Расширение кругозора

Содержание

Слайд 2

Блок I «Как всё работает?» Блок II «Молекулярная биология. Работа в лаборатории» Блок III «Расширение кругозора»

Блок I «Как всё работает?» Блок II «Молекулярная биология. Работа в лаборатории» Блок

III «Расширение кругозора»
Слайд 3

Блок I «Как всё работает?» Как попасть в науку? Результат (цель

Блок I «Как всё работает?»

Как попасть в науку?
Результат (цель ?) научной

работы – статья
Искусство презентации + научные журналы
Самообразование: обучающие/информационные ресурсы
Слайд 4

Результат научной работы - статья Научная статья – это написанный и

Результат научной работы - статья

Научная статья – это написанный и опубликованный

доклад, описывающий результаты оригинальных исследований.
Слайд 5

Результат научной работы - статья Ревью/овервью (Review/overview) Представляет собой обзор информации

Результат научной работы - статья

Ревью/овервью
(Review/overview)

Представляет собой обзор информации на определенную тему
Содержит

данные большого количества исследований

Экспериментальная статья (Primary research article)

Содержит оригинальные данные
Повествование идет от лица исследователей, участвовавших в экспериментах
Содержит детальную информацию об условиях проведения экспериментов

Сколько статей достаточно прочитать, для того, чтобы хорошо разбираться в теме?
Что ценнее: ревью или экспериментальная статья?

?

?

Слайд 6

Структура научной статьи

Структура научной статьи

Слайд 7

Название статьи, авторы, организация

Название статьи, авторы, организация

Слайд 8

Название журнала Дата публикации DOI (идентификатор цифрового объекта)

Название журнала Дата публикации DOI (идентификатор цифрового объекта)

Слайд 9

Abstract; Содержание

Abstract; Содержание

Слайд 10

Дополнительная информация Хронология публикации Ревьюеры Другое

Дополнительная информация
Хронология публикации
Ревьюеры
Другое

Слайд 11

Структура экспериментальной статьи Введение (Introduction) Теоретическое введение Описание модели заболевания Актуальность

Структура экспериментальной статьи

Введение (Introduction)
Теоретическое введение
Описание модели заболевания
Актуальность темы
Материалы и методы (Materials

and Methods)
Каждый метод в отдельном параграфе
Информация о животных (какую информацию будем указывать?)
Условия проведения эксперимента
Используемые реагенты
Статистический анализ
Слайд 12

Структура экспериментальной статьи Результаты + обсуждение (Results + Discussion) Поэтапные эксперименты

Структура экспериментальной статьи

Результаты + обсуждение (Results + Discussion)
Поэтапные эксперименты (распределение по

параграфам)
Название параграфа – мини-вывод по эксперименту
Изображения/Таблицы = Figures/Tables
Заключение (Conclusion)
Тезисное изложение результатов
Развитие исследования
Слайд 13

Структура экспериментальной статьи Этический аспект (Ethics statement) Соблюдение норм по обращению

Структура экспериментальной статьи

Этический аспект (Ethics statement)
Соблюдение норм по обращению с животными
Вклад

авторов (Author contributions + Acknowledgments)
Другое
Ссылка на дополнительные материалы (Supplementary Materials)
Информация о грантах
Список литературы (References)
Строгие требования к оформлению, специфичные для каждого журнала
Слайд 14

Базы данных Первичные: хранилища первичных структур полимеров - ДНК и аминокислотных

Базы данных

Первичные: хранилища первичных структур полимеров - ДНК и аминокислотных последовательностей

(EMBL (Европа) , GenBank (США) , DDBJ (Япония))
Вторичные: обработанные первичные данные – паттерны и др.
Составные: сочетают инф-ию из 1ичн и 2ичн, дают больше возможностей при поиске.

P.S. Существует даже база данных по базам данных!)

Слайд 15

NCBI (National Center for Biotechnological Information; USA) - центральный институт обработки

NCBI (National Center for Biotechnological Information; USA)

- центральный институт обработки

и хранения данных молекулярной биологии.

https://www.ncbi.nlm.nih.gov/

NCBI

Базы данных статей научной литературы (PubMed)

Базы данных белковых доменов, ДНК (GenBank) и РНК

Таксономическая информация (TaxBrowser) – поиск инф-ии о конкретном биологическом виде

Программы биоинформатики (BLAST)

https://en.wikipedia.org/wiki/National_Center_for_Biotechnology_Information

Слайд 16

Блок II «Молекулярная биология. Работа в лаборатории» Лабораторные (и не очень)

Блок II «Молекулярная биология. Работа в лаборатории»

Лабораторные (и не очень) животные
Методы:

ПЦР, гель-электрофорез
Реал-тайм ПЦР, секвенирование, цитометрия
Слайд 17

Смысл: 1x ДНК 1000x ДНК Метод 1: Полимеразная Цепная реакция (ПЦР)

Смысл:

