Иммуно- турбидиметрический анализ

Август 20, 2022

Главная
Медицина
Иммуно- турбидиметрический анализ

Содержание

2. Основные аналиты, определяемые иммунотурбидиметрическим методом САХАРНЫЙ ДИАБЕТ ЛИПИДНЫЙ ОБМЕН БЕЛКИ ОСТРОЙ ФАЗЫ ИММУННЫЙ СТАТУС Гликозилированный гемоглобин
3. Турбидиметрия – это … метод исследования светорассеивающих (мутных) растворов и определения концентрации веществ в них по
4. Принцип детекции ФОТОМЕТРИЯ фотоприемник раствор поглощает свет
5. раствор рассеивает свет фотоприемник ТУРБИДИМЕТРИЯ Принцип детекции
6. НЕФЕЛОМЕТРИЯ раствор рассеивает свет фотоприемник Принцип детекции
7. Приборы В качестве турбидиметра можно использовать большинство биохимических анализаторов.
8. Кривая Хайдельберга-Кендала Эквивалентность Избыток антитела Избыток антигена Количество преципитата Концентрация антигена Сложная нелинейная зависимость концентрации антигена
9. Калибровочная кривая измерения проводят на восходящем участке кривой используют несколько способов интерполяции качество «подгонки» кривой проверяется
10. Калибровочный график строится для каждого индивидуального белка, для каждого прибора, при любом изменении условий регистрации и
11. Методы измерения Развитие мутности (увеличение абсорбции) во времени. КОНЕЧНАЯ ТОЧКА КИНЕТИКА ФИКСИРОВАНОЕ ВРЕМЯ Конечная точка –
12. Эффект прозоны Определение проводится в зоне избытка антител. Прозона - зона избытка антигена При высокой концентрации
13. Водорастворимые полимеры (полиэтиленгликоль) Ускорение реакции. РЕАГЕНТ ОБРАЗЕЦ ПРЕЦИПИТАТ + Механизм реакции
14. Механизм реакции Частицы полистирола (латекс) Ускорение реакции. d = 50-1000 нм. Увеличение чувствительности метода (10 М).
15. Сравнение методов
16. Аналитические характеристики ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТЬ – минимальное содержание аналита, достоверно определяемое набором. КОЭФФИЦИЕНТ ВАРИАЦИИ – относительный показатель разброса
17. Контрольные материалы и контроль качества В качестве контрольных материалов необходимо использовать специальные контрольные сыворотки, содержащие индивидуальные
18. СРБ С-реактивный белок Один из основных белков острой фазы воспаления. Неспецифический показатель воспаления. Многократно (в 10-100
19. Присутствует в крови в норме у здоровых людей. Доказана прогностическая значимость СРБ в оценке риска развития
20. СРБ С-реактивный белок Диагностика воспаления (нормальная концентрация СРБ исключает острое воспаление у взрослых). Контроль эффективности лечения
21. Уровни СРБ при различных воспалительных процессах
22. СРБ Преимущества перед определением СОЭ и лейкоцитоза
23. РФ Ревматоидный фактор РФ используется для диагностики и мониторинга ревматоидного артрита. Аутоантитела, принадлежащие ко всем классам
24. Диагностика Оценка тяжести процесса Выбор тактики лечения Оценка эффективности проводимой терапии РФ не специфический показатель для
25. Альбумин в моче микроальбумин Определение альбумина в моче – единственный рутинный метод, позволяющий диагностировать начинающееся поражение
26. Стадии развития ДН по C.E. Mogensen Альбумин в моче микроальбумин
27. Только первые 3 стадии ДН могут быть обратимыми при рано начатом лечении. Для своевременной диагностики необходимо
28. Тест на протеинурию Тест на МАУ да нет нет ДН стадия МАУ Критерий назначения: стаж диабета
29. Благодарю за внимание www.vector-best.ru
30. Наборы для определения микроальбумина
31. Наборы для определения СРБ и РФ
34. Скачать презентацию

Слайд 2

Основные аналиты, определяемые
иммунотурбидиметрическим методом
САХАРНЫЙ ДИАБЕТ
ЛИПИДНЫЙ ОБМЕН
БЕЛКИ ОСТРОЙ ФАЗЫ
ИММУННЫЙ СТАТУС
Гликозилированный гемоглобин
Альбумин (в

моче)

Иммуноглобулин G
Иммуноглобулин М
Иммуноглобулин А
Комплемент С3
Комплемент С4

Аполипопротеин AI
Аполипопротеин В
Липопротеид (а)

С-реактивный белок
α1-Кислый гликопротеид
Α1-Антитрипсин
Фибриноген

МАРКЁРЫ ИНФЕКЦИОННЫХ И ИММУННЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ

Ревматоидный фактор
Антистрептолизин О

Слайд 3

Турбидиметрия – это …
метод исследования светорассеивающих (мутных) растворов и определения концентрации

веществ в них по интенсивности прошедшего через исследуемый раствор светового потока.

