Содержание
- 2. План лекции Методы разделения белковых смесей Основные принципы хроматографии ВЭЖХ Инструментальное обеспечение
- 3. Методы разделения белковых смесей Высокоэффективная жидкостная хроматография разделение по заряду, молекулярной массе, степени гидрофобности, специфическом взаимодействии
- 4. Высокоэффективная жидкостная хроматография
- 5. Хроматография Хроматография - динамический метод анализа, основанный на многократно повторяющихся процессах сорбции и десорбции. Неподвижная фаза
- 6. История
- 7. Виды хроматографии Критерии классификации способ ввода пробы; агрегатное состояние фаз; механизм взаимодействия аналита с неподвижной фазой;
- 8. По способу введения пробы Элюентная хроматография (проявительная) Наиболее часто используемый вариант проведения аналитической хроматографии. Анализируемую смесь
- 9. ТФЭ (SPE) Устройства для автоматизации ТФЭ Колонки для ТФЭ Твердофазная экстракция, ТФЭ — разделение твердофазных смесей
- 10. ТФЭ Назначение ТФЭ: очистка пробы от нежелательных примесей, концентирование компонентов пробы, перевод компонентов пробы на другую
- 11. По агрегатному состоянию фаз Газовая хроматография Газо-жидкостная хроматография Газо-твёрдофазная хроматография Жидкостная хроматография Жидкостно-жидкостная хроматография Жидкостно-твёрдофазная хроматография
- 12. По механизму взаимодействия Распределительная хроматография Ионообменная хроматография Адсорбционная хроматография Эксклюзионная хроматография Аффинная хроматография Осадочная хроматография Адсорбционно-комплексообразовательная
- 13. Распределительная хроматография хроматографический метод, при котором неподвижная (стационарная) фаза химически связана с поверхностью неподвижного носителя. Подвижной
- 14. Ионобменная хроматография хроматографии позволяет разделять ионы и полярные молекулы, на основании зарядов разделяемых молекул. Данный вид
- 15. Адсорбционная хроматография вид хроматографии, основанный на способности твёрдого вещества — неподвижной фазы — сорбировать примеси, находящиеся
- 16. Эксклюзионная хроматографии (гель-фильтрация) молекулы веществ разделяются по размеру за счёт их разной способности проникать в поры
- 17. Эксклюзионная хроматографии (гель-фильтрация) Объем образца лимитирующий для качества хроматографии Аналитическое разделение: не более 0,1% Vc Препаративное
- 18. Аффинная хроматография (от лат. affinis – родственный) (биоспецифич. хроматография, хроматография по сродству), метод очистки и разделения
- 19. По назначению аналитическая (динамический диапазон) препаративная (10 мг – 10 г) промышленная (тонны)
- 20. ВЭЖХ Высокоэффективная жидкостная хроматография (ВЭЖХ) High performance liquid chromatography (HPLC) Инструментальная реализация хроматографических методов (Csaba Horváth)
- 21. ВЭЖХ Милихром
- 22. ВЭЖХ HP
- 23. ВЭЖХ Люмекс
- 24. ВЭЖХ Чешский прибор
- 25. ВЭЖХ Agilent Technologies Agilent 1290 Infinity
- 27. Основные узлы хроматографа Дегазатор подвижной фазы Насос высокого давления + градиентный смеситель Система инжекции (автосэмплер) Колонка
- 28. Схема хроматографа (1) Резервуары для растворителей (2) дегазатор, (3) Градиентный клапан, (4) смеситель, (5) насос высокого
- 29. Подвижная фаза Обращеннофазовая хроматография метанол ацетонитрил вода ТГФ Параметры вязкость полярность смешиваемость
- 30. Насос Насос - обеспечивает стабильный поток подвижной фазы через колонку под высоким давлением Градиентный смеситель –
- 31. Инжектор Назначение – дозированный ввод образца в колонку Работа шестипортового инжектора Дозирующая петля
- 32. Колонка Геометрический объем колонки, Vc - внутреннее пространство пустой колонки. Свободный объем, Vo - часть объема
- 33. Сертификат качества на колонку
- 34. Требования к сорбенту 1. колоночный материал должен обладать достаточной прочностью и жесткостью, мало зависящей от наличия
- 35. Сорбенты
- 36. Виды детекторов ультрафиолетовый (УФ, UV) диодноматричный (PDA) рефрактометрический флуоресцентный кондуктометрический детектор радиоактивности масс-спектрометрический (МС, MS)
- 37. Детекторы
- 38. Хроматография сложной смеси веществ (парфюмерная композиция)
- 39. Параметры tM - время удерживания несорбируемого соединения; tR1 и tR2 - абсолютные времена удерживания компонентов 1
- 40. Параметры Площадь пика, S - площадь хроматограммы, заключенная между пиком и его основанием. В первом приближении
- 41. Объем Объем удерживания вещества, VR - объем подвижной фазы, затрачиваемой на элюирование пробы вещества. Объем удерживания
- 42. Время Абсолютное время удерживания вещества, tR - время пребывания исследуемого вещества в хроматографе. Практически время удерживания
- 43. Эффективность Эффективность хроматографической системы - количество ступеней установления равновесия между подвижной и неподвижной фазой в выбранных
- 44. Параметры эффективности Приведенное число теоретических тарелок N’ - отношение числа реально полученных теоретических тарелок на колонке
- 45. Смысл Эффективность колонки - характеристика качества колонки, определяемая числом теоретических тарелок и высотой теоретической тарелки. Эффективность
- 46. Селективность Селективность (относительное удерживание, αR/cm, фактор разделения, α) хроматографической системы - избирательность, способность к специфическим взаимодействиям
- 47. Селективность Селективность колонки зависит от многих факторов, варьируя которые можно подобрать оптимальные условия хроматографии интересующей экспериментатора
- 48. Параметры пиков Коэффициент асимметрии АS - отношение двух отрезков, образуемых на горизонтальной линии, проведенной на высоте
- 49. Эффективность и селективность
- 51. Скачать презентацию