Иммуногистохимический метод исследования

Август 6, 2022

Главная
Медицина
Иммуногистохимический метод исследования

Содержание

2. Определения Иммуногистохимия – это метод выявления точной локализации того или иного клеточного или тканевого компонента (антигена)
3. Тканевая локализация антигенов
4. Антитела Моноклональные Поликлональные
6. Визуализация = детекция Прямой метод Непрямой метод
7. Прямой метод
8. Непрямой метод
9. Визуализация = детекция Флюорохромы Ферменты Металлы и металлопротеиды Радиоизотопы Промежуточные связывающие вещества, например, биотин, дигоксин
10. Ферментная метка Иммуноферментные методы основаны на взаимодействии фермента, которым помечены антитела, с субстратом и образовании окрашенного
11. Ферментные метки Пероксидаза хрена (HRP) Щелочная фосфатаза (AP) Глюкозоксидаза Пероксидаза и щелочная фосфатаза есть и в
12. Контроли Положительный контроль антигена Отрицательный контроль антигены Отрицательный контроль антитела
13. Пробоподготовка Факторы, влияющие на качество ИГХ-окрашивания: Фиксация Проводка Заливка Микротомия Используемые стёкла и адгизивы Условия демаскировки
14. Фиксация
15. Проводка и заливка
16. Подготовка препарата
17. Стандартизированная шкала оценки результатов HER2-статуса при ИГХ анализе инвазивного РМЖ 0 – при полном отсутствии продукта
18. Инвазивный протоковый рак молочной железы. Иммуногистохимическая реакция с антителами HER2/neu. Оценка – 0 баллов. Инвазивный протоковый
19. Инвазивный протоковый рак молочной железы. Иммуногистохимическая реакция с антителами HER2/neu. Оценка – 2+ баллов. Инвазивный протоковый
20. Визуальная шкала оценки экспрессии маркеров Низкий уровень экспрессии Средний уровень экспрессии Высокий уровень экспрессии
21. Экспрессия ТС (тимидилатсинтазы) в ткани аденокарциномы легкого Аденокарцинома легкого. Иммуногистохимическая реакция с антителами ТС. Низкий уровень
22. Список литературы Иммуногистохимические методы: Руководство / Ed. by George L. Kumar, Lars Rudbeck.: DAKO / Пер.
24. Скачать презентацию

Слайд 2

Определения
Иммуногистохимия – это метод выявления точной локализации того или иного клеточного

или тканевого компонента (антигена) благодаря связыванию его с мечеными антителами.
Антиген – любое вещество, которое при попадании в ткани восприимчивого организма вызывает иммунный ответ, в результате которого формируются специфические антитела, связывающиеся с данным веществом.
Антитела – это растворимые гликопротеины глобулиновой фракции сыворотки крови, образующиеся в ответ на проникновение антигена в организм теплокровных.

Слайд 3

Тканевая локализация антигенов

Слайд 4

Антитела
Моноклональные
Поликлональные

Слайд 5

Слайд 6

Визуализация = детекция
Прямой метод
Непрямой метод

Слайд 7

Прямой метод

Слайд 8

Непрямой метод

Слайд 9

Визуализация = детекция
Флюорохромы
Ферменты
Металлы и металлопротеиды
Радиоизотопы
Промежуточные связывающие вещества, например, биотин, дигоксин

Слайд 10

Ферментная метка
Иммуноферментные методы основаны на взаимодействии фермента, которым помечены антитела, с

субстратом и образовании окрашенного конечного продукта реакции
Одна молекула ферменты, конъюгированная с антителом, способна «обработать» большое количество молекул субстрата. Образовавшийся нерастворимый краситель накапливается в ткани вокруг фиксированного к антигену антитела

Слайд 11

Ферментные метки
Пероксидаза хрена (HRP)
Щелочная фосфатаза (AP)
Глюкозоксидаза
Пероксидаза и щелочная фосфатаза есть и

в тканях организма, поэтому иногда можно получить ложноположительные результаты. При окраске активность эндогенных ферментов блокируется добавлением специальных растворов. Обычно они входят в состав системы детекции.

Слайд 12

Контроли
Положительный контроль антигена
Отрицательный контроль антигены
Отрицательный контроль антитела

Слайд 13

Пробоподготовка
Факторы, влияющие на качество ИГХ-окрашивания:
Фиксация
Проводка
Заливка
Микротомия
Используемые стёкла и адгизивы
Условия демаскировки
Используемые реагенты
Соблюдений условий

протокола

Слайд 14

Фиксация

Слайд 15

Проводка и заливка

Слайд 16

Подготовка препарата

Слайд 17

Стандартизированная шкала оценки результатов HER2-статуса при ИГХ анализе инвазивного РМЖ
0 –

при полном отсутствии продукта реакции или выявлении его на мембранах менее чем 10% клеток опухоли.
1+ – при незначительном количестве продукта реакции на части мембраны более чем 10% клеток опухоли.
2+ – при умеренном количестве продукта реакции на мембранах более чем 10% клеток опухоли.
3+ – при наличии ярко выраженного продукта реакции на протяжении всей мембраны клетки при окрашивании более чем 10% клеток опухоли.

