СЕРОЛОГИЧЕСКИЕ РЕАКЦИИ

Август 31, 2022

Главная
Химия
СЕРОЛОГИЧЕСКИЕ РЕАКЦИИ

Содержание

2. Серологические реакции – это реакции между антигенами и антителами in vitro . Цели применения: серодиагностика бактериальных
3. Классификация серологических реакций в зависимости от характера и физического состояния антигена Прямые серологические реакции, основанные на
4. Титр сыворотки – это наиболее высокое разведение сыворотки (наименьшее количество антител), при котором данная серологическая реакция
5. Серологические реакции Реакция агглютинации Реакция преципитации Реакции нейтрализации Реакция связывания комплемента Реакция иммунофлюоресценции Радиоиммунологический анализ Иммуноферментный
6. Реакция агглютинации Реакция агглютинации (agglutinacio - склеивание) - склеивание и выпадение в осадок корпускулярных антигенов: бактерий,
7. Реакция непрямой геммагглютинации РНГА применяют в двух вариантах: с известными антигеном для обнаружения антител или с
8. В положительных случаях в лунке осадок имеет вид тонкой пленки из склеивающихся эритроцитов (зонтик).
9. Реакция преципитации Принцип: При взаимодействиии растворимого антигена с антителом в присутствии электролитов (NaCl) образуется комплекс Аг-Ат
10. Варианты реакции преципитации в жидкой среде - по типу реакции флокуляции , кольцепреципитации. в плотной среде
11. Реакция кольцепреципитации Образование комплекса АГ-АТ - + Реакцию проводят путем наслаивания на иммунную сыворотку антигена
12. Реакция проводится в агаре на стеклах или в чашках Петри . В разные лунки в агаре
13. Полосы преципитации между антигенами в лунках G, E и иммунной сывороткой (антителами) в лунке A.
14. Иммуноэлектрофорез ИЭФ чаще всего используется для исследования антигенной структуры микроорганизмов. Принцип и последовательность проведения реакции Антигенный
16. Иммуноэлектрофорез Лунки, содержащие смесь антигенов Перемещение антигенов Диффузия антител из канавки и образование полос преципитации
18. IgG IgM Серологические реакции, основанные на использовании меток МЕТКИ Ферментные Флюоресцирующие радиоизотопные
19. Иммуноферментный анализ (ИФА или ΕLISA) Метод ИФА или ELISA – это серологическая реакция , в которой
20. ИФА сэндвич-метод ИФА Обнаружение антител Обнаружение антигена
21. ИФА Пример: обнаружение антител к ВИЧ
22. Реакция иммунофлуоресценции (РИФ) РИФ основана на соединении антигенов бактерий и вирусов со специфическими антителами, меченными флюоресцирующими
24. Прямой метод РИФ - непосредственное соединение антигена с меченым флуоресцентным красителем антителом. Непрямой метод (РНИФ) –
25. Люминесцентный микроскоп
26. Реакция связывания комплемента РСК основывается на способности комплемента связываться с комплексом АГ + АТ . Реакция
27. Свойства комплемента Реакция гемолиза. В присутствии комплемента под действием гемолитических антител взвесь эритроцитов превращается в «лаковую
29. Скачать презентацию

Слайд 2

Серологические реакции – это реакции между антигенами и антителами in vitro

.
Цели применения:
серодиагностика бактериальных и вирусных инфекционных заболеваний;
сероидентификация выделенных культур различных микроорганизмов (определение родовой, видовой и типовой принадлежности микроорганизма или его антигенов с известными иммунными сыворотками);
идентификация видовой принадлежности белков (выявление фальсификации мясных и рыбных изделий).

Слайд 3

Классификация серологических реакций в зависимости от характера и физического состояния антигена
Прямые

серологические реакции, основанные на прямом взаимодействии антигена с антителом (агглютинация, преципитация).
Опосредованные реакции – реакции со свидетелями (реакция непрямой гемагглютинации, реакция связывания комплемента).
Реакции с использованием меток (ферментных, флюоресцирующих и т.д.) для антигена или антитела (иммуноферментный анализ, реакция иммунофлюоресценции, радиоиммунный анализ).

