Применение иммунологических реакций в медицинской практике

Сентябрь 7, 2022

Главная
Медицина
Применение иммунологических реакций в медицинской практике

Содержание

2. Реакции иммунитета – это реакции между антигеном и антителом или между антигеном и сенсибилизированными лимфоцитами, которые
3. Реакции антигена с антителом называются серологическими ( от лат. serum – сыворотка) или гуморальными ( от
4. Реакции иммунитета используют: при диагностике и иммунологических исследованиях у больных и здоровых людей; для серодиагностики –
5. Иммунологические (серологические) реакции протекают в две фазы 1-я фаза – специфическая Образование комплекса антигена и соответствующего
6. 1-я фаза
7. 2-я фаза – неспецифическая В этой фазе специфический комплекс антиген-антитело взаимодействует с неспецифическими факторами среды, в
8. 2-я фаза
9. Схема взаимодействия антигена с антителом
10. Кровь для серологических реакций берут с конца 1-й начала 2-й недели заболевания. Чаще берут из вены
11. Из крови готовят сыворотку и определяют титр антител, т.е. наибольшее разведение, в котором она реагирует с
12. Реакция агглютинации (РА) РА – это склеивание и выпадение в осадок микробов и других клеток под
13. РА применяют для определения антител в сыворотке крови больных при брюшном тифе и паратифах (реакция Видаля),
14. Компоненты РА: Антитела (агглютинины) – находятся в сыворотке крови или иммунной сыворотке; Антиген – взвесь живых
15. РА на стекле (ориентировочная реакция) На обезжиренное предметное стекло пастеровской пипеткой наносят 2 капли специфической (адсорбированной)
16. Внимание! Нельзя переносить культуру из сыворотки в каплю ФР, которая является контролем антигена (КА). Реакция протекает
17. Схема реакции агглютинации на стекле
18. Развернутая реакция агглютинации В пробирках готовят двукратные разведения сыворотки от 1:50 до 1: 1600. На каждой
19. Окончательный результат – через 18-20 часов (выдерживая при комнатной температуре). Результат: КС должен оставаться прозрачным, КА
20. Реакция агглютинации
21. Реакция Видаля Применяют для диагностики брюшного тифа и паратифов А и В. Ставят со 2-й недели
22. Реакцию ставят с двумя диагностикумами О и Н. О-антитела появляются первыми и исчезают довольно быстро, Н-антитела
23. Реакция Видаля
24. Реакция гемагглютинации (РГА) Первая РГА относится к серологическим. В этой реакции эритроциты агглютинируются при взаимодействии с
25. РГА
26. РГА Вторая РГА не является серологической. В ней склеивание эритроцитов вызывают не антитела, а особые вещества,
27. РГА
28. Реакция непрямой гемагглютинации (РНГА) РНГА основана на том, что эритроциты, если на их поверхности адсорбировать растворимый
29. Компоненты РНГА Антитела (сыворотка больного); антиген (эритроцитарный диагностикум); ФР
30. РНГА ставят в пластинах с лунками
31. Постановка РНГА В пластинах с лунками делают двукратные разведения сыворотки (1:10 – 1:1280. Во все разведения
32. Учет РНГА положительная реакция – осадок в виде «зонтика»; отрицательная реакция – осадок в виде «пуговки»;
33. Учет РНГА Ставят в пластинах с лунками
34. РНГА
35. Реакция торможения гемагглютинации (РТГА) Основана на способности антител иммунной сыворотки нейтрализовать вирусы, которые в результате этого
36. Учет РТГА положительная реакция – осадок в виде «пуговки»; отрицательная реакция – осадок в виде «зонтика»;
37. РТГА
38. РСК – реакция связывания комплемента РСК основана на том, что специфический комплекс антиген-антитело всегда адсорбирует на
39. РСК В РСК участвуют 2 системы: основная и гемолитическая иначе результаты не оценить.