1x ДНК

1000x ДНК

Метод 1: Полимеразная Цепная реакция (ПЦР)

Слайд 18

Метод 1: Полимеразная Цепная реакция (ПЦР) ДНК Нуклеотид А Т Г Ц

Метод 1: Полимеразная Цепная реакция (ПЦР)

ДНК

Нуклеотид

А
Т
Г
Ц

Слайд 19

Метод 1: Полимеразная Цепная реакция (ПЦР) Реакционная смесь: Матрица – анализируемая

Метод 1: Полимеразная Цепная реакция (ПЦР)

Реакционная смесь:
Матрица – анализируемая ДНК
Праймеры –

олигонуклеотиды (15-30 штук), комплементарные цепям ДНК Forward (прямой) и Reverse (обратный)
Смесь нуклеотидов - dNTP (дезоксинуклеотидтрифосфаты): dATP+dTTP+dGTP+dCTP
Фермент – термостабильная ДНК-полимераза (Taq-полимераза; Pfu-полимераза)
Буфер – раствор, содержащий: - ионы Mg (зачем?) - соли, для поддержания pH - детергент Tween 20 + БСА (бычий сывороточный альбумин) – предотвращение «налипания» реагентов
Слайд 20

Метод 1: Полимеразная Цепная реакция (ПЦР) Strip-tubes «Стрипы» Амплификатор («чёрный ящик»)

Метод 1: Полимеразная Цепная реакция (ПЦР)

Strip-tubes «Стрипы»

Амплификатор («чёрный ящик»)

Слайд 21

Метод 1: Полимеразная Цепная реакция (ПЦР) Strip-tubes «Стрипы» 1x ДНК 1000x ДНК

Метод 1: Полимеразная Цепная реакция (ПЦР)

Strip-tubes «Стрипы»

1x ДНК

1000x ДНК

Слайд 22

Режим работы амплификатора (этапы ПЦР)

Режим работы амплификатора (этапы ПЦР)

Слайд 23

https://www.yourgenome.org Режим работы амплификатора (этапы ПЦР)

https://www.yourgenome.org

Режим работы амплификатора (этапы ПЦР)

Слайд 24

? Почему в ПЦР используют термостабильные ДНК-полимеразы? Сколько молекул ДНК мы

?

Почему в ПЦР используют термостабильные ДНК-полимеразы?
Сколько молекул ДНК мы получим, если

прогоним 1 молекулу через 3 цикла?
Каким требованиям должны соответствовать праймеры?
Можно ли проводить амплификацию вечно?

?

Слайд 25

Метод 2: Электрофорез в агарозном геле (визуализация результатов ПЦР) 1) ТАЕ-буфер

Метод 2: Электрофорез в агарозном геле (визуализация результатов ПЦР)

1) ТАЕ-буфер + агароза

=> микроволновка
2) Добавление этидиум бромида (ОСТОРОЖНО!)

1

2

Слайд 26

Метод 2: Электрофорез в агарозном геле (визуализация результатов ПЦР) 3 4 https://www.wikihow.com/Make-an-Electrophoresis-Gel

Метод 2: Электрофорез в агарозном геле (визуализация результатов ПЦР)

3

4

https://www.wikihow.com/Make-an-Electrophoresis-Gel

Слайд 27

Метод 2: Электрофорез в агарозном геле (визуализация результатов ПЦР) _ _ _ +++ https://www.wikihow.com/Make-an-Electrophoresis-Gel

Метод 2: Электрофорез в агарозном геле (визуализация результатов ПЦР)

_ _ _

+++

https://www.wikihow.com/Make-an-Electrophoresis-Gel

Слайд 28

? Какая проба содержит в себе более длинный участок ДНК? Зачем

?

Какая проба содержит в себе более длинный участок ДНК? Зачем проба с

«лестницей»?
Какие контроли необходимо иметь?

?

?

Слайд 29

? Какая проба содержит в себе более длинный участок ДНК? Зачем

?

Какая проба содержит в себе более длинный участок ДНК? Зачем проба с

«лестницей»?
Какие контроли необходимо иметь?

?

Marker ladder

Слайд 30

Обнаружение инфекционных организмов (бактерий/вирусов) путем анализа клинических проб. Обнаружение мутаций (наследственные/опухолевые

Обнаружение инфекционных организмов (бактерий/вирусов) путем анализа клинических проб.
Обнаружение мутаций (наследственные/опухолевые заболевания)

https://biomolecula.ru/articles/metody-v-kartinkakh-polimeraznaia-tsepnaia-reaktsiia
https://nplus1.ru/news/2017/05/31/DNA-mummies

Установление

личности преступников/жертв по ДНК
Определение отцовства

Секвенирование ДНК
Целенаправленное внесение мутаций с помощью ПЦР

Изучение вымерших животных/предков человека
Изучение генетического материала известных личностей (фараоны)

Клиническая
медицина

Криминалистика

Генная инженерия

Палеонтология

Области применения ПЦР