Содержание
- 2. В чем причины широкого применения? Создание новых веществ, типов лекарств, красителей и т.п. Расширение списка контролируемых
- 4. Михаил Семенович Цвет
- 5. Этапы развития хроматографии 1903 г. Открытие хроматографии (Цвет М.С.) 1938 г. Тонкослойная или планарная хр-фия (Измайлов
- 6. Процесс разделения Фаза 2
- 7. Процесс разделения
- 8. Процесс разделения Элюент Элюат
- 9. Хроматограмма Время Отклик детектора
- 10. Мертвое время (t0) Время выхода неудерживаемого компонента Время нахождения компонентов в подвижной фазе Обычно стараются минимизировать
- 11. Время удерживания (tR) (retention time) Легко определяется из хроматограммы Интуитивно понятно Зависит от конструкции системы и
- 12. Исправленное время удерживания (tR’) t’R = tR – t0 Определяет время нахождения компонента в НЕПОДВИЖНОЙ фазе
- 13. Удерживаемый объем (Vx) V’R = t’Rx * F V’R = VR – V0 1 хроматограмма: F
- 14. Фактор удерживания К (коэффициент емкости) Фактор удерживания К = (tR-t0) / t0 - отношение исправленного времени
- 15. Относительное удерживание (или селективность) α Cелективность — это способность хроматографической системы разделять данную пару веществ А
- 16. Размывание зоны компонента
- 17. Теория теоретических тарелок
- 18. Эффективность колонки и ширина пика tR
- 19. Кинетическая теория размывания Скорость перемещения по колонке отдельных молекул отличается от средней скорости, характерной для данного
- 20. Кинетическая теория размывания Эффективность зависит от: Диаметра зерен сорбента, их геометрии и монодисперсности Качества набивки колонки
- 21. Уравнение Ван-Деемтера ВЭТТ = A + B/u + Cu U (линейная скорость) ВЭТТ А – Вихревая
- 22. Критерий разделения Rs W1 W2 Rs ≈ 0.7 При количественном (100%) разрешении пиков Rs = 1.5
- 23. Критерий Кайзера V Изменяется от 0 до 1 Может применяться для несимметричных пиков
- 24. Влияние удерживания (К), селективности (α) и эффективности (N) на разделение
- 25. Хроматограмма апельсинового сока
- 26. Коэффициент асимметрии, Аs Одна из основных причин – нелинейность изотермы сорбции Wf Wt As = (Wt(5%)+Wf
- 27. Связь изотермы и формы пика
- 28. Количественный анализ в хроматографии Количественной характеристикой является высота или площадь пика При наличии маленьких или несимметричных
- 29. Методы количественного анализа в хроматографии Метод внутренней нормализации Метод внешнего стандарта Метод добавок Метод внутреннего стандарта
- 30. Метод внутренней нормализации Sx Sy Sz
- 31. Метод внешнего стандарта
- 32. Метод добавок
- 33. Метод внутреннего стандарта Основан на введении в анализируемую смесь определенного количества постороннего вещества (внутреннего стандарта) отсутствовать
- 34. Метод внутреннего стандарта (продолжение)
- 35. Чувствительность и предел обнаружения Чувствительность – определяется наклоном градуировочного графика
- 36. Классификации хроматографических методов
- 37. Классификация хроматографических методов анализа По агрегатному состоянию подв. фазы (газовая, жидкостная, флюидная) По механизму разделения (распределительная,
- 38. Классификация по агрегатному состоянию фаз Сначала классифицируют подвижную фазу 2. Затем классифицируют неподвижную фазу
- 39. Газовая хроматография
- 40. В качестве подвижной фазы используется газ Меньшая вязкость газов по сравнению с жидкостью и большие скорости
- 41. Газохроматографическое оборудование Источник газа-носителя
- 42. Устройство ввода пробы Объем вводимой пробы легко дозируется Хорошая воспроизводимость дозирования даже микроколичеств образца Ввод пробы
- 43. Колонки в газовой хроматографии
- 44. Сейчас в основном делаются из плавленного кварца Нанесение полиамидной пленки делает их гибкими Легко крепятся к
- 45. Капиллярные колонки
- 46. Различная адсорбция молекул из газовой фазы (подвижная фаза) на твердом адсорбенте (неподвижная фаза) Адсорбционная Принцип разделения
- 47. Газо-адсорбционная хроматография
- 48. Общие положения Основана на адсорбции веществ из газовой фазы на твердом сорбенте Обычно используют для разделения
- 49. Цеолитовые молекулярные сита M2/nO•Al2O3•xSiO2•yH2O Структура элементарной ячейки цеолитов