Слайд 18

Инвазивный протоковый рак молочной железы. Иммуногистохимическая реакция с антителами HER2/neu. Оценка

– 0 баллов.

Инвазивный протоковый рак молочной железы. Иммуногистохимическая реакция с антителами HER2/neu. Оценка – 1+ баллов.

Слайд 19

Инвазивный протоковый рак молочной железы. Иммуногистохимическая реакция с антителами HER2/neu. Оценка

– 2+ баллов.

Инвазивный протоковый рак молочной железы. Иммуногистохимическая реакция с антителами HER2/neu. Оценка – 3+ баллов.

Слайд 20

Визуальная шкала оценки экспрессии маркеров
Низкий уровень экспрессии
Средний уровень экспрессии
Высокий уровень экспрессии

Слайд 21

Экспрессия ТС (тимидилатсинтазы) в ткани аденокарциномы легкого
Аденокарцинома легкого. Иммуногистохимическая реакция с

антителами ТС. Низкий уровень экспрессии.

Аденокарцинома легкого. Иммуногистохимическая реакция с антителами ТС. Средний уровень экспрессии.

Аденокарцинома легкого. Иммуногистохимическая реакция с антителами ТС. Высокий уровень экспрессии.

Слайд 22

Список литературы
Иммуногистохимические методы: Руководство / Ed. by George L. Kumar, Lars

Rudbeck.: DAKO / Пер. с англ. под ред. Г.А.Франка и П.Г.Малькова. – М., 2011. – 224 с.
Значение некоторых иммуноморфологических факторов для определения прогноза аденокарциномы легкого. С.А.Зинькович, Е.М.Непомнящая, С.П.Пыльцин, Т.О.Лаптева, Ю.Н.Лазутин, О.В.Тарнопольская.
Морфологическое тестирование HER2–статуса при раке молочной железы. Завалишина Л.Э. , Франк Г.А.

Иммуногистохимический метод исследования

Содержание

ОпределенияИммуногистохимия – это метод выявления точной локализации того или иного клеточного

Тканевая локализация антигенов

АнтителаМоноклональные Поликлональные

Визуализация = детекцияПрямой методНепрямой метод

Прямой метод

Непрямой метод

Визуализация = детекцияФлюорохромыФерментыМеталлы и металлопротеидыРадиоизотопыПромежуточные связывающие вещества, например, биотин, дигоксин

Ферментная меткаИммуноферментные методы основаны на взаимодействии фермента, которым помечены антитела, с

Ферментные меткиПероксидаза хрена (HRP)Щелочная фосфатаза (AP)ГлюкозоксидазаПероксидаза и щелочная фосфатаза есть и

КонтролиПоложительный контроль антигенаОтрицательный контроль антигеныОтрицательный контроль антитела

Фиксация

Проводка и заливка

Подготовка препарата

Стандартизированная шкала оценки результатов HER2-статуса при ИГХ анализе инвазивного РМЖ0 –

Инвазивный протоковый рак молочной железы. Иммуногистохимическая реакция с антителами HER2/neu. Оценка

Инвазивный протоковый рак молочной железы. Иммуногистохимическая реакция с антителами HER2/neu. Оценка

Визуальная шкала оценки экспрессии маркеровНизкий уровень экспрессииСредний уровень экспрессииВысокий уровень экспрессии

Экспрессия ТС (тимидилатсинтазы) в ткани аденокарциномы легкогоАденокарцинома легкого. Иммуногистохимическая реакция с

Список литературыИммуногистохимические методы: Руководство / Ed. by George L. Kumar, Lars

Похожие презентации

Определения
Иммуногистохимия – это метод выявления точной локализации того или иного клеточного

Антитела
Моноклональные
Поликлональные

Визуализация = детекция
Прямой метод
Непрямой метод

Визуализация = детекция
Флюорохромы
Ферменты
Металлы и металлопротеиды
Радиоизотопы
Промежуточные связывающие вещества, например, биотин, дигоксин

Ферментная метка
Иммуноферментные методы основаны на взаимодействии фермента, которым помечены антитела, с

Ферментные метки
Пероксидаза хрена (HRP)
Щелочная фосфатаза (AP)
Глюкозоксидаза
Пероксидаза и щелочная фосфатаза есть и

Контроли
Положительный контроль антигена
Отрицательный контроль антигены
Отрицательный контроль антитела

Стандартизированная шкала оценки результатов HER2-статуса при ИГХ анализе инвазивного РМЖ
0 –

Визуальная шкала оценки экспрессии маркеров
Низкий уровень экспрессии
Средний уровень экспрессии
Высокий уровень экспрессии

Экспрессия ТС (тимидилатсинтазы) в ткани аденокарциномы легкого
Аденокарцинома легкого. Иммуногистохимическая реакция с

Список литературы
Иммуногистохимические методы: Руководство / Ed. by George L. Kumar, Lars