40. Основная система Антиген – лизат, экстракт, гаптен; реже взвесь микроорганизмов; Антитело – сыворотка пациента; Комплемент –
41. Гемолитическая система Антиген – эритроциты барана; Антитело – гемолизин к эритроцитам барана.
42. Результат Если в крови человека есть антитела, они свяжутся с антигеном; на них осядет комплемент и
43. Схема РСК с сывороткой больного человека
44. Результат Если в крови человека нет антител, антиген и комплемент остаются свободными и при добавлении гемолитической
45. Схема РСК с сывороткой здорового человека
46. Результаты РСК
47. РСК
48. РСК
49. Реакция преципитации (РП) Применяют для определения антигена при диагностике ряда инфекций (сибирская язва и др.); Для
50. Реакция кольцепреципитации В преципитационную пробирку с помощью пастеровской пипетки вносят 0,2-0,3 мл (5-6 капель) сыворотки (сыворотка
51. Реакция кольцепреципитации Пробирку при этом держат в наклонном положении; При правильном наслаивании между сывороткой и антигеном
52. Реакция кольцепреципитации
53. Реакция кольцепреципитации
54. Механизм и положительный результат реакции кольцепреципитации
55. Реакция преципитации в агаре Применяют для определения токсигенности культуры, например при дифтерии. В чашку Петри с
56. Расстояние бляшек от края полосок бумаги 0,5-0,7 см. Между двумя бляшками испытуемой культуры засевают бляшки заведомо
57. Реакция преципитации в агаре.
58. Реакция нейтрализации (РН) Антитела иммунной сыворотки способны нейтрализовать повреждающее действие микроорганизмов или их токсинов на чувствительные
59. При постановке реакции смесь а/г – а/т, полученную in vitro вводят животным или вносят в культуру
60. Реакция иммунофлюоресценции (РИФ) Основана на том, что иммунные сыворотки, к которым химическим путем присоединены флюорохромы (люминесцирующие
61. Токсоплазмы
62. Пневмококки
63. Иммуноферментный анализ (ИФА) ИФА – выявление антигенов с помощью соответствующих им антител, конъюгированных с ферментом-меткой. После
64. ИФА ИФА применяют для диагностики вирусных, бактериальных и паразитарных болезней, в частности для диагностики ВИЧ-инфекций, гепатита
65. ИФА
66. Результат ИФА. Желтый цвет раствора в лунке является положительным результатом
67. Иммуноблоттинг Определение антигенов или антител с помощью известных сывороток или антигенов. Метод основан на выделении антигена
69. Иммуноблоттинг
70. Радиоиммунологический анализ (РИА) РИА – количественное определение антител или антигенов, меченных радионуклидом, с применением аналогичных антител
71. Радиоиммунологический анализ После их взаимодействия отделяю образовавшийся радиоактивный комплекс антиген-антитело и определяют его радиоактивность по счетчику
72. РИА Широкое распространение получили так называемый прямой и непрямой варианты твердофазного радиоиммунологического метода, при которых используют
73. Радиоиммунный анализ (РИА)
74. Радиоиммунный анализ (РИА)
75. Полимеразная цепная реакция (ПЦР) ПЦР позволяет идентифицировать микроорганизмы по ДНК без выделения его в виде чистой
76. ПЦР
77. ПЦР
78. Бокс для ПЦР работ
79. ПЦР
80. Реакция агглютинации латекса (РАЛ) Для постановки РАЛ используют сенсибилизованные частицы полистиролового латекса диаметром 0,5-1,2 мкм, которые
81. Реакция агглютинации латекса (РАЛ) Нагружая латекс антигенами, можно определять наличие антител в сыворотке больного. Такую модификацию
82. Проведение реакции латекс-агглютинации
83. Проведение реакции латекс-агглютинации
84. Учет реакции латекс-агглютинации
86. Скачать презентацию

