Особенности ионообменных реакций с участием биологически активных веществ. Ионообменная сорбция пептидов и белков

Содержание

Слайд 2

Общие сведения Ионная сорбция— гетерогенная химическая реакция обмена между ионами электролита

Общие сведения

Ионная сорбция— гетерогенная химическая реакция обмена между ионами электролита в

подвижной фазе и ионами твердофазного полиэлектролита.
Механизмы сорбционных процессов:
Ионообменная сорбция.

Химический
(адсорбат соединяется с функциональными группами сорбента при одновременном изменении электронных орбиталей).

Физический (орбитали сорбируемого вещества (адсорбата) не меняются)

Слайд 3

Селективность сорбции на различных сорбентах Селективность сорбции на минеральных сорбентах зависит

Селективность сорбции на различных сорбентах

Селективность сорбции на минеральных сорбентах зависит от:
энергии

эквивалентного ион-ионного обмена;
общих гидрофильно-гидрофобных характеристик сорбируемой молекулы.
Селективность сорбции биологически активных веществ (БАВ) на полимерных ионитах определяется:
ион-ионными взаимодействиями;
другими механизмами связывания.
Слайд 4

Связывание БАВ на полимерных ионитах Аминокислоты, нуклеотиды, антибиотики, фосфолипиды имеют в

Связывание БАВ на полимерных ионитах

Аминокислоты, нуклеотиды, антибиотики, фосфолипиды имеют в своих

структурах электростатически заряженные (ионогенные) группы и электронейтральные полярные участки молекулы, и центры гидрофобного связывания.
Полимерная сетка ионита, и молекулы БАВ способны к определенным конформационным перестройкам, которые позволяют сорбенту и сорбату подстраиваться друг к другу.
Полифункциональность таких сорбционных взаимодействий очень велика при сорбции БАВ полимерной природы: пептидов, белков, нуклеиновых кислот и гликопротеинов.
Слайд 5

Характеристики БАВ химическая структура; молекулярная масса; кислотно-основные свойства; гидрофильно-гидрофобные свойства; теромостабильность и устойчивость.

Характеристики БАВ

химическая структура;
молекулярная масса;
кислотно-основные свойства;
гидрофильно-гидрофобные свойства;
теромостабильность и устойчивость.

Слайд 6

Пример применения. сохранение и стабилизация биологической активности Получение γ-глобулинов, иммунных комплексов,

Пример применения.

сохранение и стабилизация биологической активности

Получение γ-глобулинов, иммунных комплексов, вирусов

и вакцинных препаратов

Условие

Применение специальных ионообменных материалов с высокой селективностью и полной обратимостью сорбции БАВ из многокомпонентных растворов.

Слайд 7

Требования к сорбентам СОРБЕНТ ДОЛЖЕН БЫТЬ: ГИДРОФИЛЕН; ВЫСОКОПРОНИЦАЕМ ДЛЯ БАВ; ИМЕТЬ

Требования к сорбентам

СОРБЕНТ ДОЛЖЕН БЫТЬ:
ГИДРОФИЛЕН;
ВЫСОКОПРОНИЦАЕМ ДЛЯ БАВ;
ИМЕТЬ ФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ ГРУППЫ ДЛЯ

ИОН-ИОННЫХ ВЗАИМОДЕЙСТВИЙ;
ЛОКАЛЬНОЕ РАСПОЛОЖЕНИЕ НЕИОНОГЕННЫХ ПОЛЯРНЫХ И ГИДРОФОБНЫХ СОРБЦИОННЫХ ЦЕНТРОВ ДОЛЖНО СООТВЕТСТВОВАТЬ ВОЗМОЖНОСТЯМ ЦЕЛЕВОГО ВЕЩЕСТВА УЧАСТВОВАТЬ В ДОПОЛНИТЕЛЬНЫХ МЕЖМОЛЕКУЛЯРНЫХ ВЗАИМОДЕЙСТВИЯХ.
Слайд 8

ОСОБЕННОСТИ ИОНООБМЕННЫХ РЕАКЦИЙ С УЧАСТИЕМ БАВ РАЗМЕР МОЛЕКУЛЫ ЦЕЛЕВОГО ПРОДУКТА ИОНИТ

ОСОБЕННОСТИ ИОНООБМЕННЫХ РЕАКЦИЙ С УЧАСТИЕМ БАВ

РАЗМЕР МОЛЕКУЛЫ ЦЕЛЕВОГО ПРОДУКТА

ИОНИТ ДОЛЖЕН ИМЕТЬ

ДОСТАТОЧНУЮ ГИДРАТАЦИЮ ДЛЯ СОХРАНЕНИЯ НАТИВНОЙ СТРУКТУРЫ БЕЛКОВЫХ МАКРОМОЛЕКУЛ И ОПТИМАЛЬНУЮ КОНЦЕНТРАЦИЮ ИОНОГЕННЫХ ГРУПП НА СОРБЦИОННОЙ ПОВЕРХНОСТИ ДЛЯ СЕЛЕКТИВНОГО СВЯЗЫВАНИЯ ЦЕЛЕВОГО КОМПОНЕНТА.
Слайд 9

Сорбция ферментов и других белков. ФЕРМЕНТЫ И ДР. БЕЛКИ ОБЛАДАЮТ СПОСОБНОСТЬЮ

Сорбция ферментов и других белков.

