Иммунохимические методы анализа

Сентябрь 3, 2022

Главная
Алгебра
Иммунохимические методы анализа

Содержание

2. Иммунохимические методы исследований – методы, основанные на специфической реакции взаимодействия антигена с антителом. Cфера применения -
3. Специфичность и чувствительность иммунохимических методов Специфичность: иммунохимические методы высокоспецифичны (95-98%), можно легко и точно дифференцировать в
4. Принцип иммунологических методов исследования Основа технологии любого иммунологического метода исследования – реакция между антигеном и антителом.
5. Схема взаимодействия антиген-антитело:
6. Схема строения иммуноглобулина:
7. Методы иммунохимического тестирования Ag + At = Комплекс AgAt. 1.Детекция антигена - тест-система должна иметь в
8. Классификация: 1) по типу проводимых на каждой из иммунохимических стадий реакций: Гомогенные ( об образовании комплекса
9. 2)по типу иммунохимического взаимодействия на первой стадии анализа: конкурентный (если на первой стадии в системе одновременно
10. Радиоиммунный метод, или анализ (РИА). - высокочувствительный метод, основанный на реакции антиген - антитело с применением
11. Спектр применения: Спектр применения метода достаточно широкий, поскольку без затруднений позволяет определить уровень содержания гормонов в
12. Иммунодиффузный метод исследования. Иммунодиффузия - наиболее распространенный из всех методов, основанных на реакции преципитации. 1)Простая радиальная
13. 2) Двойная радиальная иммунодиффузия. Суть метода заключается в следующем: - в тонком слое геля вырезают лунки
14. Иммуноэлектрофорез. Иммуноэлектрофорез представляет собой сочетание двух методов - иммунодиффузии и зонального электрофореза. Суть метода заключается в
16. Скачать презентацию

Слайд 2

Иммунохимические методы исследований – методы, основанные на специфической реакции взаимодействия антигена

с антителом. Cфера применения - показаны в ситуациях, когда необходимо количественно определить концентрации химических веществ, содержащихся в очень низких концентрациях в биологическом материале.
Белки сыворотки крови: Иммуноглобулины, липопротеины Опухолевые маркёры: Раково-эмбриональный антиген (РЭА), альфа-фетопротеин и др.
Гормоны.
Инфекционные маркёры: Нbs Ag,Anti-HIV
Маркеры воспаления: Ревматоидный Фактор, С- Реактивный Белок Лекарственные вещества: Теофиллин, Дигоксин, Фенитоин и др.

Слайд 3

Специфичность и чувствительность иммунохимических методов
Специфичность:
иммунохимические методы высокоспецифичны (95-98%), можно

легко и точно дифференцировать в биологической пробе химические вещества, имеющие очень схожую молекулярную структуру (например, Тироксин и Трийодтиронин).
Чувствительность:
При помощи иммунологических методов исследования в биологической пробе можно определить химические вещества в концентрациях вплоть до 10 - 23 моль/л.

Слайд 4

Принцип иммунологических методов исследования
Основа технологии любого иммунологического метода исследования –

реакция между антигеном и антителом.
Антиген - вещество, распознающееся иммунной системой.
Антитела (иммуноглобулины) - белки, специфически реагирующие с антигенами.
Антиген подходит к определенному антителу как «ключ к замку».

Слайд 5

Схема взаимодействия антиген-антитело:

Слайд 6

Схема строения иммуноглобулина:

Слайд 7

Методы иммунохимического тестирования
Ag + At = Комплекс AgAt.
1.Детекция антигена

- тест-система должна иметь в своём составе соответствующее антитело (для определения концентрации дигоксина надо иметь в тест- системе антитела к нему)
2.Детекция антител - тест-система должна содержать в своём составе соответствующий антиген (для определении антител к НbSAg в тест системе должен содержаться синтетический HbSAg) 3.Детекция иммунного комплекса (т.е. связанных между собой Антигена и Антитела) – реакция преципитации, агглютинации и т.д. ( в зависимости от молекулярной массы и концентрации в сыворотке крови исследуемого антигена

Слайд 8

Классификация:
1) по типу проводимых на каждой из иммунохимических стадий реакций:
Гомогенные (

об образовании комплекса АГ-АТ судят по появлению новых свойств метки ( потеря активности). Нет необходимости в этапе их физического разделения)
- Гетерогенные ( одна из фракций прикрепляется к твердой фазе, покрытой АГ или АТ, поэтому другие фракции должны быть удалены.)
- Смешанные (Если же на первой стадии анализа образование специфических иммунных комплексов происходит в растворе, а лишь затем для целей разделения используют твердую фазу с иммобилизованным реагентом .)

