Содержание
- 2. Иммуноферментный анализ (сокращённо ИФА, англ. enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA) лабораторный иммунологический метод качественного или количественного определения
- 3. Классификация. Гомогенные Гетерогенные (имеется стадия механического разделения на фазы) по типу проводимых на каждой из иммунохимических
- 4. Классификация. по типу иммунохимического взаимодействия на первой стадии анализа конкурентный неконкурентный прямой непрямой
- 5. Классификация. прямой непрямой по типу используемых меченных антител/антител
- 6. «Твердая фазы» для ИФА пластмасса (полистирол, поливинилхлорид и др.) в виде стандартно штампованных микроплашек с 96
- 7. Прямой ИФА Гомогенный (EMIT-анализ) Гетерогенный 1. конкурентный 2. ингибиторный 3.Сэндвич-анализ 4.иммуномерсентометрический
- 8. EMIT (enzyme multiplied immunoassay technique) – способ гомогенного ИФА, основанный на связи с ферментами. В основе
- 9. Прямой конкурентный метод. К иммобилизованным антителам добавляют раствор, содержащий определяемое вещество и фиксированную концентрацию меченого антигена,
- 10. Примером неконкурентного ИФА является «сэндвич»-метод. К носителю с иммобилизованными антителами добавляют раствор, содержащий анализируемый антиген. В
- 11. Сэндвич- метод. ELISA На стадии выявления специфического иммунокомплекса антиген оказывается как бы зажатым между молекулами иммобилизованных
- 12. Непрямой ИФА Гетерогенный 1. конкурентный 2. ингибиторный 3.Сэндвич-анализ (неконкурентный) 4.иммуномерсентометрический
- 13. СХЕМА непрямого ИФА метку присоединяют не к целевому антигену и не к антителу против целевого антигена,
- 14. Непрямой «сэндвич»-метод Непрямые варианты ИФА не требуют очистки искомых антигенов или антител Вместо антивидовых антиглобулиновых антител
- 15. Непрямой конкурентный ИФА. ПРИНЦИП - используются меченные ферментом вторичные антитела и иммобилизованный на твердой фазе конъюгат
- 16. небольшое число стадий, что позволяет легко автоматизировать анализ сложность методов синтеза ферментных конъюгатов, а также возможное
- 17. Ферменты- метки в ИФА Пероксидаза из корней хрена (субстраты: • орто-фенилендиамин (продукт желто-коричневый, растворимый, поглощает при
- 18. «авидинбиотиновое» взаимодействие Если по тем или иным биохимическим причинам заданный антиген или интересующее антитело не удается
- 19. Преимущества и недостатки ИФА Преимущества метода ИФА: 1) Высокая специфичность и чувствительность метода ИФА (более 90%).
- 20. Недостатки ИФА: влияние фона на результат анализа, наличие в тестируемых образцах модификаторов активности ферментов (кофакторов, ингибиторов);
- 21. Пути преодоления Для уменьшения вероятности получения ложноположительных результатов ИФА используют в сочетании с соответствующими хроматографическими подтверждающими
- 23. Скачать презентацию