Жидкостная хроматография

Схема устройства для ВЭЖХ

Pump

Autosampler

Column

Oven

Detector

Reservoir

Data processor

Degasser

НАСОСНЫЕ СИСТЕМЫ

К насосам предъявляются следующие требования:
генерация давления до 15 МПа
химическая стойкость
обеспечение

СИСТЕМЫ ВВОД ПРОБЫ

Введение объемов от 5 до 500 мкл,
петлевой дозатор

Детектор: рефрактометр, УФ-детектор
ЭХД
рефрактометр (отклоняющий)

УФ-детектор

В ВЭЖХ вводится фактор ёмкости

Селективность – величина, отражающая способность колонки к

Типы набивок в жидкостной хроматографии

А – объемно-пористые макрочастицы (40-60 мкм)
В –

СОРБЕНТЫ

Заполнение колонок частицами размером менее 20мкм является отдельной проблемой. Высокая поверхностная

НЕПОДВИЖНЫЕ ФАЗЫ

В качестве неподвижных фаз могут служить жидкости иммобилизованные на носители.
Носитель

Виды ВЭЖХ

нормально-фазовая
НФ
сорбент – полярный
элюент - неполярный

обращённо-фазовая
ОФ
сорбент – неполярный
элюент - полярный

Обращённо-фазовая хроматография

Наиболее часто используются алкильные группы С18, С8 – они образуют цепочную

Нормально-фазовая хроматография

Ион-парный ОФ-режим

Для ионных соединений характерно, что в
зависимости от рН
они

Примеры

Растворенные газы, которые могут приводить к образованию пузырьков и мешать детектированию,

Цель градиентного элюирования - проблемы в изократическом режиме-

В изократическом режиме

Долгое время

- Решение -

Градиентное изменение состава подвижной фазы

Концентрация метанола в подвижной фазе

Короткое

ВЭЖХ ионной хроматографии для разделения ионов с использованием ионообменников