Геном и геномные библиотеки

Содержание

Слайд 2

Слайд 3

Основные стадии технологии создания геномной библиотеки

Основные стадии технологии создания геномной библиотеки

Слайд 4

1 - линеаризация ДНК вектора рестриктазой BamHI; 2 - расщепление линеаризованной


1 - линеаризация ДНК вектора рестриктазой BamHI;
2 - расщепление

линеаризованной ДНК вектора рестриктазой EcoRI с образованием "плечей";
3 - введение в вектор клонируемого EcoRI-фрагмента ДНК

Искусственная хромосома дрожжей со вставкой 100-700 т.п.н.

Искусственная мини-хромосома дрожжей (пока без истинных генов, кодирующих белки). Электронная микроскопия

Слайд 5

Введение рекДНК в клетку

Введение рекДНК в клетку

Слайд 6

Слайд 7

Схема строения пептидогликана бактерий (муреиновый мешок) остов из N–ацетилмурамовой кислоты (MypNAц)

Схема строения пептидогликана бактерий
(муреиновый мешок)

остов из N–ацетилмурамовой кислоты (MypNAц) и

N–ацетилглюкозамина (ГлюNAц); боковые пептиды, состоящие из L–аланина (L–Ала), D–глутамата (D–Глу), L–лизина (L–Лиз) и D–аланина (D–Ала); пептидные (Гли5) поперечные мостики.

Модель бактериальной (прокариотической) клетки, созданная на основе электронной микроскопии

Слайд 8

Структура клеточной стенки бактерий (схема) Грамположительных (Gr+) Грамотрицательных (Gr-)

Структура клеточной стенки бактерий (схема)

Грамположительных (Gr+)

Грамотрицательных (Gr-)

Слайд 9

Для бактерий наиболее оптимальным способом доставки рекДНК являются БАКТЕРИОФАГИ (применение ограничено

Для бактерий наиболее оптимальным способом доставки рекДНК являются БАКТЕРИОФАГИ (применение ограничено

из-за лизиса клетки-хозяина)

Инфицирование фагом λ клетки E.coli

Слайд 10

Слайд 11

Схематическое изображение фагоцитоза эукариотической клетки Химическая обработка клеток Конц. СаСl2 + 42°С, 1,5 минут

Схематическое изображение фагоцитоза эукариотической клетки

Химическая обработка клеток
Конц. СаСl2 + 42°С, 1,5

минут
Слайд 12

Метод электропорации Высоковольтные импульсы (напряжение 200 - 350 В, длительность импульса

Метод электропорации

Высоковольтные импульсы (напряжение 200 - 350 В, длительность импульса 54

мс) приводят к образованию пор (электропробой) в цитоплазматической мембране
Слайд 13

Электропорация. Появление пор в липидном бислое в результате воздействия импульсного электрического

Электропорация.

Появление пор в липидном бислое в результате воздействия импульсного электрического

поля.
Диаметр пор сост. десятки нанометров, соизмерим с размером рекДНК

Электронная микрофотография клеток после электропорации

Слайд 14

УЗ порация

УЗ порация

Слайд 15

Биохимический метод увеличения проницаемости клеточных стенок. Основан на использовании ферментов, обратимо разрушающих клеточную стенку

Биохимический метод увеличения проницаемости клеточных стенок. Основан на использовании ферментов, обратимо разрушающих

клеточную стенку
Слайд 16

Схема строения клеточной стенки грамположительных бактерий

Схема строения клеточной стенки грамположительных бактерий

Слайд 17

Схема строения клеточной стенки грамотрицательных бактерий

Схема строения клеточной стенки грамотрицательных бактерий

Слайд 18

фотография клеточной стенки дрожжевой клетки У дрожжей клеточные стенки состоят из

фотография клеточной стенки дрожжевой клетки

У дрожжей клеточные стенки состоят из β-глюканов

и частично фосфорилированных маннатов

Комплексный дрожжелитический препарат - ферменты фосфоманназа, β-глюканаза-1,3

Слайд 19

– клеточная стенка состоит из α- и β-глюканов, гликопротеидов и хитина.

– клеточная стенка состоит из α- и β-глюканов, гликопротеидов и хитина.


Для их разрушения используют комплексный дрожжелитический препарат, содержащий ферменты
- фосфоманназу,
- β-глюканазу-1,3 или -1,6,
- хитиназу

Плесневые (низшие) грибы

Слайд 20

Введение чужой ДНК в клетку путем микроинъекции Только в крупные соматические клетки (неполовые) многоклеточных организмов

Введение чужой ДНК в клетку путем микроинъекции

Только в крупные соматические клетки

(неполовые) многоклеточных организмов
Слайд 21

Липосома. Схема Трансфоормация липосомами. Биологические мембраны ( цитоплазматические клеточные). СХЕМА

Липосома. Схема

Трансфоормация липосомами.

Биологические мембраны ( цитоплазматические клеточные). СХЕМА

Слайд 22

Технология липосом

Технология липосом