Лабораторные методы функционального исследования почек

Содержание

Слайд 2

Исследования осморегулирующей функции основаны на способности почек осмотически концентрировать и разводить

Исследования осморегулирующей функции основаны на способности почек осмотически концентрировать и разводить

мочу

Проба Зимницкого
основана на исследовании относительной плотности в отдельных порциях мочи, выделяемых при произвольном мочеиспускании в течение суток в определенном режиме.

Слайд 3

Анализ мочи по Зимницкому Приготовить 8 контейнеров (банок) с крышкой, на

Анализ мочи по Зимницкому

Приготовить 8 контейнеров (банок) с крышкой, на

каждой написать фамилию, число и интервал времени (например, 6.00-9.00). Мочу собирать в течение суток, через каждые 3 часа: с 6.00-9.00- в первую банку, с 9.00-12.00 – во вторую банку и т.д. Если позыва на мочеиспускание в данный интервал времени нет, соответствующую банку оставляют пустой.
Слайд 4

В лаборатории определяют количество собранной мочи и ее относительную плотность в каждой порции.


В лаборатории определяют количество собранной мочи и ее относительную плотность в

каждой порции.
Слайд 5

Суммируя общее количество выделенной мочи, определяют диурез. У здорового человека суточное

Суммируя общее количество выделенной мочи, определяют диурез.
У здорового человека суточное

выделение мочи составляет 67-75% от количества выпитой жидкости.

Вычисляют дневной и ночной диурез.
Дневной диурез составляет 2/3 – ¾ от количества суточной мочи.
Колебания относительной плотности: 1,005 -1,025 г/мл.

Слайд 6

1. Превышение дневного диуреза над ночным. 2. Наибольшему колебанию относительной плотности


1. Превышение дневного диуреза над ночным.
2. Наибольшему колебанию относительной плотности мочи

от 1,004 до 1,032 в отдельных ее порциях.
3. Разнице между наиболее высокой и низкой относительной плотностью, которая не должна быть менее 0,007.
4. Резкому усилению мочеотделения после приема жидкости.
5. Выведение почками не менее 80% введенной жидкости.

Показатели нормальной функции почек:

Слайд 7

О патологии функции почек свидетельствует: 1. Преобладание ночного диуреза над дневным.

О патологии функции почек свидетельствует:
1. Преобладание ночного диуреза над дневным.
2. Монотонность

мочеотделения.
3. Малая амплитуда колебаний относительной плотности 1,007 - 1,009 (гипостенурия); 1,010-1,011 (изостен-урия).
5. Полиурия.

!

Слайд 8

Гипостенурия – состояние при частичной утрате почками функции концентрации и разведения

Гипостенурия – состояние при частичной утрате почками функции концентрации и разведения

мочи. Признак тяжелого заболевания почек. Моча длительное время колеблется около точки изостенурии (1,007- 1,015 г/мл).
Изостенурия – продолжительное выделение мочи с постоянной относительной плотностью, равной относительной плотности первичной мочи -1,010 г/мл (1,008-1,010). Выявляется при паренхиматозных заболеваниях почек (гломерулонефрит, хронический пиелонефрит, нефросклероз). Способность почки к разведению и концентрации мочи снижается, а в терминальный стадии заболевания полностью утрачивается. Почки перестают концентрировать и разводить первичную мочу.
Слайд 9

Слайд 10

Методы, основанные на исследовании очистительной функции почек КЛИРЕНС - как метод

Методы, основанные на исследовании очистительной функции почек

КЛИРЕНС - как метод исследования

функции почек введен Rehberg (клиренс креатинина; 1926 г.).
Под почечным клиренсом подразумевают то количество сыворотки (плазмы) крови ( в мл), которое очищается полностью за единицу времени от какого-либо экзогенного или эндогенного вещества.
Фильтрационный клиренс – когда вещество выделяется в результате фильтрации и не реабсорбируется в канальцах. Такой клиренс имеет креатинин.
По клиренсу эндогенного креатинина измеряют величину (скорость) клубочковой фильтрации. У здоровых людей она колеблется от 80-160 мл/мин.
Слайд 11

Собирается суточная моча, т.е. также как для анализа на суточный белок.

Собирается суточная моча, т.е. также как для анализа на суточный белок.

Необходимо точно измерить объем суточной мочи! Утром, когда закончен сбор суточной мочи, необходимо сдать кровь из вены на креатинин.
Для точности исследования объем суточной мочи должен быть не менее 1000 мл, для чего в день пробы надо выпить не менее 1,5 литров жидкости.

Проба Реберга

Слайд 12

Метод подсчета: СКФ = (up x Vn)/(Cp x T) Vn –

Метод подсчета:
СКФ = (up x Vn)/(Cp x T)
Vn – объем мочи

за данное время
Cp – концентрация креатинина в плазме
Up – концентрация креатинина в моче
Т – время сбора мочи в минутах
Референсные показатели СКФ (мл/мин)

!