Слайд 4

Принцип детекции
ФОТОМЕТРИЯ
фотоприемник
раствор поглощает свет

Слайд 5

раствор рассеивает свет
фотоприемник
ТУРБИДИМЕТРИЯ
Принцип детекции

Слайд 6

НЕФЕЛОМЕТРИЯ
раствор рассеивает свет
фотоприемник
Принцип детекции

Слайд 7

Приборы
В качестве турбидиметра можно использовать большинство биохимических анализаторов.

Слайд 8

Кривая Хайдельберга-Кендала
Эквивалентность
Избыток
антитела
Избыток
антигена
Количество
преципитата
Концентрация
антигена
Сложная нелинейная зависимость концентрации антигена от количества образующегося преципитата.
Heidelberg &

Kendall, 1929.

Слайд 9

Калибровочная кривая
измерения проводят на восходящем участке кривой
используют несколько способов интерполяции
качество «подгонки»

кривой проверяется по отклонению от истинного значения в контрольных материалах

линейная
кубический полином
сплайн
логит-регрессия

С (конц.)

А (опт. плотн.)

С1

С2

С3

С4

С5

А4

А3

А2

А1

А5

Слайд 10

Калибровочный график строится для каждого индивидуального белка, для каждого прибора, при

любом изменении условий регистрации и периодически по мере проведения исследования.
Калибровочный график в виде прямой: скорее исключение,
чем правило.

С (конц.)

А (опт. плотн.)

С1

С2

С3

С4

С5

А4

А3

А2

А1

А5

С (конц.)

А (опт. плотн.)

С1

А1

Калибровочная кривая

Слайд 11

Методы измерения
Развитие мутности (увеличение абсорбции) во времени.
КОНЕЧНАЯ
ТОЧКА
КИНЕТИКА
ФИКСИРОВАНОЕ
ВРЕМЯ
Конечная точка – измерение проводят

относительно холостой пробы.
Кинетика – измерение скорости реакции.
Фиксированное время – первое измерение вскоре после начала реакции, второе – через 3-5 минут. Возможно измерение первой точки до начала реакции.

Слайд 12

Эффект прозоны
Определение проводится в зоне избытка антител.
Прозона - зона избытка антигена
При

высокой концентрации белка пробу необходимо разбавить и провести повторное измерение.

Слайд 13

Водорастворимые полимеры (полиэтиленгликоль)
Ускорение реакции.
РЕАГЕНТ
ОБРАЗЕЦ
ПРЕЦИПИТАТ
+
Механизм реакции

Слайд 14

Механизм реакции
Частицы полистирола (латекс)
Ускорение реакции.
d = 50-1000 нм.
Увеличение чувствительности метода (10

М).

-9-(-11)

РЕАГЕНТ

ОБРАЗЕЦ

ПРЕЦИПИТАТ

Слайд 15

Сравнение методов

Слайд 16

Аналитические характеристики
ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТЬ – минимальное содержание аналита, достоверно определяемое набором.
КОЭФФИЦИЕНТ ВАРИАЦИИ –

относительный показатель разброса результатов определения аналита, рассчитанный как отношение среднеквадратичного отклонения к среднеарифметическому, %.
ОБЛАСТЬ ОПРЕДЕЛЕНИЯ – интервал концентраций аналита внутри которого его можно правильно определять при помощи данного набора с отклонением от истинного значения не превышающим К.В.
ПРОЗОНА – нисходящая зона кривой доза-ответ, в которой определяемая концентрация аналита будет не верна.

Слайд 17

Контрольные материалы
и контроль качества
В качестве контрольных материалов необходимо использовать специальные контрольные

сыворотки, содержащие индивидуальные белки, концентрация которых измерена турбидиметрическим методом с использованием иммунохимической реакции.
Контроль качества определения индивидуальных белков осуществляют в соответствие с приказом Минздрава РФ от 26.05.03 № 220 и ОСТ 91500.13.0001-2003.
Калибраторы, входящие в состав наборов, должны быть аттестованы относительно стандартов рекомендованных ВОЗ (certified reference material - CRM470).

Слайд 18

СРБ
С-реактивный белок
Один из основных белков острой фазы воспаления. Неспецифический показатель воспаления.
Многократно

(в 10-100 раз) увеличивается в ответ на воспалительные реакции, паразитарные инфекции, травмы и опухоли.
Повышение уровня через 6-10 ч.
Имеет прогностическое значение течения болезни.

