Фрагментация ДНК сперматозоидов человека

Август 22, 2022

Главная
Медицина
Фрагментация ДНК сперматозоидов человека

Содержание

2. Этиология мужского бесплодия 20% До 20% случаев идиопатического бесплодия связано с нарушением целостности ДНК сперматозоидов SCSA
3. Фрагментация ДНК определяется наличием однонитевых и двунитевых разрывов Причины, приводящие к возникновению разрывов в ДНК сперматозоида:
4. ОСОБЕННОСТИ СТРУКТУРНОЙ ОРГАНИЗАЦИИ ХРОМАТИНА СПЕРМАТОЗИОДА ЧЕЛОВЕКА замена гистоновых белков на протамины 10-15% остаточных гистонов по сравнению
5. НАРУШЕНИЕ КОМПАКТИЗАЦИИ ХРОМАТИНА СПЕРМАТОЗОИДА В СПЕРМИОГЕНЕЗЕ В процессе замены гистонов на более основные белки для снятия
6. ОКИСЛИТЕЛЬНЫЙ СТРЕСС 8-гидрокси-2’деоксигуанозин (8-OHdG) – модифицированное основание
7. АПОПТОЗ Апоптоз представляет собой результат реализации генетически запрограммированной клеточной гибели Схема отбора сперматозоидов с использованием Аннексин
8. В норме в 50-60% мужских половых клеток, вступающих в первое деление мейоза, запускается процесс апоптоза Связь
9. МЕТОДЫ ДЕТЕКЦИИ ФРАГМЕНТАЦИИ ДНК СПЕРМАТОЗОИДА Прямые методы исследования Непрямые методы исследования Terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated deoxyuridine triphosphate-nick-end
10. Метод Terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated deoxyuridine triphosphate-nick-end labelling assay (TUNEL) Сперматозоиды с а) интактной ДНК б) фрагментированной
11. Метод Comet Assay Comet assay
12. ядра сперматозоидов с фрагментированной ДНК не развивают ореол дисперсии или ореол минимален петли ДНК формируют ореол
13. Оценка целостности ДНК сперматозоида с помощью окрашивания красителем акридиновым оранжевым Метод Sperm Chromatin Structure Assay (SCSA)
14. Прогностическое значение фрагментации ДНК Тип повреждения ДНК Участки ДНК, в которых произошло нарушение целостности Метод оценки
15. Выбор сперматозоида для оплодотворения Маркеры целостности ДНК сперматозоида Степень повреждения ДНК единичного сперматозоида WHO, 2010 Репарация
16. ВЛИЯНИЕ ФРАГМЕНТАЦИИ ДНК СПЕРМАТОЗОИДОВ НА ИСХОД ПРОГРАММ ВРТ Внутриматочная инсеминация Sperm Chromatin. Edited by Zini A.,
17. ЭКО vs. ЭКО/ICSI Sperm Chromatin. Edited by Zini A., Agarwal A. // Springer.- 2011.- 512pp.
18. Фрагментация ДНК сперматозоидов и прерывание беременности Robinson L., Gallos I., Corner S., et al. The effect
20. Скачать презентацию

Слайд 2

Этиология мужского бесплодия
20%
До 20% случаев идиопатического бесплодия связано с нарушением целостности

ДНК сперматозоидов

SCSA Diagnostic Business Briefing. Sperm DNA Fragmentation. The role of the Urologist // Male Infertility.- 2005. – 4p.

Слайд 3

Фрагментация ДНК определяется наличием однонитевых и двунитевых разрывов
Причины, приводящие к

возникновению разрывов в ДНК сперматозоида:

нарушение компактизации хроматина в процессе спермиогенеза
окислительный стресс
апоптоз

TUNEL assay

Слайд 4

ОСОБЕННОСТИ СТРУКТУРНОЙ ОРГАНИЗАЦИИ ХРОМАТИНА СПЕРМАТОЗИОДА ЧЕЛОВЕКА
замена гистоновых белков на протамины
10-15% остаточных

гистонов
по сравнению с ДНК соматической клетки ДНК сперматозоида менее сверхспирализована
доменная организация хроматина: структура тороидов и линкерные области

R.E. Braun. Packaging Paternal Chromosomes with Protamine // Nature Genetics.- 2001.- V.21.- p.10-12.

Слайд 5

НАРУШЕНИЕ КОМПАКТИЗАЦИИ ХРОМАТИНА СПЕРМАТОЗОИДА В СПЕРМИОГЕНЕЗЕ
В процессе замены гистонов на более

основные белки для снятия торсионного напряжения требуется работа эндонуклеазы – топоизомеразы II

Протамины P1 и P2

Seychelle M. Vos, Elsa M. Tretter, Bryan H. Schmidt & James M. BergerAll tangled up: how cells direct, manage and exploit topoisomerase function // Nature Reviews Molecular Cell Biology.- 2012.- V.12.- p.827-841.