Слайд 4

Титр сыворотки – это наиболее высокое разведение сыворотки (наименьшее количество антител),

при котором данная серологическая реакция будет положительной.
Специфичность серологической реакции – способность антигена реагировать только с гомологичным антителом.
Чувствительность серологической реакции - минимальное количество антигенов или антител, которое можно выявить с помощью данной реакции.

Слайд 5

Серологические реакции
Реакция агглютинации
Реакция преципитации
Реакции нейтрализации
Реакция связывания комплемента
Реакция иммунофлюоресценции
Радиоиммунологический анализ
Иммуноферментный метод (ИФА)

Слайд 6

Реакция агглютинации
Реакция агглютинации (agglutinacio - склеивание) - склеивание и выпадение в

осадок корпускулярных антигенов: бактерий, эритроцитов, а также латексных частиц с адсорбированными на них антигенами под влиянием антител в среде с электролитом.

Слайд 7

Реакция непрямой геммагглютинации
РНГА применяют в двух вариантах: с известными антигеном

для обнаружения антител или с известными антителами для выявления антигена. Для постановки РНГА используют эритроцитарные диагностикумы, приготовленные путем адсорбции на эритроцитах антигенов или антител в зависимости от цели исследования.

Слайд 8

В положительных случаях в лунке осадок имеет вид тонкой пленки из

склеивающихся эритроцитов (зонтик).

Слайд 9

Реакция преципитации
Принцип: При взаимодействиии растворимого антигена с антителом в присутствии электролитов

(NaCl) образуется комплекс Аг-Ат в виде нерастворимого преципитата.
РП применяют в двух целях: выявление антигенов с помощью известной иммунной преципитирующей сыворотки или антител с использованием известных антигенов.
Используется как качественный, так и количественный анализ (реакция Манчини).
Очень чувствительная реакция для определения антигенов.
С помощью РП определяют фальсификацию рыбных и мясных изделий.

Слайд 10

Варианты реакции преципитации
в жидкой среде - по типу реакции флокуляции ,

кольцепреципитации.
в плотной среде (в агаре, полиакриламидном геле) - реакция преципитации по Оухтерлони , радиальная иммунодиффузия по Манчини , реакция иммуноэлектрофореза.

Слайд 11

Реакция кольцепреципитации
Образование комплекса АГ-АТ
- +
Реакцию проводят путем наслаивания на иммунную

сыворотку антигена

Слайд 12

Реакция проводится в агаре на стеклах или в чашках Петри .
В

разные лунки в агаре вносится взвесь, содержащая антиген и иммунная сыворотка.
Из лунок антиген и антитела диффундируют в питательную среду, вступают в иммунную реакцию и образуют полосы преципитации.

Реакция преципитации в геле по Оухтерлони

Слайд 13

Полосы преципитации между антигенами в лунках G, E и иммунной сывороткой

(антителами) в лунке A.

Слайд 14

Иммуноэлектрофорез
ИЭФ чаще всего используется для исследования антигенной структуры микроорганизмов.
Принцип и

последовательность проведения реакции
Антигенный комплекс помещают в лунку, которая находится в центре геля, залитого на стеклянную пластинку.
Через гель пропускают электрический ток, в результате происходит перемещение антигенов на неодинаковые расстояния соответственно своей электрофоретической подвижности.
В канавку вносят специфическую иммунную сыворотку.
Антигены и антитела диффундируют в геле навстречу друг другу. В месте их соприкосновения образуются линии преципитации .

Слайд 15

Слайд 16

Иммуноэлектрофорез
Лунки, содержащие смесь антигенов
Перемещение антигенов
Диффузия антител из канавки и образование полос

преципитации

Слайд 17

Слайд 18

IgG
IgM
Серологические реакции, основанные на использовании меток
МЕТКИ
Ферментные
Флюоресцирующие
радиоизотопные

Слайд 19

Иммуноферментный анализ (ИФА или ΕLISA)
Метод ИФА или ELISA – это серологическая

реакция , в которой для визуализации образовавшегося комплекса антиген-антитело используются ферменты-метки (пероксидаза хрена или щелочная фосфатаза). Эти маркерные (индикаторные) ферменты способны расщеплять субстрат и вызывать изменение цвета среды.

