Ядро: строение и работа. Молекулярные процессы в ядре

Содержание

Слайд 2

Ядро окружено двумя мембранами, соединенными с мембраной ЭПР и пронизанными порами.

Ядро окружено двумя мембранами, соединенными с мембраной ЭПР и пронизанными порами.

Под внутренней мембраной лежит ядерная ламина.
Внутреняя и внешняя мембрана несут разный набор белков.

Строение ядра

Слайд 3

Транспорт из и в ядро

Транспорт из и в ядро

Слайд 4

Ядерные поры контролируют качество в синтезе и процессинге мРНК Ядерные поры

Ядерные поры контролируют качество в синтезе и процессинге мРНК

Ядерные поры состоят

примерно из 30 разнных белков. В них есть водный канал, через который свободно проходит вода и растворенные в ней небольшие молекулы. Через поры в цитозоль выходят молекулы РНК, закончившие процессинг и субьединицы рибосом.
Слайд 5

Белки, идущие в ядро имеют особые «ключи» - последовательности ядерной локализации NLS

Белки, идущие в ядро имеют особые «ключи» - последовательности ядерной локализации

NLS
Слайд 6

Этапы импорта: Связывание NLS с гетеродимером рецептора в цитоплазме Закрепление на

Этапы импорта:

Связывание NLS с гетеродимером рецептора в цитоплазме
Закрепление на филламентах порового

комплекса
Связывание с белком RAN (ГТФ-аза)
Прохождение через ядерный поровый комплекс
Возвращение элементов порового комплекса и транспортных белков в цитоплазму
Слайд 7

Экспорт из белка в цитоплазму идет за счет прикрепления «ключа»- последовательности

Экспорт из белка в цитоплазму идет за счет прикрепления «ключа»- последовательности

- NES

Ассоциация белка с экспортином и RAN-GTP
Попадание в цитоплазму
Возвращение RAN-GTP в ядро

Слайд 8

Слайд 9

Слайд 10

Слайд 11

Слайд 12

Под внутренней мембраной лежит ламина Ламина сформирована промежуточными филаментами. Она поддерживает

Под внутренней мембраной лежит ламина

Ламина сформирована промежуточными филаментами. Она поддерживает ядерную

мембрану и контактирует с хроматином и ядерными РНК.

Ламины

Ламин А
Связывает ламины В и С

Ламин В
Связан с определенными участками хромосом

Ламин с
Обеспечивает специфическую укладку ядерной мембраны

Слайд 13

Слайд 14

Внутренний состав ядра: Хроматин Ядрышко Ядерный белковый матрикс Кариоплазма

Внутренний состав ядра:

Хроматин
Ядрышко
Ядерный белковый матрикс
Кариоплазма

Слайд 15

Хроматин - вещество хромосом, представляющее собой комплекс ДНК, РНК и белков.

Хроматин - вещество хромосом, представляющее собой комплекс ДНК, РНК и белков. 

Активный
(деконденсированный)

Неактивный (конденсированный)

Митотические хромосомы

Слайд 16

Слайд 17

Элементы хромонемы в анафазных хромосомах

Элементы хромонемы в анафазных хромосомах

Слайд 18

Слайд 19

Слайд 20

Слайд 21

Слайд 22

Хромосомы в ядре находятся на своих местах – хромосомных территориях Хроматин

Хромосомы в ядре находятся на своих местах – хромосомных территориях

Хроматин не

заполняет все ядро. Существуют области его преимущественной локализации – хромосомные домены, разделенные межхромосомные домены.
Слайд 23

Слайд 24

Химических состав хроматина 39% ДНК У уникальными последовательностями (1) С умеренно-повторяющимися

Химических состав хроматина

39% ДНК
У уникальными последовательностями (1)
С умеренно-повторяющимися последовательности (2-100)
С

выскоко повторяющимися последовательносями (100-1000000)
Саттелитная ДНК
Слайд 25

1% РНК иРНК (код. Белки) рРНК (субъединицы рибосом, катализ синтеза белка)

1% РНК
иРНК (код. Белки)
рРНК (субъединицы рибосом, катализ синтеза белка)
тРНК (переносят

АК)
мяРНК (сплайсин пре-РНК)
мякРНК (модификация рРНК)
микроРНК (регулирет экспрессию блокировкой трянсляцию отдельных мРНК)
Интерферирующие РНК (управляют деградацией отдельных мРНК и образованием компактных хроматиновых структур)
Слайд 26

60% - БЕЛКИ Основные белки – гистоны: H1, H5 (в эритроцитах

60% - БЕЛКИ
Основные белки – гистоны: H1, H5 (в эритроцитах

рептилий и птиц), H2a, H2b (обогащены лизином), H3, H4 (обогащены аргинином)
Негистоновые белки (более 450) – ферменты, полимеразы, модификаторы ДНК и гистонов)
HMG (high-mobility group)
MAR
Слайд 27

Двойная спираль ДНК

Двойная спираль ДНК

Слайд 28

Репликация ДНК Происходит перед митотическим и первым мейотическим делением. Синтез начинается

