Этиологическая диагностика внебольничных инфекций дыхательных путей

Содержание

Слайд 2

МЕТОДЫ ЭТИОЛОГИЧЕСКОЙ ДИАГНОСТИКИ ИНФЕКЦИЙ ДЫХАТЕЛЬНЫХ ПУТЕЙ Культуральные методы выявления возбудителей: -

МЕТОДЫ ЭТИОЛОГИЧЕСКОЙ ДИАГНОСТИКИ ИНФЕКЦИЙ ДЫХАТЕЛЬНЫХ ПУТЕЙ

Культуральные методы выявления возбудителей: - бактериоскопия, посев

клинического материала на питательные среды - идентификация и определение чувствительности к АБ
Некультуральные методы выявления возбудителей: - Экспресс-тесты - Методы амплификации нуклеиновых кислот (ПЦР и др.)
Иммуносерологические исследования

Ежлова Е.Б., и соавт. МУК 4.2.3115 -13. Федеральная служба по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека. Москва, 2013.

Слайд 3

Ведущее значение в идентификации S. pneumoniae, S. pyogenes, H. influenzae, M.

Ведущее значение в идентификации S. pneumoniae, S. pyogenes, H. influenzae, M.

catarrhalis, энтеробактерий, S. aureus, P. aeruginosa
Могут использоваться респираторные образцы (мокрота, орофарингеальный мазок, аспират из синуса и др.), кровь, плевральная жидкость
Возможна идентификация микроорганизмов и определение их чувствительности к АБ

КУЛЬТУРАЛЬНОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ ПРИ ИНФЕКЦИЯХ ДЫХАТЕЛЬНЫХ ПУТЕЙ

Зубков М.Н. . В кн.: Респираторная медицина. Под ред. А.Г. Чучалина М.: ГЭОТАР-Медиа, 2007. Т. 1, С. 238-252. 2. Clinical Microbiology Procedures Handbook. 3d ed. update. L.S. Garcia, editor in chief. ASM Press. Washington, DC. 2010.

Слайд 4

ОСОБЕННОСТИ КУЛЬТУРАЛЬНОГО ИССЛЕДОВАНИЯ МОКРОТЫ (I) Микроскопия мазка, окрашенного по Граму –

ОСОБЕННОСТИ КУЛЬТУРАЛЬНОГО ИССЛЕДОВАНИЯ МОКРОТЫ (I)

Микроскопия мазка, окрашенного по Граму – обязательна!

Оценка

качества образца (х100) (Э < 10 в п/з, Л > 25 в п/з)
Морфология и количество микроорганизмов (х1000, <10 полей) → предварительный диагноз, более точная интерпретация культурального исследования
Грам(+) диплококки

Зубков М.Н. . В кн.: Респираторная медицина. Под ред. А.Г. Чучалина М.: ГЭОТАР-Медиа, 2007. Т. 1, С. 238-252. 2. Clinical Microbiology Procedures Handbook. 3d ed. update. L.S. Garcia, editor in chief. ASM Press. Washington, DC. 2010.

Слайд 5

ОСОБЕННОСТИ КУЛЬТУРАЛЬНОГО ИССЛЕДОВАНИЯ МОКРОТЫ (II) Не все микроорганизмы, выделяющиеся из мокроты

ОСОБЕННОСТИ КУЛЬТУРАЛЬНОГО ИССЛЕДОВАНИЯ МОКРОТЫ (II)

Не все микроорганизмы, выделяющиеся из мокроты имеют клиническое

значение!

Streptococcus viridans
Staphylococcus epidermidis и saprophyticus
Enterococcus spp.
Neisseria spp.
Candida spp.

1. Зубков М.Н. . В кн.: Респираторная медицина. Под ред. А.Г. Чучалина М.: ГЭОТАР-Медиа, 2007. Т. 1, С. 238-252.

Слайд 6

ОСОБЕННОСТИ КУЛЬТУРАЛЬНОГО ИССЛЕДОВАНИЯ КРОВИ ПРИ ИДП Наиболее часто выявляются: S. pneumoniae,

ОСОБЕННОСТИ КУЛЬТУРАЛЬНОГО ИССЛЕДОВАНИЯ КРОВИ ПРИ ИДП

Наиболее часто выявляются: S. pneumoniae, S.

aureus, K. pneumoniae
Целесообразно при тяжелом течении (выше вероятность бактериемии!)
Целесообразно использовать коммерческие флаконы и автоматизированный метод (↓ сроки, ↑ информативность)
При правильном получении образцов – 100% этиологический диагноз!

