Цитология и гистология. Введение

Содержание

Слайд 2

План лекции: Предмет, задачи и методы цитологии История создания и применения

План лекции:

Предмет, задачи и методы цитологии
История создания и применения микроскопа в

биологии
Типовые задачи клеточной биологии
Слайд 3

Цитология = cytos (сосуд) + logos (наука)

Цитология =
cytos (сосуд) + logos (наука)

Слайд 4

История создания и применения микроскопа в биологии

История создания и применения микроскопа в биологии

Слайд 5

Изобретение телескопа и микроскопа – 1608 г.

Изобретение телескопа и микроскопа – 1608 г.

Слайд 6

Создание микроскопа Галилео Галилеем – 1609 г. Картина Д.Тинторетто, 1605-1607 гг.

Создание микроскопа Галилео Галилеем – 1609 г.

Картина Д.Тинторетто, 1605-1607 гг.

Слайд 7

Первооткрыватель клетки Роберт Гук (1635-1703) История микроскопа Rita Greer, 2011

Первооткрыватель клетки Роберт Гук (1635-1703)

История микроскопа

 Rita Greer, 2011

Слайд 8

Слайд 9

Анатомия растений Неемия Грю (1641-1712)

Анатомия растений

Неемия Грю (1641-1712)

Слайд 10

Основоположник биологической микроскопии Антон ван Лёвенгук (1632-1723) и его микроскопиум История микроскопа Johannes Vercolje, 1680

Основоположник биологической микроскопии Антон ван Лёвенгук (1632-1723) и его микроскопиум

История микроскопа

Johannes

Vercolje, 1680
Слайд 11

Старинные микроскопы 1680 г. Около 1760 г. 1850 г.

Старинные микроскопы

1680 г.

Около 1760 г.

1850 г.

Слайд 12

Клеточная теория – 1839 г. Теодор Шванн (1810 – 1882) Как

Клеточная теория – 1839 г.

Теодор Шванн (1810 – 1882)

 
Как растения, так

и животные состоят из сходных элементов – клеток, что свидетельствует о единстве всей живой природы.
Сходство клеток растений и животных вытекает из общего для них способа образования
Известное в ботанике представление о клетке как автономной элементарной единице растительного организма надо распространить и на животных.
Организм представляет собой совокупность образующих его клеток и поэтому «основа питания и роста лежит не в организме как целом, а в отдельных элементарных его частях – клетках».
Слайд 13

Развитие клеточной теории - 1859 и 1862 гг. Рудольф Вирхов (1821-1902) Эрнст Брюкке (1819-1892)

Развитие клеточной теории - 1859 и 1862 гг.

Рудольф Вирхов

(1821-1902) Эрнст Брюкке (1819-1892)
Слайд 14

Исследования оплодотворения, митоза и мейоза (1875-1890 гг.) Эдуард Страсбургер Оскар Гертвиг Вальтер Флемминг (1844-1912) (1849-1922) (1843-1905)

Исследования оплодотворения, митоза и мейоза (1875-1890 гг.)

Эдуард Страсбургер Оскар Гертвиг Вальтер

Флемминг
(1844-1912) (1849-1922) (1843-1905)
Слайд 15

исследование общей структурно-функциональной организации клетки; изучение специализации клеток в зависимости от

 
исследование общей структурно-функциональной организации клетки;
изучение специализации клеток в зависимости от

выполняемых ими функций (т.е. особенностей клеток различных тканей)
сравнительный анализ клеток (т.е. особенностей клеток одной ткани у различных организмов).

Жан Батист Карнуа
(1836-1899)

Клеточная биология – 1884 г.

Слайд 16

Дифракционная теория микроскопа Эрнст Карл Аббе (1840-1905) Предел Аббе = 250 нм

Дифракционная теория микроскопа

Эрнст Карл Аббе (1840-1905)

Предел Аббе = 250 нм

Слайд 17

Создание электронного микроскопа М.Кноль и Э.Руска (1932)

Создание электронного микроскопа

М.Кноль и Э.Руска (1932)

Слайд 18

Конфокальный микроскоп LSM5 Pascal

Конфокальный микроскоп LSM5 Pascal

Слайд 19

Результаты применения микроскопии в биологии

Результаты применения микроскопии в биологии

Слайд 20

Типовые задачи клеточной биологии

Типовые задачи
клеточной биологии

Слайд 21

Прижизненная микроскопия клеток Catharanthus roseus Подсчет числа живых клеток

Прижизненная микроскопия клеток Catharanthus roseus

Подсчет числа живых клеток

Слайд 22

Флуоресцентная микроскопия Один или два флуорохрома Распределение препарата Фотолон в клетках

Флуоресцентная микроскопия
Один или два флуорохрома

Распределение препарата Фотолон в клетках HeLa: А

– возбуждение зеленым светом, В - окраска АО при возбуждении синим светом, С - совместная обработка Фотолоном+АО, возбуждение ультрафиолетом
Слайд 23

Окраска митохондрий родамином 123 и клеточных ядер бромидом этидия. Культура клеток

Окраска митохондрий родамином 123 и клеточных ядер бромидом этидия. Культура клеток

HEK-293

Индикация некроза и апоптоза. Культура клеток К562

Флуоресцентная микроскопия
Два флуорохрома одновременно,
конкурентный и неконкурентный варианты

Слайд 24

Флуоресцентная микроскопия Три флуорохрома последовательно Иммуноцитохимия репарации двойных разрывов ДНК в

Флуоресцентная микроскопия
Три флуорохрома последовательно

Иммуноцитохимия репарации двойных разрывов ДНК в клетках TK6.

ДНК окрашена DAPI в синий цвет, антитела к γ-H2AX мечены TRITC и флуоресцируют красным, антитела к Rad 51 мечены FITC и флуоресцируют зеленым. Справа – компьютерная обработка для определения колокализации факторов
Слайд 25

Метод комет А – интактные клеточные ядра, В – фрагментация ДНК

Метод комет

А – интактные клеточные ядра, В – фрагментация ДНК под

декйствием γ-лучей в дозе 5 Гр, С – фрагментация ДНК при апоптозе. Визуализация ДНК бромидом этидия.
Слайд 26

Схема локализации специфических ДНК проб AML/ETO t(8;21)(q21;q22) (KreatechDiagnostics) Использованы локус-специфические ДНК-пробы.


Схема локализации специфических ДНК проб AML/ETO t(8;21)(q21;q22) (KreatechDiagnostics)

Использованы локус-специфические ДНК-пробы.

Метились гены RunX1(AML1) и RunX1T1(ETO, MTG8), а так же границы ядра клетки. Съёмка проводилась по трём каналам: синий (DAPI) – границы ядра, зелёный (Oregon Green 488) - RunX1(AML1) и красный (Alexa Fluor) - RunX1T1(ETO, MTG8).

Метод FISH

Слайд 27

Проточная цитометрия - принцип

Проточная цитометрия - принцип

Слайд 28

Проточная цитометрия - прибор

Проточная цитометрия - прибор

Слайд 29

Распределение клеток по митотическому циклу

Распределение клеток по митотическому циклу