Исследование влияния трансмембранного потенциала на свойства клеток Hela

Содержание

Слайд 2

Структура доклада: Трансмембранный потенциал – что это? Описание модели Экспериментальное подтверждение модели Выводы

Структура доклада:

Трансмембранный потенциал – что это?
Описание модели
Экспериментальное подтверждение модели
Выводы

Слайд 3

Модель Армстронга

Модель Армстронга

Слайд 4

Поставленные Задачи: 1) Поиск альтернативного физико-математического описания, позволяющего описывать динамический трансмембранный

Поставленные Задачи:
1) Поиск альтернативного физико-математического описания, позволяющего описывать динамический трансмембранный потенциал.


2) исследование регуляции объема клетки.
3) Построение модели, описывающей зависимость между изменениями объема и изменениями трансмембранного потенциала
Слайд 5

Уравнение Гольдмана-Ходжкина-Катца: Уравнение изменения объема:

 

Уравнение Гольдмана-Ходжкина-Катца:

Уравнение изменения объема:

Слайд 6

Вводимые данные

Вводимые данные

 

Слайд 7

Методы исследования: 1) Конфокальный микроскоп — оптический микроскоп, ограничивающий поток фонового

Методы исследования:

1) Конфокальный микроскоп — оптический микроскоп, ограничивающий поток фонового рассеянного света.

Метод конфокальной микроскопии позволяет добиться высокой контрастности, что позволяет визуализировать не только отдельные клетки, но и внутриклеточные структуры.

2) Проточная цитофлуорометрия – метод исследования, заключающийся в поштучном анализе клеток на основе данных флуоресценции и светорассеяния.

Слайд 8

В левой части рисунка представлена фотография клеток культуры Hela, выполненная на

В левой части рисунка представлена фотография клеток культуры Hela, выполненная на

конфокальном микроскопе. На центральной части рисунка представлена флуоресцентное изображение красителя DiBAC4(3) накопившегося в клетках. В правой части представлено наложение обоих оптических каналов.
Слайд 9

Флуоресценция и Dibac4(3) Флуоресценция - это явление, заключающееся в поглощении фотона

Флуоресценция и Dibac4(3)

Флуоресценция - это явление, заключающееся в поглощении фотона

веществом и последующем излучении части полученной энергии в виде фотона с характерной для этого вещества длиной волны, большей, чем у поглощенного фотона.

Dibac4(3) - проникающий флуоресцентный
Краситель, представляющий из себя гидрофобный анион.

Слайд 10

Результаты эксперимента: На рисунках последовательно представлены флуоресцентные изображения красителя DiBAC4(3) накопившегося

Результаты эксперимента:

На рисунках последовательно представлены флуоресцентные изображения красителя DiBAC4(3) накопившегося в

клетках при концентрациях KCl 4, 10, 20, 40, 60 и 80 мМ соответственно.
Слайд 11

На графике сверху данные полученные из эксперимента проводимого на цитофлуорометре. На

На графике сверху данные полученные из эксперимента проводимого на цитофлуорометре. На

графике снизу изображены данные, полученные с конфокального микроскопа. Результат коррелирует с данными теоретического эксперимента изображенными на рисунке справа.
Слайд 12

Выводы: Эксперимент показал, что действительно уравнение Гольдмана-Ходжкина-Катца при малом изменении параметров

Выводы:

Эксперимент показал, что действительно уравнение Гольдмана-Ходжкина-Катца при малом изменении параметров может

работать, как динамическая модель. Следовательно, любой процесс можно смоделировать при достаточно точном разбиении процесса по времени.
Также, в ходе эксперимента, была подтверждена модель изменения клеточного объема.