- 50. Пример разделения газов методом ГАХ Если при постоянной температуре количество адсорбированного вещества на неподвижной фазе Cs
- 51. Достоинства и недостатки ГАХ
- 52. Газо-жидкостная хроматография
- 53. Газо-жидкостная хроматография Механизм основан на различном распределении определяемых компонентов в газовой и жидкой фазах Селективность зависит
- 54. Малая летучесть (Ткип на 2000C выше Т колонки) Устойчивость при рабочих температурах Химическая инертность Определенная растворяющая
- 55. Часто используемые неподвижные фазы
- 56. Как выбрать неподвижную фазу в ГЖХ? Наиболее важный параметр – полярность определяемых соединений (используется принцип «подобное
- 57. Детекторы в газовой хроматографии
- 58. Детектор по теплопроводности (катарометр, TCD) Изменение теплопроводности при прохождении зоны вещества, элюирующегося с колонки Широкий линейный
- 59. Устройство детектора по теплопроводности
- 60. Относительная теплопроводность веществ
- 61. Высокотемпературное пламя (H2 + O2 + N2) ионизует компоненты пробы, элюирующиеся с колонки. Ионы поступают на
- 62. Устройство пламенно-ионизационного детектора
- 63. Масс-спектрометрический детектор (GC-MS) Детектирование по отношению массы иона к его заряду (m/z) ЭЛЕКТРОННЫЙ УДАР (Electron Impact)
- 64. М.м = 152 Пример масс-спектра
- 65. Mass Spectrometry Анализ наркотических веществ Для определения тетрагидроканнабинола (THC) – основного действующего психоактивного вещества марихуаны, проба
- 66. Ионизация в МС-детекторе Происходит значительная фрагментация молекул. Фрагментация воспроизводима – возможна интерпретация структуры вещества Очень высокая
- 67. низкая температура (45 °C) – хорошее разрешение в начале, но слишком долго высокая температура (145 °C)
- 68. Достоинства и недостатки ГЖХ Достоинства Высокая селективность и эффективность Правильность и воспроизводимость анализа Высокая экспрессность (обычно
- 69. Дериватизация веществ (реакционная газовая хроматография) Используются НАПРАВЛЕННЫЕ химические превращения: нелетучих соединений в летучие, неустойчивых соединений в
- 70. Определение карбоновых кислот методом ГХ с предварительной дериватизацией
- 71. Достоинства и недостатки реакционной ГХ Достоинства Расширение области применения Увеличение селективности (индивидуальные св-ва соединений проявляются сильнее)
- 72. Жидкостная хроматография
- 73. Подвижная фаза – жидкость Неподвижная фаза – твердое вещество Часто присутствуют одновременно несколько механизмов. При классификации
- 74. Виды ВЭЖХ по механизму взаимодействий
- 75. Неподвижные фазы в жидкостной хроматографии
- 76. Основной тип матриц в ВЭЖХ – силикагель Достоинства Недостатки Отработанная технология синтеза Доступность и относительно низкая
- 77. Нормально-фазовая хроматография (основной механизм – адсорбция)
- 78. Нормально-фазовая хроматография Полярный сорбент - + 0 Неполярный растворитель
- 79. Подвижная фаза: гексан + этилацетат (хлороформ) Неподвижная фаза: силикагель, оксид алюминия Нормально-фазовая хроматография
- 80. Нормально-фазовая хроматография Удерживание соединений за счёт диполь-дипольных взаимодействий
- 81. Закономерности удерживания Полярные соединения удерживаются сильнее, чем неполярные Пространственные изомеры (о-, м, п- ) разделяются лучше,
- 82. Обращенно-фазовая хроматография (основной механизм – распределение)
- 83. Обращенно-фазовая хроматография Неполярный сорбент - + 0 Полярный растворитель
- 84. Подвижная фаза более полярна, чем неподвижная Ацетонитрил-вода Метанол-вода Неподвижные фазы химически модифицированные силикагели R = С2,
- 85. Удерживание соединений за счёт гидрофобных взаимодействий Обращенно-фазовая хроматография
- 86. Элюирующая сила подвижной фазы
- 87. Удерживание веществ в ОФ-ВЭЖХ в зависимости от соотношения ацетонитрил-вода в элюенте
- 88. Водорастворимые витамины
- 89. Определение водорастворимых витаминов в таблетках
- 90. Эксклюзионная хроматография (основной механизм – проникновение в поры)
- 91. Механизм эксклюзионной хроматографии
- 92. Жидкостная хроматография специфических взаимодействий (основной механизм – «другие»)
- 93. Неподвижная фаза для разделения стереоизомеров Хиральная хроматография (Разделение стереоизомеров)