Слайд 2

Реакции иммунитета – это реакции между антигеном и антителом или между

антигеном и сенсибилизированными лимфоцитами, которые происходят в живом организме и могут быть воспроизведены в лабораторных условиях.

Слайд 3

Реакции антигена с антителом называются серологическими ( от лат. serum –

сыворотка) или гуморальными
( от лат. humor – жидкость), потому что участвующие в них антитела (иммуноглобулины) всегда находятся в сыворотке крови.
Реакции антигена с сенсибилизированными лимфоцитами называются клеточными.

Слайд 4

Реакции иммунитета используют:
при диагностике и иммунологических исследованиях у больных и здоровых

людей;
для серодиагностики – выявления антител в сыворотке больного;
для сероидентификации – определения вида или типа антигена.

Слайд 5

Иммунологические (серологические) реакции протекают в две фазы
1-я фаза – специфическая
Образование

комплекса антигена и соответствующего ему антитела.
Видимого изменения в этой фазе не происходит, но образовавшийся комплекс становится чувствительным к неспецифическим факторам, находящимся в среде (электролиты, комплемент, фагоцит).

Слайд 6

1-я фаза

Слайд 7

2-я фаза – неспецифическая
В этой фазе специфический комплекс антиген-антитело взаимодействует

с неспецифическими факторами среды, в которой происходит реакция.
Результаты их взаимодействия видны невооруженным глазом (растворение, склеивание и т.д.).

Слайд 8

2-я фаза

Слайд 9

Схема взаимодействия антигена с антителом

Слайд 10

Кровь для серологических реакций берут с конца 1-й начала 2-й недели

заболевания.
Чаще берут из вены 3-5 мл в стерильную пробирку натощак или не раньше, чем через 6 часов после еды, иначе сыворотка будет мутной (хилезной), т.е. содержать капельки жира.
При взятии крови следует соблюдать
стерильность и асептику.

Слайд 11

Из крови готовят сыворотку и
определяют титр антител, т.е.
наибольшее разведение, в котором

она
реагирует с соответствующим антигеном
в определенных условиях опыта.
Реакцию ставят в динамике, т.е.
повторяют через 7-10 дней.

Слайд 12

Реакция агглютинации (РА)
РА – это склеивание и выпадение в
осадок

микробов и других клеток под
действием антител в присутствии
электролита (изотонического
раствора NaCl или ФР).
Образовавшийся осадок называется
агглютинатом.

Слайд 13

РА применяют
для определения антител в
сыворотке крови больных при
брюшном

тифе и паратифах
(реакция Видаля), туляремии,
бруцеллезе (реакция Райта) и др.

Слайд 14

Компоненты РА:
Антитела (агглютинины) – находятся в сыворотке крови или иммунной

сыворотке;
Антиген – взвесь живых или убитых микроорганизмов;
Изотонический раствор NaCl (ФР).

Слайд 15

РА на стекле (ориентировочная реакция)
На обезжиренное предметное стекло пастеровской пипеткой

наносят 2 капли специфической (адсорбированной) сыворотки и каплю ФР, отмечают где какая капля.
Культуру петлей тщательно растирают на стекле, а затем вносят в каплю ФР и в одну из капель сыворотки, размешивая в каждой до образования гомогенной взвеси.
Капля сыворотки, в которую не внесена культура – контроль сыворотки (КС).

Слайд 16

Внимание! Нельзя переносить культуру из сыворотки в каплю ФР, которая является

контролем антигена (КА).
Реакция протекает при комнатной температуре в течение 1-3 мин.
Результаты: КС должен оставаться прозрачным, КА – равномерно мутный, при положительной реакции – осадок в виде хлопьев, при отрицательной – равномерно мутный.

Слайд 17

Схема реакции агглютинации на стекле

Слайд 18

Развернутая реакция агглютинации
В пробирках готовят двукратные разведения сыворотки от 1:50

до 1: 1600.
На каждой пробирке указывают степень разведения.
Во все разведения добавляют 2 капли антигена.
Ставят КС и КА.
Пробирки помещают в термостат на 2 часа при температуре 37С и выдают предварительный результат.

Слайд 19

Окончательный результат – через 18-20 часов (выдерживая при комнатной температуре).
Результат: КС

должен оставаться прозрачным, КА – равномерно мутный, при положительной реакции – осадок в виде хлопьев, при отрицательной – равномерно мутный.