Слайд 9

2)по типу иммунохимического взаимодействия на первой стадии анализа:
конкурентный (если на

первой стадии в системе одновременно присутствует анализируемое соединение и его аналог, конкурирующие за ограниченное количество центров специфического связывания)
неконкурентный (если в системе присутствуют только анализируемое соединение и соответствующие ему центры связывания (антиген и специфические антитела)).

3) По применению общих антивидовых антител:
Прямой
Непрямой

Слайд 10

Радиоиммунный метод, или анализ (РИА).
- высокочувствительный метод, основанный на реакции антиген

- антитело с применением антигенов или антител, меченных радионуклидом (125J,14C, 3Н, 51Сr и др.). После их взаимодействия отделяют образовавшийся радиоактивный иммунный комплекс и определяют его радиоактивность в соответствующем счетчике (бета- или гамма-излучение). Интенсивность излучения прямо пропорциональна количеству связавшихся молекул антигена и антител.

Слайд 11

Спектр применения:
Спектр применения метода достаточно широкий, поскольку без затруднений позволяет определить

уровень содержания гормонов в миллионных частях миллионной части грамма.
Ученые, открывшие радиоиммунный анализ, с его помощью изучали клиренс инсулина у больных диабетом, поэтому первоначально его применяли для измерения концентрации инсулина в плазме крови. Однако чем больше последующие поколения ученых изучали РИА, тем он становился популярнее и востребованнее. И сегодня его используют для измерения концентрации самых разных гормонов: гормоны поджелудочной железы, желудочно-кишечного тракта, гипофиза, щитовидной железы, а также для измерения негормональных веществ: ферментов, опухолевых антигенов, белков сыворотки крови и др.
Так, при помощи радиоиммунного анализа диагностируют самые различные заболевания.

Слайд 12

Иммунодиффузный метод исследования.
Иммунодиффузия - наиболее распространенный из всех методов, основанных на

реакции преципитации.

1)Простая радиальная иммунодиффузия .
Суть метода заключается в следующем:
- в тонком слое геля, содержащего антитела в известной концентрации, вырезают лунки;
- антиген, помещенный в эти лунки, диффундирует в гель;
вокруг лунок образуются кольца преципитации, диаметр которых пропорционален концентрации антигена.
Метод обычно применяется для определения концентрации иммуноглобулинов.

Слайд 13

2) Двойная радиальная иммунодиффузия.
Суть метода заключается в следующем:
- в тонком слое

геля вырезают лунки для антигена и антител;
антиген и антитела диффундируют навстречу друг другу, образуя линии преципитации на некотором расстоянии от лунок.
По расстоянию от лунки с антигеном до линии преципитации можно определить концентрацию антигена.

Слайд 14

Иммуноэлектрофорез.
Иммуноэлектрофорез представляет собой сочетание двух методов - иммунодиффузии и зонального электрофореза.

Суть метода заключается в следующем:
- в лунку, вырезанную в тонком слое геля, помещают исследуемую сыворотку;
- проводят электрофоретическое разделение белков сыворотки;
- в геле вырезают бороздку, параллельную направлению миграции белков при электрофорезе, и заполняют ее смесью антител к сывороточным белкам;
разделенные при электрофорезе белки (антигены) и антитела диффундируют навстречу друг другу. В местах связывания антител с антигенами образуются дуги преципитации.
Иммуноэлектрофорез применяется в основном для исследования сывороточных белков

Иммунохимические методы анализа

Содержание

Иммунохимические методы исследований – методы, основанные на специфической реакции взаимодействия антигена

Специфичность и чувствительность иммунохимических методов Специфичность: иммунохимические методы высокоспецифичны (95-98%), можно

Принцип иммунологических методов исследования Основа технологии любого иммунологического метода исследования –

Схема взаимодействия антиген-антитело:

Схема строения иммуноглобулина:

Методы иммунохимического тестирования Ag + At = Комплекс AgAt. 1.Детекция антигена

Классификация:1) по типу проводимых на каждой из иммунохимических стадий реакций:Гомогенные (

2)по типу иммунохимического взаимодействия на первой стадии анализа: конкурентный (если на

Радиоиммунный метод, или анализ (РИА).- высокочувствительный метод, основанный на реакции антиген

Спектр применения:Спектр применения метода достаточно широкий, поскольку без затруднений позволяет определить

Иммунодиффузный метод исследования.Иммунодиффузия - наиболее распространенный из всех методов, основанных на

2) Двойная радиальная иммунодиффузия.Суть метода заключается в следующем:- в тонком слое

Иммуноэлектрофорез.Иммуноэлектрофорез представляет собой сочетание двух методов - иммунодиффузии и зонального электрофореза.

Похожие презентации