Примеры базовых моделей. Ферментативная кинетика Михаэлиса Ментен. Уравнение Моно. Исследование моделей на устойчивость

Содержание

Слайд 2

Сила катализа Увеличивает скорость реакции до 1014 раз =CO2+H2O+G(энергия) > 100.000

Сила катализа
Увеличивает скорость реакции до 1014 раз

=CO2+H2O+G(энергия)

> 100.000 лет, если без

ферментов

Несколько

часов, если с участием ферментов
Слайд 3

Моделирование ферментативной кинетики фермент субстрат продукт S E P enzyme substrate product

Моделирование ферментативной кинетики

фермент

субстрат

продукт

S

E

P

enzyme

substrate

product

Слайд 4

E+S ↔ ES ↔ EP ↔ E+P

E+S ↔ ES ↔ EP ↔ E+P

Слайд 5

Больше субстрата – быстрее связывание Низкая скорость: Высокая скорость: Скорость реакции

Больше субстрата – быстрее связывание

Низкая скорость:

Высокая скорость:

Скорость реакции зависит от

концентрации

(активности)

[S]

[S]

[P]

[P]

Больше продукта

Больше субстрата

При более высоких концентрациях субстрат связывается с активным центром быстрее. Что отражается в ускорении реакции.

субстрата

Слайд 6

Насыщение происходит при какой-то высокой концентрации субстрата [S], когда дальнейшее повышение

Насыщение происходит при какой-то высокой концентрации субстрата [S], когда дальнейшее повышение

его уровня уже не приводит к увеличению скорости реакции, т.е. росту концентрации продукта [Р]

[S]

[P]

скорость та же

больше
субстрата

[E]

[EP]

[ES]

[E]

Слайд 7

Наиболее простая ферментативная реакция Е – фермент S – субстрат P

Наиболее простая ферментативная реакция
Е – фермент
S – субстрат
P – продукт
ES –

фермент-субстратный комплекс
k+1 - константа образования комплекса
k-1 - константа распада комплекса обратно
на фермент и субстрат
k+2 – константа распада комплекса на продукт
и фермент
Слайд 8

Система дифференциальных уравнений, отвечающая схеме реакции

Система дифференциальных уравнений, отвечающая схеме реакции

Слайд 9

Сложив второе и третье уравнения системы получим или [E] + [ES]

Сложив второе и третье уравнения системы получим

или

[E] + [ES] =

E0 = const,
То есть обще количество фермента в замкнутой системе неизменно, также как и сумма масс субстрата и продукта:
[S]+[Р] = const
Слайд 10

Уравнение для скорости изменения фермент-субстратного комплекса, с использоваванием условия сохранения числа

Уравнение для скорости изменения фермент-субстратного комплекса, с использоваванием условия сохранения числа

молекул фермента

Исходя из третьего уравнения системы

Концентрация комплекса постоянна во времени – это основное предположение

Слайд 11

Величина, Km называемая константой Михаэлиса, по физическому смыслу и числен-ному значению

Величина, Km называемая константой Михаэлиса, по физическому смыслу и числен-ному значению

представляет собой концентра-цию субстрата, при которой половина молекул фермента состоит в комплексе с субстратом

Из последнего равенства получим

перепишем

 

где

 

 

Слайд 12

Из первого уравнения системы можно найти скорости убыли субстрата Когда концентрация

Из первого уравнения системы можно найти скорости убыли субстрата

 

Когда концентрация фермент-субстратного

комплекса не меняется во времени:

 

откуда

 

 

После под-становки ES

Слайд 13

Из четвертого уравнения системы можно найти скорость образования продукта Когда концентрация

Из четвертого уравнения системы можно найти скорость образования продукта

 

Когда концентрация фермент-субстратного

комплекса остается постоянной,

Подставляем и получим

 

 

Это и есть основное уравнение ферментативной кинетики. Оно носит название уравнения Михаэлиса — Ментен

Слайд 14

Что дает уравнение Михаэлиса-Ментен Скорость простейшей ферментативной реакции линейно зависит от

Что дает уравнение Михаэлиса-Ментен
Скорость простейшей ферментативной реакции линейно зависит от начальной

концентрации фермента
.

 

Когда концентрация субстрата невысока
S < Km

Скорость образования продукта линейно возрастает с S

Слайд 15

Концентрация субстрата велика, S » Km Стационарная скорость ферментативной реакции как

Концентрация субстрата велика, S » Km

Стационарная скорость ферментативной реакции как функция

концентрации субстрата обладает свойством насыщения

Эта величина V носит название максимальной скорости ферментативной реакции

Слайд 16

График зависимости скорости реакции (образования продукта) от концентрации субстрата Для практических

График зависимости скорости реакции (образования продукта) от концентрации субстрата

Для практических

целей – определения параметров Vmax и Km этот график неудобен

Скорость v очень медленно приближается к Vmax , трудно определить это значение и, соответственно, Km

Слайд 17

Концентрация субстрата велика, S » Km Стационарная скорость ферментативной реакции как

Концентрация субстрата велика, S » Km

Стационарная скорость ферментативной реакции как функция

концентрации субстрата обладает свойством насыщения

Эта величина V носит название максимальной скорости ферментативной реакции

Слайд 18

График в координатах (v; ln s).