Слайд 20

Реакция агглютинации

Слайд 21

Реакция Видаля
Применяют для диагностики брюшного
тифа и паратифов А и В.
Ставят

со 2-й недели заболевания.
Для реакции используют:
- АТ - сыворотку больного;
- АГ – убитые культуры сальмонелл
( диагностикумы);
- физиологический раствор.

Слайд 22

Реакцию ставят с двумя диагностикумами О и Н.
О-антитела появляются первыми

и исчезают довольно быстро, Н-антитела сохраняются долго.
Реакция может быть положительной у больных, переболевших и привитых.
У больных диагностический титр антител 1:200 и выше и при повторении реакции увеличиваются, у переболевших и привитых – 1: 100 и при повторении реакции не изменяются.

Слайд 23

Реакция Видаля

Слайд 24

Реакция гемагглютинации (РГА)
Первая РГА относится к серологическим.
В этой реакции

эритроциты агглютинируются при взаимодействии с соответствующими антителами (гемагглютининами).
Используют для определения группы крови.

Слайд 25

РГА

Слайд 26

РГА
Вторая РГА не является серологической.
В ней склеивание эритроцитов вызывают

не антитела, а особые вещества, образуемые вирусами.
Используют для диагностики вирусных заболеваний.

Слайд 27

РГА

Слайд 28

Реакция непрямой гемагглютинации (РНГА)
РНГА основана на том, что эритроциты,
если на

их поверхности адсорбировать
растворимый антиген, приобретают
способность агглютинироваться при
взаимодействии с антителами к
адсорбированному антигену.
РНГА широко применяют для диагностики ряда инфекций.

Слайд 29

Компоненты РНГА
Антитела (сыворотка больного);
антиген (эритроцитарный диагностикум);
ФР

Слайд 30

РНГА ставят в пластинах с лунками

Слайд 31

Постановка РНГА
В пластинах с лунками делают двукратные разведения сыворотки (1:10

– 1:1280.
Во все разведения добавляют 2 капли эритроцитарного диагностикума.
Ставят КА и КС.
Помещают в термостат на 2 часа при температуре 37С.

Слайд 32

Учет РНГА
положительная реакция – осадок в виде «зонтика»;
отрицательная реакция –

осадок в виде «пуговки»;
КС – прозрачный;
КА – «пуговка»

Слайд 33

Учет РНГА
Ставят в пластинах с лунками

Слайд 34

РНГА

Слайд 35

Реакция торможения гемагглютинации (РТГА)
Основана на способности антител иммунной сыворотки нейтрализовать вирусы,

которые в результате этого процесса теряют свойство агглютинировать эритроциты.
Применяют в диагностике вирусных заболеваний.

Слайд 36

Учет РТГА
положительная реакция – осадок в виде «пуговки»;
отрицательная реакция –

осадок в виде «зонтика»;
КС и КЭ – «пуговка», нет агглютинирующего эритроциты фактора;
КА – «зонтик», вирус вызвал агглютинацию эритроцитов.

Слайд 37

РТГА

Слайд 38

РСК – реакция связывания комплемента
РСК основана на том, что специфический комплекс

антиген-антитело всегда адсорбирует на себе комплемент.
Применяют для диагностики заболеваний вызванных вирусами, спирохетами (RW), риккетсиями и др.

Слайд 39

РСК
В РСК участвуют 2 системы: основная
и гемолитическая иначе

результаты не оценить.

Слайд 40

Основная система
Антиген – лизат, экстракт, гаптен; реже взвесь микроорганизмов;
Антитело

– сыворотка пациента;
Комплемент – сыворотка морских свинок.

Слайд 41

Гемолитическая система
Антиген – эритроциты барана;
Антитело – гемолизин к эритроцитам

барана.

Слайд 42

Результат
Если в крови человека есть антитела, они свяжутся с антигеном;

на них осядет комплемент и при добавлении гемолитической системы гемолиз не произойдет.
Реакция положительная, человек болен.
В пробирке осадок и прозрачная или мутноватая надосадочная жидкость.