Слайд 19

Присутствует в крови в норме у здоровых людей.
Доказана прогностическая

значимость СРБ в оценке риска развития сердечно-сосудистых заболеваний.

СРБ

С-реактивный белок

Увеличение концентрации СРБ в пердела нормальных значений является индикатором атеросклероза (3-10 мг/л).

Самостоятельный метод (высокочувствительный СРБ).

Слайд 20

СРБ
С-реактивный белок
Диагностика воспаления (нормальная концентрация СРБ исключает острое воспаление у взрослых).
Контроль

эффективности лечения - антибиотикотерапия.
Осложнения, персистенция возбудителей инфекции.
Дифференциальная диагностика бактериальных и вирусных инфекций.

Слайд 21

Уровни СРБ при различных воспалительных процессах

Слайд 22

СРБ
Преимущества перед определением СОЭ и лейкоцитоза

Слайд 23

РФ
Ревматоидный фактор
РФ используется для диагностики и мониторинга ревматоидного артрита.
Аутоантитела, принадлежащие ко

всем классам иммуноглобулинов, способные связываться с Fc-фрагментами измененных или комплексированных молекул IgG человека.

Выявляется у 70-80% пациентов с РА. 20% - «серонегативный» РА.
Определяется через 3-6 месяца после начала заболевания.
Высокий титр – прогрессирующее течение, неблагоприятный прогноз.

Обязательный критерий при обследовании пациентов с ревматоидным артритом (РА).

Слайд 24

Диагностика
Оценка тяжести процесса
Выбор тактики лечения
Оценка эффективности проводимой терапии
РФ не специфический

показатель для РА, выявляют при других заболеваниях (СКВ, туберкулез, инф.эндокардит, вир.гепатит) и у здоровых людей.

ЗДОРОВЫЕ ЛЮДИ
среднего возраста – 2%
старше 65 лет – 20%
старше 80 лет – 30%

РФ

Область применения

Слайд 25

Альбумин в моче
микроальбумин
Определение альбумина в моче – единственный рутинный метод, позволяющий

диагностировать начинающееся поражение клубочков, канальцев почек или нарушении селективности фильтрации ионов по заряду.

ДН-специфическое поражение почек при сахарном диабете, сопровождающееся формированием узелкового или диффузного гломерулосклероза, терминальная стадия которого характеризуется развитием хронической почечной недостаточности (ХПН)

ДН в терминальной стадии приводит к инвалидизации и затем к смерти
ДН с частотой 40-50% осложняет СД 1 и в 15-30% СД

Слайд 26

Стадии развития ДН по C.E. Mogensen
Альбумин в моче
микроальбумин

Слайд 27

Только первые 3 стадии ДН могут быть обратимыми при рано начатом

лечении.
Для своевременной диагностики необходимо использование высокочувствительных методов, позволяющих выявлять небольшие количества альбумина в моче.
На стадии протеинурии терапия нарушений углеводного обмена уже не способна остановить или существенно затормозить быстрое прогрессирование ДН.
Определение уровня общего белка наиболее эффективно на стадии протеинурии.

Следует помнить

Слайд 28

Тест на протеинурию
Тест на МАУ
да
нет
нет
ДН стадия МАУ
Критерий назначения: стаж диабета
ПГК 80-120

мг/л (31%)

Оценка информативности методов определения МАУ для ранней диагностики ДН у пациентов с СД 2 типа
ГОУ ВПО НГМУ Росздрава; МБУЗ ГКБ №1, ЗАО «Вектор-Бест»

Альбумин в моче

Формирование группы риска

Квота на анализ: 0,5

Слайд 29

Благодарю за внимание
www.vector-best.ru

Слайд 30

Наборы для определения микроальбумина

Слайд 31

Наборы для определения СРБ и РФ

Слайд 32

Иммуно- турбидиметрический анализ

Содержание

Турбидиметрия – это …метод исследования светорассеивающих (мутных) растворов и определения концентрации

Принцип детекцииФОТОМЕТРИЯфотоприемникраствор поглощает свет

раствор рассеивает светфотоприемникТУРБИДИМЕТРИЯПринцип детекции

НЕФЕЛОМЕТРИЯраствор рассеивает светфотоприемникПринцип детекции

ПриборыВ качестве турбидиметра можно использовать большинство биохимических анализаторов.