1. Зубков М.Н. . В кн.: Респираторная медицина. Под ред. А.Г. Чучалина М.: ГЭОТАР-Медиа, 2007. Т. 1, С. 238-252. 2. Clinical Microbiology Procedures Handbook. 3d ed. update. L.S. Garcia, editor in chief. ASM Press. Washington, DC. 2010.

Слайд 7

ФАКТОРЫ, ОПРЕДЕЛЯЮЩИЕ ИНФОРМАТИВНОСТЬ КУЛЬТУРАЛЬНОГО ИССЛЕДОВАНИЯ ПРИ ИДП Получение образцов до начала

ФАКТОРЫ, ОПРЕДЕЛЯЮЩИЕ ИНФОРМАТИВНОСТЬ КУЛЬТУРАЛЬНОГО ИССЛЕДОВАНИЯ ПРИ ИДП

Получение образцов до начала АБ

терапии (даже 1 доза ↓ информативность)
Соблюдать технику получения образцов - мокрота – после обработки полости рта, при глубоком откашливании - кровь – не касаться руками места венепункции, не менее 2-х образцов, не менее 10 мл/образец
Быстрая доставка в лабораторию и/или соблюдение условий хранения образцов

1. Зубков М.Н. . В кн.: Респираторная медицина. Под ред. А.Г. Чучалина М.: ГЭОТАР-Медиа, 2007. Т. 1, С. 238-252. 2. Clinical Microbiology Procedures Handbook. 3d ed. update. L.S. Garcia, editor in chief. ASM Press. Washington, DC. 2010.

Слайд 8

ПРОБЛЕМА НИЗКОЙ ВОСТРЕБОВАННОСТИ КУЛЬТУРАЛЬНОГО ИССЛЕДОВАНИЯ Сроки получения результата… Респираторный образец ~

ПРОБЛЕМА НИЗКОЙ ВОСТРЕБОВАННОСТИ КУЛЬТУРАЛЬНОГО ИССЛЕДОВАНИЯ

Сроки получения результата…

Респираторный образец ~ 48-72 ч
Кровь

~ 72- 120 ч
Слайд 9

Первичный посев, отдельные колонии МО ПРИНЦИП ИДЕНТИФИКАЦИИ МИКРООРГАНИЗМОВ С ПОМОЩЬЮ MALDI-TOF

Первичный посев, отдельные колонии МО

ПРИНЦИП ИДЕНТИФИКАЦИИ МИКРООРГАНИЗМОВ С ПОМОЩЬЮ MALDI-TOF MS

Быстрая экстракция

белков в кислой среде

Узнаем бактерию по «отпечаткам пальцев»… всего за 5-15 мин.

MALDI масс-спектрометр + компьютерная БД (>2800 видов бактерий и грибов)

Слайд 10

Иммунохроматографический тест для выявления растворимого пневмококкового антигена в моче Чувствительность –

Иммунохроматографический тест для выявления растворимого пневмококкового антигена в моче

Чувствительность – 50-80%,

специфичность >90%

ЭКСПРЕСС-ДИАГНОСТИКА ПНЕВМОКОККОВОЙ ПНЕВМОНИИ У ВЗРОСЛЫХ

Тяжелая ВП
Пациенты с непродуктивным кашлем
Предшествующая АБ терапия

1. Ежлова Е.Б., и соавт. МУК 4.2.3115 -13. Федеральная служба по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека. Москва, 2013. 2. Lim W.S., et al. Thorax 2009; 64: iii2-iii55.

Слайд 11

ДИАГНОСТИКА ЛЕГИОНЕЛЛЕЗНОЙ ИНФЕКЦИИ Иммунохроматографический тест (растворимый антиген L.pneumophila 1 серогруппы в

ДИАГНОСТИКА ЛЕГИОНЕЛЛЕЗНОЙ ИНФЕКЦИИ

Иммунохроматографический тест (растворимый антиген L.pneumophila 1 серогруппы в моче)

или тест на основе ИФА

Тяжелая ВП
Известные факторы риска легионеллезной инфекции
Пациенты с непродуктивным кашлем

Чувствительность – 70-95%, специфичность - 95%

Культуральное исследование (инвазивные образцы) и ПЦР – редко, дорогостоящий и трудоемкий метод – используется только при НП!

Ежлова Е.Б., и соавт. МУК 4.2.3115 -13. Федеральная служба по надзору в сфере защиты прав Cпотребителей и благополучия человека. Москва, 2013.