Слайд 43

Схема РСК с сывороткой больного человека

Слайд 44

Результат
Если в крови человека нет антител, антиген и комплемент остаются

свободными и при добавлении гемолитической системы произойдет гемолиз.
Результат РСК отрицательный.
В пробирке «лаковая кровь»

Слайд 45

Схема РСК с сывороткой здорового человека

Слайд 46

Результаты РСК

Слайд 47

РСК

Слайд 48

РСК

Слайд 49

Реакция преципитации (РП)
Применяют для определения антигена при диагностике ряда инфекций

(сибирская язва и др.);
Для определения токсигенности культуры;
В санитарно-гигиенических исследованиях – при установлении фальсификации продуктов;
В судебной медицине – для определения видовой принадлежности крови, спермы и др.

Слайд 50

Реакция кольцепреципитации
В преципитационную пробирку с помощью пастеровской пипетки вносят 0,2-0,3

мл (5-6 капель) сыворотки (сыворотка не должна попадать на стенки пробирки);
На сыворотку осторожно наслаивают антиген в таком же объеме, наливая его пастеровской пипеткой по стенкам пробирки.

Слайд 51

Реакция кольцепреципитации
Пробирку при этом держат в наклонном положении;
При правильном наслаивании между

сывороткой и антигеном должна получиться четкая граница.
Ставят ряд контролей.
Учет результатов производят через 5-30 мин.

Слайд 52

Реакция кольцепреципитации

Слайд 53

Реакция кольцепреципитации

Слайд 54

Механизм и положительный результат реакции кольцепреципитации

Слайд 55

Реакция преципитации в агаре
Применяют для определения токсигенности культуры, например при

дифтерии.
В чашку Петри с питательной средой
помещают полоску стерильной
фильтровальной бумаги, смоченную
антитоксической сывороткой.
Испытуемую культуру засевают «бляшками» петлей. Диаметр бляшек 0,8-1,0 см.

Слайд 56

Расстояние бляшек от края полосок
бумаги 0,5-0,7 см. Между двумя бляшками

испытуемой культуры засевают бляшки заведомо токсигенного штамма.
Ставят в термостат на 24-48 часов и
учитывают результат: культура токсигенная –линии преципитации соединяются; культура нетоксигенная – линии преципитации перекрещиваются.

Слайд 57

Реакция преципитации в агаре.

Слайд 58

Реакция нейтрализации (РН)
Антитела иммунной сыворотки способны нейтрализовать повреждающее действие микроорганизмов или

их
токсинов на чувствительные клетки ткани.
Это связано с блокадой микробных
антигенов антителами, т.е. их
нейтрализацией.

Слайд 59

При постановке реакции смесь а/г – а/т,
полученную in vitro вводят

животным или вносят в культуру клеток.
При отсутствии повреждающего действия микроорганизмов или их антигенов и токсинов говорят о нейтрализующем действии иммунной сыворотки и, следовательно, специфичности взаимодействия комплекса антиген-антитело.

Слайд 60

Реакция иммунофлюоресценции (РИФ)
Основана на том, что иммунные сыворотки, к которым химическим

путем присоединены флюорохромы (люминесцирующие сыворотки), при взаимодействии с соответствующими антигенами образуют специфический светящийся комплекс, видимый в люминесцентном микроскопе.

Слайд 61

Токсоплазмы

Слайд 62

Пневмококки

Слайд 63

Иммуноферментный анализ (ИФА)
ИФА – выявление антигенов с помощью
соответствующих им антител,

конъюгированных
с ферментом-меткой.
После соединения антигена с меченной
ферментом иммунной сывороткой в смесь
добавляют субстрат-хромоген.
Субстрат расщепляется ферментом и
изменяется цвет продукта реакции –
интенсивность окраски прямо пропорциональна
количеству связавшихся молекул антигена и
антител.

Слайд 64

ИФА
ИФА применяют для диагностики вирусных, бактериальных и паразитарных болезней, в

частности для диагностики ВИЧ-инфекций, гепатита В и др., а также определения гормонов, ферментов, лекарственных препаратов и других биологически активных веществ, содержащихся в исследуемом материале.