Слайд 6

ОКИСЛИТЕЛЬНЫЙ СТРЕСС
8-гидрокси-2’деоксигуанозин (8-OHdG) – модифицированное основание

Слайд 7

АПОПТОЗ
Апоптоз представляет собой результат реализации генетически запрограммированной клеточной гибели
Схема отбора сперматозоидов

с использованием Аннексин V - меченых микросфер

Основной путь запуска апоптоза

Слайд 8

В норме в 50-60% мужских половых клеток, вступающих в первое деление

мейоза, запускается процесс апоптоза

Связь между концентрацией сперматозоидов в эякуляте (*106 ) и долей Fas-поизитвных сперматозиодов

Слайд 9

МЕТОДЫ ДЕТЕКЦИИ ФРАГМЕНТАЦИИ ДНК СПЕРМАТОЗОИДА
Прямые методы исследования
Непрямые методы исследования
Terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated

deoxyuridine triphosphate-nick-end labelling assay (TUNEL)

Comet assay

окрашивание с помощью акридинового оранжевого

Sperm Chromaitn Structure Assay (SCSA)

Слайд 10

Метод Terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated deoxyuridine triphosphate-nick-end labelling assay (TUNEL)
Сперматозоиды с

а) интактной ДНК б) фрагментированной ДНК
TUNEL assay

а)

б)

Схема TUNEL assay

In Situ Cell Death Detection Kit, Fluorescein, Roche (Germany)

Слайд 11

Метод Comet Assay
Comet assay

Слайд 12

ядра сперматозоидов с фрагментированной ДНК не развивают ореол дисперсии или

ореол минимален

петли ДНК формируют ореол дисперсии хроматина

Слайд 13

Оценка целостности ДНК сперматозоида с помощью окрашивания красителем акридиновым оранжевым
Метод Sperm

Chromatin Structure Assay (SCSA)

Слайд 14

Прогностическое значение фрагментации ДНК
Тип повреждения ДНК
Участки ДНК, в которых произошло

нарушение целостности

Метод оценки целостности ДНК

SCSA

COMET assay

TUNEL assay

Слайд 15

Выбор сперматозоида для оплодотворения
Маркеры целостности ДНК сперматозоида
Степень повреждения ДНК единичного сперматозоида
WHO,

2010

Репарация повреждений ДНК сперматозоида ферментами ооцита

Повреждения ДНК, происходящие при предобработке спермы для оплодотворения

Слайд 16

ВЛИЯНИЕ ФРАГМЕНТАЦИИ ДНК СПЕРМАТОЗОИДОВ НА ИСХОД
ПРОГРАММ ВРТ
Внутриматочная инсеминация
Sperm Chromatin. Edited

by Zini A., Agarwal A. // Springer.- 2011.- 512pp.

Слайд 17

ЭКО vs. ЭКО/ICSI
Sperm Chromatin. Edited by Zini A., Agarwal A. //

Springer.- 2011.- 512pp.

Слайд 18

Фрагментация ДНК сперматозоидов и прерывание беременности
Robinson L., Gallos I., Corner S.,

et al. The effect of sperm DNA fragmentation on miscarriage rates: a
systematic review and meta-analysis // HumRep.- 2012.- V.0. -№0.- p.1-10.

Фрагментация ДНК сперматозоидов человека

Содержание

Этиология мужского бесплодия20%До 20% случаев идиопатического бесплодия связано с нарушением целостности

Фрагментация ДНК определяется наличием однонитевых и двунитевых разрывов Причины, приводящие к

ОСОБЕННОСТИ СТРУКТУРНОЙ ОРГАНИЗАЦИИ ХРОМАТИНА СПЕРМАТОЗИОДА ЧЕЛОВЕКАзамена гистоновых белков на протамины10-15% остаточных

НАРУШЕНИЕ КОМПАКТИЗАЦИИ ХРОМАТИНА СПЕРМАТОЗОИДА В СПЕРМИОГЕНЕЗЕВ процессе замены гистонов на более

ОКИСЛИТЕЛЬНЫЙ СТРЕСС8-гидрокси-2’деоксигуанозин (8-OHdG) – модифицированное основание

АПОПТОЗАпоптоз представляет собой результат реализации генетически запрограммированной клеточной гибелиСхема отбора сперматозоидов

В норме в 50-60% мужских половых клеток, вступающих в первое деление

МЕТОДЫ ДЕТЕКЦИИ ФРАГМЕНТАЦИИ ДНК СПЕРМАТОЗОИДАПрямые методы исследованияНепрямые методы исследованияTerminal deoxynucleotidyl transferase-mediated

Метод Terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated deoxyuridine triphosphate-nick-end labelling assay (TUNEL) Сперматозоиды с

Метод Comet Assay Comet assay

ядра сперматозоидов с фрагментированной ДНК не развивают ореол дисперсии или

Оценка целостности ДНК сперматозоида с помощью окрашивания красителем акридиновым оранжевымМетод Sperm

Прогностическое значение фрагментации ДНК Тип повреждения ДНКУчастки ДНК, в которых произошло

Выбор сперматозоида для оплодотворенияМаркеры целостности ДНК сперматозоидаСтепень повреждения ДНК единичного сперматозоидаWHO,

ВЛИЯНИЕ ФРАГМЕНТАЦИИ ДНК СПЕРМАТОЗОИДОВ НА ИСХОД ПРОГРАММ ВРТВнутриматочная инсеминацияSperm Chromatin. Edited

ЭКО vs. ЭКО/ICSISperm Chromatin. Edited by Zini A., Agarwal A. //

Фрагментация ДНК сперматозоидов и прерывание беременностиRobinson L., Gallos I., Corner S.,

Похожие презентации