Слайд 12

ЭКСПРЕСС-ТЕСТЫ ПРИ ОСТРЫХ РЕСПИРАТОРНЫХ ИНФЕКЦИЯХ ДЛЯ ВЫЯВЛЕНИЯ БГСА Чувствительность и специфичность

ЭКСПРЕСС-ТЕСТЫ ПРИ ОСТРЫХ РЕСПИРАТОРНЫХ ИНФЕКЦИЯХ ДЛЯ ВЫЯВЛЕНИЯ БГСА

Чувствительность и специфичность для

выявления БГСА >90%
Быстрое получение результата (решение о тактике в режиме реального времени)
Входят в алгоритмы диагностики и лечения ОТФ и контроля за стрептококковой инфекцией
Себестоимость сопоставима с культуральным исследованием

1.Брико Н.И., и соавт. Профилактика стрептококковой (группы А) инфекции". Клинические рекомендации. – М: Министерство здравоохранения Российской Федерации, 2013 – 41с. 2. Промыслова Е.А., и соавт. Педиатрическая фармакология 2013; 10 (6): 10–14.

Слайд 13

ПЦР респираторных образцов – метод выбора Серологические исследования (РСК, ИФА и

ПЦР респираторных образцов – метод выбора
Серологические исследования (РСК, ИФА и

т.д.) – вариабельная чувствительность и специфичность

ДИАГНОСТИКА РЕСПИРАТОРНЫХ ИНФЕКЦИЙ, ВЫЗВАННЫХ “АТИПИЧНЫМИ” ВОЗБУДИТЕЛЯМИ

Mycoplasma pneumoniae

ПЦР респираторных образцов и/или ПИФ (выявление антигенов в респираторных образцах)
Серологические исследования не рекомендуются в связи с отсутствием надежных коммерческих тестов

Chlamydophila pneumoniae

1. Ежлова Е.Б., и соавт. МУК 4.2.3115 -13. Федеральная служба по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека. Москва, 2013. 2. Lim W.S., et al. Thorax 2009; 64: iii2-iii55.

Для ПЦР предпочтителен образец из нижних дыхательных путей, при отсутствии – комбинированный мазок (назо-и орофарингеальный)

Слайд 14

ДИАГНОСТИКА ИНФЕКЦИЙ, ВЫЗВАННЫХ РЕСПИРАТОРНЫМИ ВИРУСАМИ ПЦР/ПЦР-РВ (выявление ДНК/РНК возбудителей) в клинических

ДИАГНОСТИКА ИНФЕКЦИЙ, ВЫЗВАННЫХ РЕСПИРАТОРНЫМИ ВИРУСАМИ

ПЦР/ПЦР-РВ (выявление ДНК/РНК возбудителей) в клинических образцах
Выявление

антигенов в клинических образцах
Иммуносерологические исследования

Наиболее значимо выявление вирусов гриппа!

1. Ежлова Е.Б., и соавт. МУК 4.2.3115 -13. Федеральная служба по надзору в сфере защиты прав Cпотребителей и благополучия человека. Москва, 2013.

Слайд 15

ПЦР В ЭТИОЛОГИЧЕСКОЙ ДИАГНОСТИКЕ РЕСПИРАТОРНЫХ ИНФЕКЦИЙ Мультиплексная тест-система для выявления различных

ПЦР В ЭТИОЛОГИЧЕСКОЙ ДИАГНОСТИКЕ РЕСПИРАТОРНЫХ ИНФЕКЦИЙ

Мультиплексная тест-система для выявления различных

респираторных вирусов (ОРВИ-скрин)
Тест-системы для выявления и дифференциации вирусов гриппа А и В, в том числе H1N1 (пандемический), H3N5 и др.
Мультиплексная тест-система для выявления M. pneumoniae, C. pneumoniae

Ежлова Е.Б., и соавт. МУК 4.2.3115 -13. Федеральная служба по надзору в сфере защиты прав Cпотребителей и благополучия человека. Москва, 2013.