Слайд 65

ИФА

Слайд 66

Результат ИФА. Желтый цвет раствора в лунке является положительным результатом

Слайд 67

Иммуноблоттинг
Определение антигенов или антител с
помощью известных сывороток или антигенов.
Метод

основан на выделении антигена
с помощью электрофореза в
полиакриламидном геле, последующем
переносе выделенного антигена из геля
на активированную бумагу или нитроцеллюлозу
(блот-пятно) и выявлении на подложке
искомого антигена с помощью ИФА.

Слайд 68

Слайд 69

Иммуноблоттинг

Слайд 70

Радиоиммунологический анализ (РИА)
РИА – количественное определение антител или антигенов, меченных радионуклидом,

с применением аналогичных антител или антигенов: например, искомого антигена с применением иммунной сыворотки и аналогичного антигена, меченного радионуклидом.

Слайд 71

Радиоиммунологический анализ
После их взаимодействия отделяю образовавшийся радиоактивный комплекс антиген-антитело и

определяют его радиоактивность по счетчику импульсов: количество меченого антигена, связавшегося с антителами, обратно пропорционально количеству искомого антигена.

Слайд 72

РИА
Широкое распространение получили так называемый прямой и непрямой варианты твердофазного

радиоиммунологического метода, при которых используют полистироловые плашки с адсорбированными антигенами или антителами.
Метод применяют для выявления антигенов микроорганизмов, определения гормонов, ферментов, лекарственных веществ и иммуноглобулинов.

Слайд 73

Радиоиммунный анализ (РИА)

Слайд 74

Радиоиммунный анализ (РИА)

Слайд 75

Полимеразная цепная реакция (ПЦР)
ПЦР позволяет идентифицировать микроорганизмы по ДНК без

выделения его в виде чистой культуры.
ПЦР применяют:
для диагностики вирусных и бактериальных инфекций;
в иммунологии;
в урогинекологической практике;
в неопатологии;
в практике службы крови;
в пульмонологии и фтизиатрии;
в онкологии и др.

Слайд 76

ПЦР

Слайд 77

ПЦР

Слайд 78

Бокс для ПЦР работ

Слайд 79

ПЦР

Слайд 80

Реакция агглютинации латекса (РАЛ)
Для постановки РАЛ используют сенсибилизованные частицы полистиролового

латекса диаметром 0,5-1,2 мкм, которые в присутствии гомологичного иммунологического реагента (антигена или антитела) склеиваются.
Эта реакция происходит достаточно быстро – на протяжении 2-7 мин, что позволяет ее применять как экспресс-метод выявления антигенов и антител.
Нагруженные антителами частицы латекса широко используются для выявления антигенов вирусов и бактерий.

Слайд 81

Реакция агглютинации латекса (РАЛ)
Нагружая латекс антигенами, можно определять наличие антител

в сыворотке больного.
Такую модификацию РАЛ используют для выявления противогриппозных, противокраснушных, протикоревых антител и т.д.

Слайд 82

Проведение реакции латекс-агглютинации

Слайд 83

Проведение реакции латекс-агглютинации

Слайд 84

Применение иммунологических реакций в медицинской практике

Содержание

Реакции иммунитета – это реакции между антигеном и антителом или между

Реакции антигена с антителом называются серологическими ( от лат. serum –

Реакции иммунитета используют:при диагностике и иммунологических исследованиях у больных и здоровых

Иммунологические (серологические) реакции протекают в две фазы 1-я фаза – специфическая Образование

1-я фаза

2-я фаза – неспецифическаяВ этой фазе специфический комплекс антиген-антитело взаимодействует

2-я фаза

Схема взаимодействия антигена с антителом

Кровь для серологических реакций берут с конца 1-й начала 2-й недели

Из крови готовят сыворотку иопределяют титр антител, т.е.наибольшее разведение, в котором

Реакция агглютинации (РА)РА – это склеивание и выпадение в осадок

РА применяютдля определения антител в сыворотке крови больных при брюшном

Компоненты РА:Антитела (агглютинины) – находятся в сыворотке крови или иммунной

РА на стекле (ориентировочная реакция)На обезжиренное предметное стекло пастеровской пипеткой

