Определение чувствительности к антибиотикам

Август 6, 2022

Главная
Биология
Определение чувствительности к антибиотикам

Содержание

2. Циркуляция антибиотикорезистентных микроорганизмов в современный период столь широка, что только точное определение чувствительности к антибиотикам каждого
4. Диско-диффузионный метод
5. Диффузный метод дисков: 1. Исследуемую бактериальную культуру засевают газоном на питательный агар или среду АГВ в
6. Для определения чувствительности м/о к антибиотикам необходимо приготовить взвесь микробных клеток в физ.растворе, соответствующую стандарту мутности
7. Денситометр DEN-1 используют для определения концентрации клеток (бактериальных, дрожжевых) в микробной суспензии (взвеси).
8. Справка: Стандарт МакФарланда обозначается - 0,5; 1 и т.д. и соответствует 1,5х108; 3х108М.О. в единице объёма.
9. Диски с антибиотиками
10. В зависимости от диаметра зоны задержки роста различают степень чувствительности испытуемого штамма: Чувствительные (зона больше 10
11. Малочувствитель- ные Устойчивые Чувствительные
12. Для автоматической раскладки дисков используют диспенсеры:
13. В башенку диспенсера вставляют картриджы с антибиотиками
14. Картриджи с дисками
15. Рис.4 Цилиндрические головки прижимного устройства Рис. 5 Нанесение дисков
17. Рис. 9 Вид чашки после инкубирования в термостате
18. Иногда (обычно при неправильном обращении) диски могут застрять внутри диспенсера. В этом случае нужно снять нижнюю
19. Метод Е- теста
20. Определение чувствительности микроорганизма с помощью Е-теста проводится аналогично тестированию диско-диффузионным методом. Отличие состоит в том, что
21. МЕТОДЫ РАЗВЕДЕНИЯ
22. Методы разведения основаны на использовании двойных последовательных разведений концентраций антибиотика от максимальной к минимальной (например от
24. Скачать презентацию

Слайд 2

Циркуляция антибиотикорезистентных микроорганизмов в современный период столь широка, что только

точное определение чувствительности к антибиотикам каждого конкретного возбудителя инфекции может обеспечить правильный выбор препарата для химиотерапии.

Слайд 3

Слайд 4

Диско-диффузионный
метод

Слайд 5

Диффузный метод дисков:
1. Исследуемую бактериальную культуру засевают газоном на питательный агар

или среду АГВ в чашке Петри: готовят микробную взвесь и 1 мл взвеси наносят на всю поверхность чашки ( шпателем или покачивая чашку). 2.На засеянную поверхность пинцетом помещают на одинаковом расстоянии друг от друга бумажные диски, содержащие определенные дозы разных антибиотиков. Посевы инкубируют при 37°С до следующего дня.
3. Диффузия антибиотика в агар приводит к формированию зоны подавления роста микроорганизмов вокруг дисков. Результат учитывают путем измерения диаметра зоны отсутствия роста вокруг диска в миллиметрах.

Слайд 6

Для определения чувствительности м/о к антибиотикам необходимо приготовить взвесь микробных

клеток в физ.растворе, соответствующую стандарту мутности 0,5 по МакФарланду (1,5х108 микробных клеток в единице объёма).

Слайд 7

Денситометр DEN-1 используют для определения концентрации клеток (бактериальных, дрожжевых) в микробной

суспензии (взвеси).

Слайд 8

Справка:
Стандарт МакФарланда обозначается - 0,5; 1 и т.д. и соответствует

1,5х108; 3х108М.О. в единице объёма. Российские стандарты (производство ГИСК) обозначались 10 единиц и соответствовали количеству М.О. в единице объёма 5х108, а стандарт 5 ед соответствовал количеству М.О. в единице объема 2,5х108 .

Слайд 9

Диски с антибиотиками

Слайд 10

В зависимости от диаметра зоны задержки роста различают степень чувствительности испытуемого

штамма:
Чувствительные (зона больше 10 мм),
Малочувствительные (зона меньше 10 мм)
Устойчивые (отсутствие зоны).

Слайд 11

Малочувствитель-
ные
Устойчивые
Чувствительные

Слайд 12

Для автоматической раскладки дисков используют диспенсеры:

Слайд 13

В башенку диспенсера вставляют картриджы с антибиотиками

Слайд 14

Картриджи с дисками

Слайд 15

Рис.4 Цилиндрические головки прижимного устройства
Рис. 5 Нанесение дисков

Слайд 16

Слайд 17

Рис. 9 Вид чашки после инкубирования в термостате

Слайд 18

Иногда (обычно при неправильном обращении) диски могут застрять внутри диспенсера. В

этом случае нужно снять нижнюю крышку и вытащить застрявший диск.

Слайд 19

Метод Е- теста

Слайд 20

Определение чувствительности микроорганизма с помощью Е-теста проводится аналогично тестированию диско-диффузионным методом.

Отличие состоит в том, что вместо диска с антибиотиком используют полоску Е-теста, содержащую градиент концентраций антибиотика от максимальной к минимальной . В месте пересечения эллипсовидной зоны подавления роста с полоской Е-теста получают значение минимальной подавляющей концентрации (МПК).

Слайд 21

МЕТОДЫ РАЗВЕДЕНИЯ

Слайд 22

Методы разведения основаны на использовании двойных последовательных разведений концентраций антибиотика от

максимальной к минимальной (например от 128 мкг/мл, 64 мкг/мл, и т.д. до 0,5 мкг/мл, 0,25 мкг/мл и 0,125 мкг/мл). При этом антибиотик в различных концентрациях вносят в жидкую питательную среду (бульон) или в агар. Затем бактериальную суспензию определенной плотности, соответствующую стандарту мутности 0,5 по MсFarland, помещают в бульон с антибиотиком или на поверхность агара в чашке.

Минимальная подавляющая концентрация (МПК) - наименьшая концентрация антибиотика (мг/л или мкг/мл), которая in vitro полностью подавляет видимый рост бактерий.