Выводы
6. Нейропротекторный эффект наномолярных концентраций уабаина при эксайтотоксическом стрессе реализуется по
двум направлениям, которые характеризуются различной скоростью ответов. Первое – стабилизация Ca2+ клиренса через образование функиональных групп Na+/К+–АТФаза/NCX и быструю откачку Ca2+ после первичной кальциевой дерегуляции, вызванной агонистами глутаматных рецепторов. Этот ответ проявляется сразу и является быстрым. Второе – инициация внутриклеточных антиапоптотических сигнальных каскадов, которая выражается в экспрессии белка Bcl-2 и восстановлении нормальных клеточных функций, с затратой большего времени (десятки минут – часы), что характеризует этот ответ как медленный.
1. Уабаин в условиях эксайтотоксического стресса оказывает нейропротекторное воздействие, повышая выживаемсть кортикальных нейронов путём купирования развития апоптоза в результате стабилизации клеточного метаболизма, отражением чего является повышение экспрессии антиапоптотического белка Bcl-2. Нейропротекторное действие уабаина сохраняется в интервале двух порядков субнаномолярых концентраций от 0,01 нМ до 1 нМ.
2. В субнаномолярных концентрациях уабаин не оказывает на кортикальные нейроны токсического влияния - соотношение живых, некротических и апоптотических клеток соответствует интактной культуре. Собственный цитотокчический эффект уабаина развивается, начиная с концентрации 10 нМ, определяется, очевидно, ингибированием ферментативной активности Na+/K+-АТФазы и развивается по пути некроза. Нейропротенторное действие уабаина не связано с транспортной функцией этого фермента.
3. В культуре нейронов коры головного мозга в покое происходит неквантовое тоническое высвобождение глутамата, который в условиях нарушения функционирования глутаматных транспортеров может обеспечивать выброс нейромедиатора, достаточный для запуска нейродегенеративных процессов.
4. Действие NMDA и КА сопровождается генерацией входящих деполяризующих токов и значительным повышением частоты сВПСТ. Увеличение частоты спонтанных синаптических токов полностью нивелируется уабаином в концентрации 1 нМ и определяется увеличением концентрацией свободного кальция в пресинаптических терминалях. Загрузка нейронов хелатором Са2+ ВАРТА, аналогично 1 нМ уабаина, вызывает уменьшение частоты сВПСТ при действии NMDA.
5. При длительной аппликации насыщяющих концентраций NMDA уровень [Са2+]i вырастает и характеризуется двумя волнами внутриклеточной кальциевой дерегуляции, первичной – в связи с открытием каналов рецепторов и вторичной – в связи с нарушением целостности митоходриальных депо. Уабаин в наномолярных концентрациях существенно ослабляет рост [Са2+]i , приводя её к контрольным значениям.