Внимание! Нельзя переносить культуру из сыворотки в каплю ФР, которая является

Схема реакции агглютинации на стекле

Развернутая реакция агглютинацииВ пробирках готовят двукратные разведения сыворотки от 1:50

Окончательный результат – через 18-20 часов (выдерживая при комнатной температуре).Результат: КС

Реакция агглютинации

Реакция ВидаляПрименяют для диагностики брюшноготифа и паратифов А и В.Ставят

Реакцию ставят с двумя диагностикумами О и Н. О-антитела появляются первыми

Реакция Видаля

Реакция гемагглютинации (РГА)Первая РГА относится к серологическим. В этой реакции

РГА

РГАВторая РГА не является серологической. В ней склеивание эритроцитов вызывают

РГА

Реакция непрямой гемагглютинации (РНГА)РНГА основана на том, что эритроциты, если на

Компоненты РНГААнтитела (сыворотка больного); антиген (эритроцитарный диагностикум); ФР

РНГА ставят в пластинах с лунками

Постановка РНГАВ пластинах с лунками делают двукратные разведения сыворотки (1:10

Учет РНГАположительная реакция – осадок в виде «зонтика»;отрицательная реакция –

Учет РНГАСтавят в пластинах с лунками

РНГА

Реакция торможения гемагглютинации (РТГА)Основана на способности антител иммунной сыворотки нейтрализовать вирусы,

Учет РТГАположительная реакция – осадок в виде «пуговки»;отрицательная реакция –

РТГА

РСК – реакция связывания комплементаРСК основана на том, что специфический комплекс

РСКВ РСК участвуют 2 системы: основная и гемолитическая иначе

Основная системаАнтиген – лизат, экстракт, гаптен; реже взвесь микроорганизмов; Антитело

Гемолитическая системаАнтиген – эритроциты барана; Антитело – гемолизин к эритроцитам

РезультатЕсли в крови человека есть антитела, они свяжутся с антигеном;

Схема РСК с сывороткой больного человека

РезультатЕсли в крови человека нет антител, антиген и комплемент остаются

Схема РСК с сывороткой здорового человека

Результаты РСК

РСК

РСК

Реакция преципитации (РП)Применяют для определения антигена при диагностике ряда инфекций

Реакция кольцепреципитацииВ преципитационную пробирку с помощью пастеровской пипетки вносят 0,2-0,3

Реакция кольцепреципитацииПробирку при этом держат в наклонном положении;При правильном наслаивании между

Реакция кольцепреципитации

Реакция кольцепреципитации

Механизм и положительный результат реакции кольцепреципитации

Реакция преципитации в агаре Применяют для определения токсигенности культуры, например при

Расстояние бляшек от края полосок бумаги 0,5-0,7 см. Между двумя бляшками

Реакция преципитации в агаре.

Реакция нейтрализации (РН)Антитела иммунной сыворотки способны нейтрализовать повреждающее действие микроорганизмов или

При постановке реакции смесь а/г – а/т, полученную in vitro вводят

Реакция иммунофлюоресценции (РИФ)Основана на том, что иммунные сыворотки, к которым химическим

Токсоплазмы

Пневмококки

Иммуноферментный анализ (ИФА) ИФА – выявление антигенов с помощьюсоответствующих им антител,

ИФАИФА применяют для диагностики вирусных, бактериальных и паразитарных болезней, в

ИФА

Результат ИФА. Желтый цвет раствора в лунке является положительным результатом

ИммуноблоттингОпределение антигенов или антител спомощью известных сывороток или антигенов. Метод

Иммуноблоттинг

Радиоиммунологический анализ (РИА)РИА – количественное определение антител или антигенов, меченных радионуклидом,

Радиоиммунологический анализ После их взаимодействия отделяю образовавшийся радиоактивный комплекс антиген-антитело и

РИАШирокое распространение получили так называемый прямой и непрямой варианты твердофазного

Радиоиммунный анализ (РИА)

Радиоиммунный анализ (РИА)

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) ПЦР позволяет идентифицировать микроорганизмы по ДНК без

Реакции иммунитета используют:
при диагностике и иммунологических исследованиях у больных и здоровых