Калибровочная криваяизмерения проводят на восходящем участке кривойиспользуют несколько способов интерполяциикачество «подгонки»

Калибровочный график строится для каждого индивидуального белка, для каждого прибора, при

Методы измеренияРазвитие мутности (увеличение абсорбции) во времени.КОНЕЧНАЯТОЧКАКИНЕТИКАФИКСИРОВАНОЕВРЕМЯКонечная точка – измерение проводят

Эффект прозоныОпределение проводится в зоне избытка антител.Прозона - зона избытка антигенаПри

Водорастворимые полимеры (полиэтиленгликоль)Ускорение реакции.РЕАГЕНТОБРАЗЕЦПРЕЦИПИТАТ+Механизм реакции

Механизм реакцииЧастицы полистирола (латекс)Ускорение реакции.d = 50-1000 нм.Увеличение чувствительности метода (10

Сравнение методов

Аналитические характеристикиЧУВСТВИТЕЛЬНОСТЬ – минимальное содержание аналита, достоверно определяемое набором.КОЭФФИЦИЕНТ ВАРИАЦИИ –

Контрольные материалыи контроль качестваВ качестве контрольных материалов необходимо использовать специальные контрольные

СРБС-реактивный белокОдин из основных белков острой фазы воспаления. Неспецифический показатель воспаления.Многократно

Присутствует в крови в норме у здоровых людей. Доказана прогностическая

СРБС-реактивный белокДиагностика воспаления (нормальная концентрация СРБ исключает острое воспаление у взрослых).Контроль

Уровни СРБ при различных воспалительных процессах

СРБПреимущества перед определением СОЭ и лейкоцитоза

РФРевматоидный факторРФ используется для диагностики и мониторинга ревматоидного артрита.Аутоантитела, принадлежащие ко

ДиагностикаОценка тяжести процесса Выбор тактики леченияОценка эффективности проводимой терапииРФ не специфический

Альбумин в мочемикроальбуминОпределение альбумина в моче – единственный рутинный метод, позволяющий

Стадии развития ДН по C.E. Mogensen Альбумин в мочемикроальбумин

Только первые 3 стадии ДН могут быть обратимыми при рано начатом

Тест на протеинуриюТест на МАУданетнетДН стадия МАУКритерий назначения: стаж диабетаПГК 80-120

Благодарю за вниманиеwww.vector-best.ru

Наборы для определения микроальбумина

Наборы для определения СРБ и РФ

Похожие презентации

Турбидиметрия – это …
метод исследования светорассеивающих (мутных) растворов и определения концентрации

Принцип детекции
ФОТОМЕТРИЯ
фотоприемник
раствор поглощает свет

раствор рассеивает свет
фотоприемник
ТУРБИДИМЕТРИЯ
Принцип детекции

НЕФЕЛОМЕТРИЯ
раствор рассеивает свет
фотоприемник
Принцип детекции

Приборы
В качестве турбидиметра можно использовать большинство биохимических анализаторов.

Калибровочная кривая
измерения проводят на восходящем участке кривой
используют несколько способов интерполяции
качество «подгонки»

Методы измерения
Развитие мутности (увеличение абсорбции) во времени.
КОНЕЧНАЯ
ТОЧКА
КИНЕТИКА
ФИКСИРОВАНОЕ
ВРЕМЯ
Конечная точка – измерение проводят

Эффект прозоны
Определение проводится в зоне избытка антител.
Прозона - зона избытка антигена
При

Водорастворимые полимеры (полиэтиленгликоль)
Ускорение реакции.
РЕАГЕНТ
ОБРАЗЕЦ
ПРЕЦИПИТАТ
+
Механизм реакции

Механизм реакции
Частицы полистирола (латекс)
Ускорение реакции.
d = 50-1000 нм.
Увеличение чувствительности метода (10

Аналитические характеристики
ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТЬ – минимальное содержание аналита, достоверно определяемое набором.
КОЭФФИЦИЕНТ ВАРИАЦИИ –

Контрольные материалы
и контроль качества
В качестве контрольных материалов необходимо использовать специальные контрольные

СРБ
С-реактивный белок
Один из основных белков острой фазы воспаления. Неспецифический показатель воспаления.
Многократно

Присутствует в крови в норме у здоровых людей.
Доказана прогностическая

СРБ
С-реактивный белок
Диагностика воспаления (нормальная концентрация СРБ исключает острое воспаление у взрослых).
Контроль

СРБ
Преимущества перед определением СОЭ и лейкоцитоза

РФ
Ревматоидный фактор
РФ используется для диагностики и мониторинга ревматоидного артрита.
Аутоантитела, принадлежащие ко

Диагностика
Оценка тяжести процесса
Выбор тактики лечения
Оценка эффективности проводимой терапии
РФ не специфический

Альбумин в моче
микроальбумин
Определение альбумина в моче – единственный рутинный метод, позволяющий

Стадии развития ДН по C.E. Mogensen
Альбумин в моче
микроальбумин

Тест на протеинурию
Тест на МАУ
да
нет
нет
ДН стадия МАУ
Критерий назначения: стаж диабета
ПГК 80-120

Благодарю за внимание
www.vector-best.ru