Слайд 16

ЭТИОЛОГИЧЕСКАЯ ДИАГНОСТИКА ПРИ ОСТРОМ БРОНХИТЕ Рутинно не проводится Показана только в

ЭТИОЛОГИЧЕСКАЯ ДИАГНОСТИКА ПРИ ОСТРОМ БРОНХИТЕ

Рутинно не проводится
Показана только в отдельных клинических

случаях: - подозрение на коклюш - эпидемия гриппа, группа высокого риска развития осложнений
Клинический материал для исследования: - назофарингеальный или орофарингеальный мазок/смыв, трахеальный аспират, мокрота
Прямое обнаружение антигенов (вирусы гриппа, РС вирус), ПЦР-РВ (др. респираторные вирусы), ПЦР и культуральное исследование (B. pertussis)

Walsh E. Acute bronchitis. In: In: Mandell GL, Bennett JE, Dolin R. (eds). Principles & Practice of Infectious Diseases. 7th ed. Churchill Livingstone, 2010: 873-6

Слайд 17

ЭТИОЛОГИЧЕСКАЯ ДИАГНОСТИКА ПРИ ВНЕБОЛЬНИЧНОЙ ПНЕВМОНИИ Амбулаторные пациенты – рутинно не показана,

ЭТИОЛОГИЧЕСКАЯ ДИАГНОСТИКА ПРИ ВНЕБОЛЬНИЧНОЙ ПНЕВМОНИИ

Амбулаторные пациенты – рутинно не показана, проводится

только при неэффективности стартовой АБ терапии или по эпидемиологическим показаниям

бактериоскопия и культуральное исследование мокроты/трахеального аспирата (тяжелая ВП)
культуральное исследование крови (тяжелая ВП)
культуральное исследование плевральной жидкости (если есть показания для плевральной пункции)
экспресс-диагностика легионеллезной и пневмококковой антигенурии (тяжелая ВП, эпид. факторы риска)
ПЦР/экспресс-тесты на вирусы гриппа А (по показаниям)

Госпитализированные пациенты

Проект клинических рекомендаций по ВП у взрослых, 2018 г.

Слайд 18

ЭТИОЛОГИЧЕСКАЯ ДИАГНОСТИКА ПРИ ОБОСТРЕНИИ ХОБЛ Walsh E. Acute bronchitis. In: In:

ЭТИОЛОГИЧЕСКАЯ ДИАГНОСТИКА ПРИ ОБОСТРЕНИИ ХОБЛ

Walsh E. Acute bronchitis. In: In: Mandell

GL, Bennett JE, Dolin R. (eds). Principles & Practice of Infectious Diseases. 7th ed. Churchill Livingstone, 2010: 873-6

При неосложненном течении ХОБЛ не проводится → эмпирическая АБ терапия
Показания для микробиологического исследования:
- частые обострения (> 4 обострений в год)
- хроническая продукция гнойной мокроты
- тяжелое обострение ХОБЛ
Клиническим материалом для исследования, как правило, является мокрота (у пациентов с тяжелым обострением – инвазивные респираторные образцы )

Слайд 19

ЭТИОЛОГИЧЕСКАЯ ДИАГНОСТИКА ПРИ ОСТРОМ СРЕДНЕМ ОТИТЕ Средний отит Обычно – эмпирическая

ЭТИОЛОГИЧЕСКАЯ ДИАГНОСТИКА ПРИ ОСТРОМ СРЕДНЕМ ОТИТЕ

Средний отит
Обычно – эмпирическая терапия!
-

при целостной барабанной перепонке – материл, полученный путем тимпанопункции - при перфорированной – мазок отделяемого из полости среднего уха
Слайд 20

ОСТРЫЙ СРЕДНИЙ ОТИТ – ОШИБКИ ИНТЕРПРЕТАЦИИ Staphylococcus aureus Энтеробактерии Pseudomonas aeruginosa

ОСТРЫЙ СРЕДНИЙ ОТИТ – ОШИБКИ ИНТЕРПРЕТАЦИИ

Staphylococcus aureus
Энтеробактерии
Pseudomonas aeruginosa
Candida spp.
Staphylococcus spp.
Enterococcus

spp.

не имеют
этиологического
значения

этиологически значимы при наружном отите

Слайд 21

ЭИТОЛОГИЧЕСКАЯ ДИАГНОСТИКА ПРИ ОСТРОМ РИНОСИНУСИТЕ Синусит Обычно – эмпирическая терапия! Мазок

ЭИТОЛОГИЧЕСКАЯ ДИАГНОСТИКА ПРИ ОСТРОМ РИНОСИНУСИТЕ

Синусит
Обычно – эмпирическая терапия!
Мазок из среднего носового

хода, мазок из носоглотки – недостоверны
Материал, полученный при эндоскопии синуса – велика вероятность контаминации
Аспират из синуса – количественное исследование – «золотой стандарт» бактериологической диагностики
Промывные воды синуса