Иммунологические (серологические) реакции протекают в две фазы
1-я фаза – специфическая
Образование

2-я фаза – неспецифическая
В этой фазе специфический комплекс антиген-антитело взаимодействует

Из крови готовят сыворотку и
определяют титр антител, т.е.
наибольшее разведение, в котором

Реакция агглютинации (РА)
РА – это склеивание и выпадение в
осадок

РА применяют
для определения антител в
сыворотке крови больных при
брюшном

Компоненты РА:
Антитела (агглютинины) – находятся в сыворотке крови или иммунной

РА на стекле (ориентировочная реакция)
На обезжиренное предметное стекло пастеровской пипеткой

Развернутая реакция агглютинации
В пробирках готовят двукратные разведения сыворотки от 1:50

Окончательный результат – через 18-20 часов (выдерживая при комнатной температуре).
Результат: КС

Реакция Видаля
Применяют для диагностики брюшного
тифа и паратифов А и В.
Ставят

Реакцию ставят с двумя диагностикумами О и Н.
О-антитела появляются первыми

Реакция гемагглютинации (РГА)
Первая РГА относится к серологическим.
В этой реакции

РГА
Вторая РГА не является серологической.
В ней склеивание эритроцитов вызывают

Реакция непрямой гемагглютинации (РНГА)
РНГА основана на том, что эритроциты,
если на

Компоненты РНГА
Антитела (сыворотка больного);
антиген (эритроцитарный диагностикум);
ФР

Постановка РНГА
В пластинах с лунками делают двукратные разведения сыворотки (1:10

Учет РНГА
положительная реакция – осадок в виде «зонтика»;
отрицательная реакция –

Учет РНГА
Ставят в пластинах с лунками

Реакция торможения гемагглютинации (РТГА)
Основана на способности антител иммунной сыворотки нейтрализовать вирусы,

Учет РТГА
положительная реакция – осадок в виде «пуговки»;
отрицательная реакция –

РСК – реакция связывания комплемента
РСК основана на том, что специфический комплекс

РСК
В РСК участвуют 2 системы: основная
и гемолитическая иначе

Основная система
Антиген – лизат, экстракт, гаптен; реже взвесь микроорганизмов;
Антитело

Гемолитическая система
Антиген – эритроциты барана;
Антитело – гемолизин к эритроцитам

Результат
Если в крови человека есть антитела, они свяжутся с антигеном;

Результат
Если в крови человека нет антител, антиген и комплемент остаются

Реакция преципитации (РП)
Применяют для определения антигена при диагностике ряда инфекций

Реакция кольцепреципитации
В преципитационную пробирку с помощью пастеровской пипетки вносят 0,2-0,3

Реакция кольцепреципитации
Пробирку при этом держат в наклонном положении;
При правильном наслаивании между

Реакция преципитации в агаре
Применяют для определения токсигенности культуры, например при

Расстояние бляшек от края полосок
бумаги 0,5-0,7 см. Между двумя бляшками

Реакция нейтрализации (РН)
Антитела иммунной сыворотки способны нейтрализовать повреждающее действие микроорганизмов или

При постановке реакции смесь а/г – а/т,
полученную in vitro вводят

Реакция иммунофлюоресценции (РИФ)
Основана на том, что иммунные сыворотки, к которым химическим

Иммуноферментный анализ (ИФА)
ИФА – выявление антигенов с помощью
соответствующих им антител,

ИФА
ИФА применяют для диагностики вирусных, бактериальных и паразитарных болезней, в

Иммуноблоттинг
Определение антигенов или антител с
помощью известных сывороток или антигенов.
Метод

Радиоиммунологический анализ (РИА)
РИА – количественное определение антител или антигенов, меченных радионуклидом,

Радиоиммунологический анализ
После их взаимодействия отделяю образовавшийся радиоактивный комплекс антиген-антитело и

РИА
Широкое распространение получили так называемый прямой и непрямой варианты твердофазного

Полимеразная цепная реакция (ПЦР)
ПЦР позволяет идентифицировать микроорганизмы по ДНК без