График в координатах (v; ln s).

Слайд 19

или Варианты линеаризации зависимости скорости реакции от концентрации субстрата Метод Лайнуивера-Берка

или

Варианты линеаризации зависимости скорости реакции от концентрации субстрата

 

Метод Лайнуивера-Берка
Метод

Хайнса-Вульфа
Метод Иди-Хофсти.
Метод Эйзенталя и
Корниш-Боудена.







Слайд 20

Метод Лайнуивера-Берка Недостаток – наклон прямой определяется в области малых значений

Метод Лайнуивера-Берка

Недостаток – наклон прямой определяется в области малых значений переменных,

что значительно снижает точность определения параметров.
Слайд 21

Метод Хайнса-Вульфа Недостаток – определение параметров в области малых значений s,

Метод Хайнса-Вульфа

Недостаток – определение параметров в области малых значений s, что

сильно снижает точности их определения.
Слайд 22

Метод Иди-Хофсти Недостаток – зависимая переменная v входит в обе координаты

Метод Иди-Хофсти

Недостаток – зависимая переменная v входит в обе координаты и

это сильно снижает точность определения Km и V
Слайд 23

Варианты линеаризации зависимости скорости реакции от концентрации субстрата Строятся пря-мые по

Варианты линеаризации зависимости скорости реакции от концентрации субстрата

Строятся пря-мые по

парным значениям s и v на осях. Точка их пересечения дает значения параметров. Наиболее подходящий для определения параметров способ.

 

Слайд 24

Ингибирование Необратимое Обратимое: конкурентное неконкурентное бесконкурентное смешанное

Ингибирование

Необратимое
Обратимое:
конкурентное
неконкурентное
бесконкурентное
смешанное

Слайд 25

Конкурентное ингибирование

Конкурентное ингибирование

Слайд 26

Сравнение конкурентного и неконкурентного ингибитора конкурентный неконкурентный

Сравнение конкурентного и неконкурентного ингибитора

конкурентный

неконкурентный

Слайд 27

Конкурентное ингибирование Неконкурентное ингибирование

Конкурентное ингибирование

Неконкурентное ингибирование

Слайд 28

Конкурентное ингибирование

Конкурентное ингибирование

Слайд 29

Неконкурентное ингибирование

Неконкурентное ингибирование

Слайд 30

Неконкурентное ингибирование

Неконкурентное ингибирование

Слайд 31

Уравнение Михаэлиса-Ментен подходит не только для большинства ферментов, но и для

Уравнение Михаэлиса-Ментен подходит не только для большинства ферментов, но и для

моделирования поведения популяций культур микроорганизмов и других культур

1 – регулятор
2 – поступление субстрата,
3 – отток (вымывание) смеси
субстрата и биомассы,
4 – культура внутри
культиватора,
5 – мешалка

Слайд 32

Для микробиологических систем обычно величина, лимитирующая рост, это ‑ концентрация субстрата.

Для микробиологических систем обычно величина, лимитирующая рост, это ‑ концентрация субстрата.

Наиболее распространенная форма записи, учитывающая насыщение скорости роста культуры по питательному субстрату, предложена Моно:

Здесь μm -максимальная скорость роста микроорганизмов при данных условиях;
KS - константа, численно равная концентрации субстрата, при которой скорость роста культуры равна половине максимальной.

Слайд 33

Графическое выражение зависимости скорости роста от концентрации субстрата в соответствии с формулой Моно.

Графическое выражение зависимости скорости роста от концентрации субстрата в соответствии с

формулой Моно.
Слайд 34

При перемешивании можно считать весь объем культиватора однородно заполненным, концентрации субстрата

При перемешивании можно считать весь объем культиватора однородно заполненным, концентрации субстрата

и клеток в каждой точке культиватора одинаковыми, и описывать поведение этих концентраций во времени с помощью системы обыкновенных дифференциальных уравнений Моно:
S   - концентрация субстрата
x  - концентрация клеток в культиваторе
S0  - концентрация субстрата, поступившего в культиватор
D  - скорость протока (разбавления) культуры
a-1 - “экономический” коэффициент, показывающий, какая часть поглощенного субстрата идет на приращение биомассы.
Слайд 35

Устойчивость состояния равновесия (стационарного состояния) Варианты равновесия: устойчивое и неустойчивое Стационарное

Устойчивость состояния равновесия (стационарного состояния)

Варианты равновесия: устойчивое и неустойчивое

Стационарное состояние называется

устойчивым, если малые отклонения не выводят систему слишком далеко из окрестности этого стационарного состояния.
Слайд 36

Строгое математическое определение устойчивости состояния равновесия для уравнения dx/dt = f(x):

Строгое математическое определение устойчивости состояния равновесия для уравнения dx/dt = f(x):


для устойчивого состояния равновесия справедливо утверждение: если в момент времени to отклонение от равновесия мало |x(to) - x| < δ, то в любой последующий момент времени t > to отклонение решения системы от состояния равновесия будет также мало: |x(t) - х| < ε
Слайд 37

Математический метод Ляпунова определения устойчивости состоит в прямом использовании определения устойчивости

Математический метод Ляпунова определения устойчивости состоит в прямом использовании определения устойчивости