- 94. Разделение оптических изомеров аминокислот (IBLC) (NMC) Column, Mightysil RP-18 (150x4.6 I.D.); mobile phase: methanol-0.01 M Na2HPO4,
- 95. Результаты определения аминокислот и их энантиомеров в моче здоровых и больных людей (n=3, P=0.95)
- 96. Аффинная хроматография (избирательное связывание) Основана на способности некоторых веществ (в основном – белков) нековалентно и обратимо
- 97. Селективное взаимодействие лиганда с белками, содержащими парный гистидин
- 98. Детектирование в ВЭЖХ
- 99. СПЕКТРОФОТОМЕТРИЧЕСКИЙ ДЕТЕКТОР I0 I
- 100. Область применения Ароматические соединения (при 230-270 нм) Гетероциклические соединения Непредельные углеводороды В-ва, поглощающие в видимой области
- 101. ФЛУОРИМЕТРИЧЕСКИЙ ДЕТЕКТОР I1, λ = N nm Высокая чувствительность ~ 10-12 г Растворенный кислород может тушить
- 102. Полиароматические углеводороды Хиноны Производные аминокислот Некоторые витаминов (B2, B6 и др.) Области применения
- 103. Коэффициент преломления разбавленных растворов изменяется пропорционально изменению концентрации растворенного соединения Современные рефрактометры фиксируют до 1*10-8 изменения
- 104. Области применения Сахара Алифатические карбоновые кислоты Амины
- 105. Гидразины Нитрофенолы, аминофенолы Сахара Биогенные аминов (путресцин, тирамин и др.) Жирорастворимые витамины Области применения Используют эффект
- 106. МАСС-СПЕКТРОМЕТРИЧЕСКИЙ ДЕТЕКТОР
- 107. СФ-детектирование (200 нм) 1 Определение пантотеновой кислоты в яблочном соке МС-детектирование (m/z 220)
- 108. Возможность определять термически неустойчивые и нелетучие соединения Вещества с большой молекулярной массой (протеины и полимеры) Определение
- 109. Преимущества жидкостной хроматографии Более гибкие методы (многообразие вариаций подвижной и неподвижной фаз, механизмов разделения) Лучше воспроизводимость
- 110. ПРОБЛЕМА КАК РАЗДЕЛИТЬ ЗАРЯЖЕННЫЕ ВЕЩЕСТВА?
- 111. Ион-парная хроматография (основной механизм – распределение + ионный обмен)
- 112. Механизм (I) ион-парной хроматографии - - + 0
- 113. Механизм (II) ион-парной хроматографии - + + + + +
- 114. Определение лекарственных веществ в плазме крови Сульбактам Цефоперазон
- 115. В элюенте – добавка бромида тетрабутиламмония Хроматограмма образца плазмы крови содержащей сульбактам и цефоперазон Предел обнаружения
- 116. Ион-парная хроматография (ИПХ) Достоинства Возрастает удерживание заряженных веществ. Одновременное определение заряженных и незаряженных соединений. Многопараметрическая система
- 117. Ионная хроматография (основной механизм – ионный обмен)
- 118. Схема ионного обмена K1 K2 K 1 ≠ K2
- 119. Для превращения ионообменной хроматографии в современный аналитический метод требовалось:
- 120. Неподвижные фазы в ионной хроматографии
- 121. Строение сорбентов Ионообменная хр-фия Объемно- модифицированные Емкость до 10 мМ/г Диаметр 200-2000 мкм Поверхностно- модифицированные Емкость
- 122. Детектирование в ионной хроматографии
- 123. Детектирование в ионной хроматографии Кондуктометрическое Спектрофотометрическое Другие
- 124. Достоинства кондуктометрического детектора Универсален для детектирования заряженных веществ Простой, надежный, недорогой Ключевая проблема – как обеспечить
- 125. Колоночное подавление
- 126. Определение анионов методом ионной хроматографии
- 127. «Стандартные» анионы Элюент: 1.7 мM NaHCO3+1.8 мM Na2CO3 Вариант: ПФ С мин. - на уровне 1-10
- 128. Ион-эксклюзионная хроматография (основной механизм – проникновение в поры + ионный обмен)
- 129. Принцип ион-эксклюзионной хроматографии рН Cl- CH3COOH
- 130. Контроль качества напитков
- 131. Тонкослойная хроматография (ТСХ, Thin layer chromatography)
- 132. Принцип тонкослойной хроматографии
- 133. Прибор для ТСХ
- 134. Проявление ТСХ Опрыскивание пластины различными реагентами (дитизон, нингидрин и др.) Спектроскопические методы (УФ, люминесценция) Радиохимические методы
- 135. Количественный анализ в ТСХ (БХ) Визуально на бумаге по величине и интенсивности пятен Используют спектроскопию диффузного
- 136. Достоинства и недостатки ТСХ
- 137. Выбор варианта хроматографии в зависимости от задачи
- 139. Скачать презентацию