Слайд 13

Цель исследования – выявление потери сахара с мочой для коррекции доз

Цель исследования – выявление потери сахара с мочой для коррекции

доз инсулина у пациентов с сахарным диабетом.
Для проведения этого функционального теста 5 раз в сутки исследуется моча для определения в ней глюкозы и кетоновых соединений:
1-ая порция: с 8 до 13 часов
2-ая порция: с 13-18 часов
3-я порция: с 18-22 часов
4-я порция : с 22 до 4 часов следующего утра
5-я порция: с 4до 8 утра

Глюкозурический профиль

Слайд 14

Слайд 15

Методы определения белка Качественные: обнаружение белка в моче с помощью 20%-й

Методы определения белка

Качественные:
обнаружение белка в моче с помощью 20%-й сульфосалициловой

кислоты и др
Полуколичественные:
ХИМИЧЕСКИЕ (тест-полоски)
Количественные:
ФОТОМЕТРИЧЕСКИЕ
Слайд 16

Условия метода. Моча должна быть кислой (pH 5,0-6,5). Щелочную мочу подкисляют

Условия метода. Моча должна быть кислой (pH 5,0-6,5). Щелочную мочу подкисляют

10% раствором уксусной кислоты (в 2-3 мл мочи; добавляют 2-3 капли уксусной кислоты).
Мочу предварительно центрифугируют. При выраженной бактериурии добавляют тальк или жженую магнезию (1чайная ложка на 100 мл мочи).
Обнаружение белка проводят в 2-х пробирках, одна из которых служит контролем.
  Принцип метода основан на коагуляции белка химическим реактивом – сульфосалициловой кислотой (ССК). При наличии белка появляется помутнение или образование хлопьевидного осадка.
Ход определения. К 1 мл отцент-рифугированной мочи добавляют 3-5 капель 20% ССК. При наличии белка моча мутнеет.

Обнаружение белка в моче 20%-й сульфасалициловой кислотой

качественный метод

Слайд 17

Фотометрический метод При взаимодействии белка с красителем пирогаллоловым красным образуется окрашенный

Фотометрический метод
При взаимодействии белка с красителем пирогаллоловым красным образуется окрашенный комплекс,

интенсивность поглощения которого при длине волны 600 нм увеличивается с ростом концентрации белка в пробе.

Моча

Раствор красителя пирогаллоловый красный в буфере

Специфическая реакция с образованием комплекса молекул красителя с белком

ФОТОМЕТРИЧЕСКОЕ ИЗМЕРЕНИЕ

Фотометрическое измерение продукта реакции

Молекулы белка в моче

СПЕЦИФИЧЕСКАЯ РЕАКЦИЯ

Молекулы белка, помеченные молекулами красителя

λ=600 нм

Слайд 18

ФОТОМЕТРИЧЕСКИЙ МЕТОД НОРМАЛЬНЫЕ ВЕЛИЧИНЫ: Утренняя порция мочи – до 0,1 г/л Суточная моча – 0,02-0,141 г/л

ФОТОМЕТРИЧЕСКИЙ МЕТОД

НОРМАЛЬНЫЕ ВЕЛИЧИНЫ:
Утренняя порция мочи – до 0,1 г/л
Суточная моча –

0,02-0,141 г/л
Слайд 19

Моча для исследования собирается в течение суток, например с 7 утра

Моча для исследования собирается в течение суток, например с 7 утра

до 7 утра следующего дня.
Первая утренняя порция мочи сливается в унитаз, замечается время (7.00). Начиная со следующей порции, вся моча в течение 24 часов собирается в контейнер (банку) с плотно закрывающейся крышкой.
После завершения сбора мочи необходимо измерить полученный объем, затем тщательно перемешать мочу и отлить 100-200 мл в контейнер и доставить в лабораторию.
В лаборатории производится определение к концентрации белка фотометрическим методом и расчет суточного содержания белка в моче:
ПРИМЕР: За сутки выделено 1500 мл мочи, концентрация белка в ней составила 4 г/л
Суточное содержание белка в моче рассчитывается:
В 1000 мл – 4 г белка
В 1500 мл - Х
Х= (1500х4):1000= 6г/л

Определение суточной потери белка

Слайд 20

Увеличенное выделение альбумина с мочой – наиболее ранний маркер поражения почечных

Увеличенное выделение альбумина с мочой – наиболее ранний маркер поражения почечных

клубочков.
Повышенная альбуминурия служит ранним и длительное время единственным признаком диабетической нефропатии, поражение почек при гипертонической болезни, ожирении и является доказанным фактором сердечно-сосудистого риска и маркером эндотелиальной дисфункции.
Развивается в результате:
Повреждения и дисфункции почечного сосудистого эндотелия;
Повышения давления в капиллярной сети клубочков;
Нарушения структурной целостности БМ клубочков;
Дисфункция канальцевого эпителия.
Для исследования применяются:
- Количественное определение выделения альбумина или общего белка с мочой за сутки
В разовой порции мочи – расчет соотношения альбумин/креатинин мочи
За диагностический порог альбуминурии принят уровень >30мг/г креатинина (>3мг/ммоль креатинина). Сохраняющееся на протяжении более 3 месяцев превышение данного порога альбуминурии может указывать на хроническую болезнь почек.
Новые диагностические маркеры: цистатин С и NGAL

Микроальбуминурия

Слайд 21

Принцип метода основан на обнаружении в моче белка при температуре 45-55С◦.


Принцип метода основан на обнаружении в моче белка при температуре 45-55С◦.

Белок представляет собой выделенные с мочой легкие цепи иммуноглобулинов.
Ход определения: К 10 мл мочи добавляют 3-4 капли 10%уксусной кислоты и 2 мл насыщенного раствора поваренной соли. Осторожно нагревают на водяной бане. При наличии в моче парапротеинов при температуре 45-55С появляется диффузное помутнение, которое усиливается при повышении температуры до 66-72С и сопровождается появлением больших хлопьев, осаждающихся на дно пробирки.
Наиболее информативен ЭЛЕКТРОФОРЕЗ белков сыворотки крови

Метод определения парапротеинов
Реакция(белок) Бенс-Джонса

Слайд 22

Слайд 23

Слайд 24