Репликация ДНК

Происходит перед митотическим и первым мейотическим делением.
Синтез начинается в местах

с определенными послдовательностями -ориджинах
Слайд 29

В процессе репликации формируется репликативная вилка. Они образуются по обе стороны

В процессе репликации формируется репликативная вилка. Они образуются по обе стороны

ориджина.
Главную роль в репликации выполняет ДНК-полимераза, добавляющая нуклеотиды к 3’ концу (идет от 5’ к 3’)
Одна цепь синтезируется полностью – лидирующая, другая фрагментарно – отстающая – Фрагменты Оказаки
Слайд 30

Для ДНК-полимеразы необходим РНК праймер (затравка), так как она не может

Для ДНК-полимеразы необходим РНК праймер (затравка), так как она не может

синтезировать ДНК с нуля.

Хеликаза – разворачивает цепь ДНК
SSB- белки удерживают цепь, чтобы она не связывалась с другой
Скользящий зажим прикрепляет ДНК полимеразу к матричной цепи

Слайд 31

ДНК в хромосомах конденсирована Гистоны отвечают за образование нуклеосом

ДНК в хромосомах конденсирована

Гистоны отвечают за образование нуклеосом

Слайд 32

Изначально нуклеосомная нить имеет диаметр в 10 нм, затем может сворачиваться в фибриллу в 30 нм.

Изначально нуклеосомная нить имеет диаметр в 10 нм, затем может сворачиваться

в фибриллу в 30 нм.
Слайд 33

Гистон H1 садиться поверх ДНК и закрепляет ее на октомере, превращая

Гистон H1 садиться поверх ДНК и закрепляет ее на октомере, превращая

нуклеосомную нить в фибриллу (30 нм)
Слайд 34

Куда деваются нуклеосомы во время транскрипции и репликации? Нуклесосмы распадаются на

Куда деваются нуклеосомы во время транскрипции и репликации?

Нуклесосмы распадаются на две

полунуклиосомы перед рапликативной вилкой
Отщепляются димеры Н2а и Н2в
Слайд 35

Фибриллы связываются в петли за счет негистоновых белков: MAR (matrix attachment

Фибриллы связываются в петли за счет негистоновых белков: MAR (matrix attachment

regions) и SAR (scaffold attachment regions)

В конденсации хроматина также участвуют негистоновые белки

Слайд 36

Негистоновые белки интерфазных ядер образуют внутри ядра ядерный белковый матрикс. Он

Негистоновые белки интерфазных ядер образуют внутри ядра ядерный белковый матрикс. Он

представлен ламиной – периферическим фибриллярным слоем, подстилающим ядерную оболочку. Кроме того, матрикс образует внутриядерную сеть, к которой крепятся фибриллы хроматина.
Он состоит из: периферического белкового сетчатого (фиброзного) слоя — ламины (nuclear lamina, fibrous lamina), внутренней, или интерхроматиновой, сети (остов) и «остаточного» ядрышка.
Слайд 37

Внутриядерный остов, морфологически выявляется только после экстракции хроматина. Он представлен рыхлой

Внутриядерный остов, морфологически выявляется только после экстракции хроматина. Он представлен рыхлой

фиброзной сетью, располагающейся между участками хроматина, часто в состав этой губчатой сети входят различные гранулы РНП-природы.
«Остаточное» ядрышко — плотная структура, повторяющая по своей форме ядрышко, также состоит из плотно уложенных фибрилл.
Морфологическая выраженность этих трех компонентов ядерного матрикса, так же как и количество во фракциях, зависит от целого ряда условий обработки ядер. Лучше всего элементы матрикса выявляются после выделения ядер в относительно высоких (5 мМ) концентрациях двухвалентных катионов.
Слайд 38

Слайд 39

В конденсации хроматина и связывании дочерних хромотид участвуют конденсины и когезины

В конденсации хроматина и связывании дочерних хромотид участвуют конденсины и когезины

Слайд 40

Хромосомы можно увидеть лишь в их конденсированном состоянии перед началом митоза

Хромосомы можно увидеть лишь в их конденсированном состоянии перед началом митоза

Слайд 41

Хромосомы неоднородны и обладают характерной полосатостью Меду G-полосами содержится меньше ГЦ-пар

Хромосомы неоднородны и обладают характерной полосатостью

Меду G-полосами содержится меньше ГЦ-пар

Слайд 42

Существует особый способ окрашивания (G-окрашивание): хромосомы окрашивают красителем Гимзы. Под световым

Существует особый способ окрашивания (G-окрашивание): хромосомы окрашивают красителем Гимзы. Под световым

микроскопом на хромосомах видны светлые и темные полосы - G-сегменты. Хотя расположение Q-сегментов соответствует расположению G-сегментов, G-окрашивание оказалось более чувствительным и заняло место Q-окрашивания в качестве стандартного метода цитогенетического анализа. G-окрашивание дает наилучшие результаты при выявлении небольших аберраций и маркерных хромосом (сегментированных иначе, чем нормальные гомологичные хромосомы).
Слайд 43