ФЕРМЕНТЫ И ДР. БЕЛКИ ОБЛАДАЮТ СПОСОБНОСТЬЮ АДСОРБИРОВАТЬСЯ

НА РАЗЛИЧНЫХ НЕРАСТВОРИМЫХ СОЕДИНЕНИЯХ.

ВАЖНЕЙШИМИ АДСОРБЕНТАМИ БЕЛКОВ ЯВЛЯЮТСЯ ИОНООБМЕННИКИ: ГЕЛИ ФОСФАТА КАЛЬЦИЯ, ГЕЛИ ГИДРОКСИДА АЛЮМИНИЯ.
ИОНООБМЕННАЯ СОРБЦИЯ ПОЗВОЛЯЕТ ПОЛУЧИТЬ ФЕРМЕНТЫ С БОЛЬШИМ ВЫХОДОМ И С ВЫСОКОЙ СТЕПЕНЬЮ ОТЧИСТКИ.

Слайд 10

Сорбция белков В ИОНООБМЕННИКАХ БЕЛКИ СВЯЗЫВАЮТСЯ С ПОМОЩЬЮ ЭЛЕКТРОСТАТИЧЕСКИХ СИЛ. ТИПИЧНЫЕ

Сорбция белков

В ИОНООБМЕННИКАХ БЕЛКИ СВЯЗЫВАЮТСЯ С ПОМОЩЬЮ ЭЛЕКТРОСТАТИЧЕСКИХ СИЛ.
ТИПИЧНЫЕ ИОНООБМЕННИКИ- ДИЭТИЛАМИНОЭТИЛ

(ДЭАЭ) И КАРБОКСИМЕТИЛ (КМ) ЦЕЛЛЮЛОЗЫ ИМЕЮТ В НАБУХШЕМ СОСТОЯНИИ ДО 0.5 М КОНЦЕНТРАЦИИ ЗАРЯЖЕННЫХ ГРУПП.
ЭТИ ЗАРЯДЫ В КОЛОНКЕ НЕЙТРАЛИЗУЮТСЯ ИОНАМИ ПРОТИВОПОЛОЖНОГО ЗНАК.
СУММАРНЫЙ ЗАРЯД БЕЛКА ИМЕЕТ ТОТ ЖЕ ЗНАК, ЧТО И ПРОТИВОИОНЫ.
БЕЛОК ПРИ ПРОХОЖДЕНИИ СКВОЗЬ КОЛОНКУ БУДЕТ ВЫТЕСНЯТЬ ПРОТИВОИОНЫ.
В МЕСТЕ НАХОЖДЕНИЯ БЕЛКА- НЕЙТРАЛЬНАЯ ЗОНА.
Слайд 11

Ионообменники ИОНООБМЕННИКИ МОГУТ БЫТЬ ЗАРЯЖЕНЫ ПО-РАЗНОМУ В ЗАВИСИМОСТИ ОТ ВИДА ИХ

Ионообменники

ИОНООБМЕННИКИ МОГУТ БЫТЬ ЗАРЯЖЕНЫ ПО-РАЗНОМУ В ЗАВИСИМОСТИ ОТ ВИДА ИХ МОДИФИКАЦИИ.


КАТИОНООБМЕННИКИ:
карбокси-метилпроизводные,
фосфо- или сульфопропилпроизводные.

АНИОНООБМЕННИКИ:
ДЭАЭ (эиэтилоаминоэтил)
ТЭАЭ( триэтиламиноэтил)
ЧАЭ (четвертичный аминоэтил) ПЭИ (полиэтиленимино) производные.

Слайд 12

После адсорбции белка на колонке происходит его элюция. Изменение рН буфера

После адсорбции белка на колонке происходит его элюция.
Изменение рН буфера до

величины, при которой связь с белком ослабеет .
Повышение ионной силы, что вызовет ослабление электростатического взаимодействия адсорбента с белком.
Слайд 13

1.Выделяемые БАВ различаются молекулярными размерами, гидрофобностью и электрохимическими характеристиками, которые могут

1.Выделяемые БАВ различаются молекулярными размерами, гидрофобностью и электрохимическими характеристиками, которые могут

быть использованы для разделения этих веществ с помощью специальных ионообменных материалов. 2.Ионообменная сорбция позволяет получить ферменты с большим выходом и высокой степенью отчистки.

Выводы