторная киназа SERK

Ассоциирована с соматическим эмбриогенезом
у A.thaliana, M.truncatula, H.annuus, C.

unshiu, Th.cacao

Также экспрессируется в прокамбии, в клубеньках у бобовых,
в репродуктивных тканях, участвует в побегообразовании, в зиготическом эмбриогенезе

Pro-богатый домен

Киназный домен

LRR-домен

out

in

Nolan et al., 2009

Слайд 34

Рецепторная киназа MtSERK: экспрессия в СЭ Nolan et al., 2009

Рецепторная киназа MtSERK: экспрессия в СЭ

Nolan et al., 2009

Слайд 35

Гены LEC Класс 1: LEC1 Класс 2: LEC2, FUS3 Экспрессия LEC2

Гены LEC

Класс 1: LEC1

Класс 2: LEC2, FUS3

Экспрессия LEC2 в ходе СЭ

у A. thaliana

Su et al., 2009

Lotan et al., 1998

Сверхэкспрессия LEC1 может вызвать появление эктопических соматических эмбрионов у A. thaliana

Слайд 36

Braybrook, Harada, 2008 Гены LEC

Braybrook, Harada, 2008

Гены LEC

Слайд 37

Гены LEC Garces et al., 2014 Ген LEC1 у Kalanchoe diargemontiana

Гены LEC

Garces et al., 2014

Ген LEC1 у Kalanchoe diargemontiana имеет делецию

на 3'-конце.

Трансформация Kalanchoe diargemontiana функциональным геном LEC1 снижает их способность к СЭ

Слайд 38

Ген ТФ BABY BOOM Boutilier et al., 2002

Ген ТФ BABY BOOM

Boutilier et al., 2002