Существует определенная С-окраска центромер

Существует определенная С-окраска центромер

Слайд 44

Q-окрашивание. Окраска акрихин-ипритом. Под люминесцентным микроскопом на хромосомах видны участки с

Q-окрашивание. Окраска акрихин-ипритом. Под люминесцентным микроскопом на хромосомах видны участки с

неодинаковой интенсивностью флюоресценции - Q-сегменты. Подходит для Y хромосомы, используется для определения пола. Темным окрашивается гетерохроматин, светлым - эухроматин
Слайд 45

R-окрашивание дает картину, противоположную G-окрашиванию. Обычно используют краситель Гимзы или флюоресцентный

R-окрашивание дает картину, противоположную G-окрашиванию. Обычно используют краситель Гимзы или флюоресцентный

краситель акридиновый оранжевый. Этим методом выявляют различия в окрашивании гомологичных G- или Q-негативных участков сестринских хроматид или гомологичных хромосом.
Слайд 46

Экспрессия генов происходит за счет синтеза РНК (транскрипции) Синтез РНК идет

Экспрессия генов происходит за счет синтеза РНК (транскрипции)

Синтез РНК идет с

одной цепи ДНК за счет фермента РНК-полимеразы, которая движется от 5’ к 3’
Слайд 47

РНК-полимераза опознает сигнальные участки начала и конца транскрипции. Для начала работы полимеразы требуются факторы транскрипции.

РНК-полимераза опознает сигнальные участки начала и конца транскрипции.
Для начала работы

полимеразы требуются факторы транскрипции.
Слайд 48

Процесс сборки РНК-полимеразы II начинатся со связываения универсального фактора транскрипции TFIID

Процесс сборки РНК-полимеразы II начинатся со связываения универсального фактора транскрипции TFIID

с ДНК (ТАТА-последовательность.
Происходят конформационные изменения и РНК-полимераза садиться на ДНК.
Для запуска работы полимеразы она должна освободиться от факторовтранскрипции.
Слайд 49

Так синтезируется пре-РНК, которая потом проходит сплайсинг и процессинг, но это происходит не в хроматине

Так синтезируется пре-РНК, которая потом проходит сплайсинг и процессинг, но это

происходит не в хроматине
Слайд 50

Созревание продуктов транскрипции для разынх РНК протекает по разному мРНК Кэпирование

Созревание продуктов транскрипции для разынх РНК протекает по разному

мРНК
Кэпирование – присоединение

5’-концу КЭП (3 этапа: фосватаза удаляет фосфат с 5’-конца, гуанилтрансфераза – присоединяет GTM через 5’-5’-связь, метилтрансфераза – присоединяет метильную группу
Полиаденилирование – присоедининение полиА-хвоста к 3’-концу
Сплайсинг – удаление экзонов и сшивание интронов
Редактирование РНК
Метилирование
Слайд 51

тРНК Удаление 5’-лидерной НК последовательности Удаление 3’-концевой последовательности Добавление ССА последовательности

тРНК
Удаление 5’-лидерной НК последовательности
Удаление 3’-концевой последовательности
Добавление ССА последовательности на 3’-конец
Вырезание

интронов
Модификация отдельных нуклеотидов
Слайд 52

Особый компонент ядра - Ядрышко Представляет собой комплекс белков и рибонуклеопротеидов,

Особый компонент ядра - Ядрышко

Представляет собой комплекс белков и рибонуклеопротеидов, формирующийся

вокруг участков ДНК, которые содержат гены рРНК — ядрышковых организаторов. Основная функция ядрышка — сборка рибосомных субъединиц.
Слайд 53

Типы ядрышек РЕТИКУЛЯРНЫЕ Почти нет фибрилярного центра КОМПАКТНЫЕ Больше выражен фибрилярный

Типы ядрышек

РЕТИКУЛЯРНЫЕ
Почти нет фибрилярного центра

КОМПАКТНЫЕ
Больше выражен фибрилярный центр

КОЛЬЦЕВИДНЫЙ
Меньше уровень

транскрипции

СЕГРЕГИРОВАННЫЙ
Блокировка транскрипции

Слайд 54

Слайд 55

Главная ф-ия ядрышка – сборка рибосом

Главная ф-ия ядрышка – сборка рибосом

Слайд 56

Помимо этого ядрышко выполняет ф-ии: Процессин мяРНК, мякРНК, тРНК Накопление вирусных

Помимо этого ядрышко выполняет ф-ии:

Процессин мяРНК, мякРНК, тРНК
Накопление вирусных белков
Формирование интерерферирующей

РНК у растений
Сенсор клеточного стресса
Стабилизация некоторых иРНК
Слайд 57

Ядрышки развиваются из ядрошковых организаторов – особых участках на хромосоме, отделенную

Ядрышки развиваются из ядрошковых организаторов – особых участках на хромосоме, отделенную

вторичной перетяжкой.
Количество ядрышек и ядрошковых организаторов может не совпадать.
Окрашивается нитратами серебра.
У человека ЯО расположены в 13,14,15,21 и 22 хромосомах.