Слайд 20

ИФА
сэндвич-метод
ИФА
Обнаружение антител
Обнаружение антигена

Слайд 21

ИФА
Пример: обнаружение антител к ВИЧ

Слайд 22

Реакция иммунофлуоресценции (РИФ)
РИФ основана на соединении антигенов бактерий и

вирусов со специфическими антителами, меченными флюоресцирующими красителями. Образовавшиеся комплексы АГ-АТ становятся хорошо видимыми под люминесцентным микроскопом.
Преимущества РИФ:
простота,
высокая чувствительность,
скорость получения результата.

Слайд 23

Слайд 24

Прямой метод РИФ - непосредственное соединение антигена с меченым флуоресцентным красителем

антителом.
Непрямой метод (РНИФ) – 1) образование комплекса антиген-антитело, 2) выявлении этого комплекса путем обработки его меченым флуоресцентным красителем антигаммаглобулином (АТ к АТ).

Непрямой метод

Прямой метод

Слайд 25

Люминесцентный микроскоп

Слайд 26

Реакция связывания комплемента
РСК основывается на способности комплемента связываться с комплексом АГ

+ АТ . Реакция протекает в две фазы. Первая фаза - взаимодействие антигена и антитела. К исследуемой сыворотке, содержащей антитела, добавляют известный антиген и стандартный комплемент, инкубируют при 37 ° С в течение одного часа. Вторая фаза - выявление результатов реакции при помощи индикаторной гемолитической системы (эритроциты барана и гемолитическая сыворотка кролика, содержащая гемолитические антитела к эритроцитам барана). К смеси антиген + антитело + комплемент добавляют индикаторную систему и вновь инкубируют при 37° С в течение 30 - 60 мин. Если комплемент адсорбировался ранее на комплексе АГ + АТ (в исследуемой сыворотке специфические антитела присутствовали) , то гемолиза эритроцитов не происходит.
При отсутствии же в исследуемой сыворотке специфических антител, комплекс АГ + АТ не образуется и комплемент остается несвязанным. При добавлении гемолитической системы комплемент присоединяется к ней и происходит гемолиз эритроцитов.

Слайд 27

Свойства комплемента
Реакция гемолиза. В присутствии комплемента под действием гемолитических антител взвесь

эритроцитов превращается в «лаковую кровь» вследствие выхода гемоглобина. Реакция гемолиза используется в РСК как индикаторная: для тестирования присутствия или отсутствия свободного комплемента.

СЕРОЛОГИЧЕСКИЕ РЕАКЦИИ

Содержание

Серологические реакции – это реакции между антигенами и антителами in vitro

Классификация серологических реакций в зависимости от характера и физического состояния антигенаПрямые

Титр сыворотки – это наиболее высокое разведение сыворотки (наименьшее количество антител),

Реакция агглютинацииРеакция агглютинации (agglutinacio - склеивание) - склеивание и выпадение в

Реакция непрямой геммагглютинацииРНГА применяют в двух вариантах: с известными антигеном

В положительных случаях в лунке осадок имеет вид тонкой пленки из

Реакция преципитацииПринцип: При взаимодействиии растворимого антигена с антителом в присутствии электролитов

Варианты реакции преципитациив жидкой среде - по типу реакции флокуляции ,

Реакция кольцепреципитацииОбразование комплекса АГ-АТ - +Реакцию проводят путем наслаивания на иммунную

Реакция проводится в агаре на стеклах или в чашках Петри .В

Полосы преципитации между антигенами в лунках G, E и иммунной сывороткой

ИммуноэлектрофорезИЭФ чаще всего используется для исследования антигенной структуры микроорганизмов.Принцип и

ИммуноэлектрофорезЛунки, содержащие смесь антигеновПеремещение антигеновДиффузия антител из канавки и образование полос

IgGIgMСерологические реакции, основанные на использовании метокМЕТКИФерментныеФлюоресцирующиерадиоизотопные

Иммуноферментный анализ (ИФА или ΕLISA)Метод ИФА или ELISA – это серологическая

ИФАсэндвич-метод ИФА Обнаружение антителОбнаружение антигена

ИФА Пример: обнаружение антител к ВИЧ

Реакция иммунофлуоресценции (РИФ) РИФ основана на соединении антигенов бактерий и