Содержание
- 2. Высокоэффективная жидкостная хроматография (ВЭЖХ) По сути -это изначально созданная колоночная жидкостная хроматография, в которой применение современного
- 3. Область применения ВЭЖХ 2. Биоорганические соединения: Углеводы, сложные липиды, гормоны, органические кислоты, пептиды, витамины, пигменты, ПАВ
- 4. МИЛИХРОМ А-02, Россия Alliance, Waters, США Agilent 1200, США Модели аналитических хроматографов для ВЭЖХ
- 5. Условия ВЭЖХ: «мягкий» температурный диапазон применение неразрушающих детекторов - простота сбора вытекающей подвижной фазы развитие препаративных
- 6. Препаративные хроматографы с коллекторами фракций коллектор фракций
- 7. Схема хроматографов для ВЭЖХ емкости для растворителей смеситель насос инжектор термостат колонки детектор емкость для слива
- 8. Принцип «Подобное растворяется в подобном; а разделяется противоположным» работает и в ВЭЖХ Элюция – процесс прохождения
- 9. время удерживания ~ объем удерживания Объем прошедшей подвижной фазы при постоянной скорости потока
- 10. Классификация жидкостной хроматографии По характеристикам и взаимодействиям неподвижной фазы: Нормально-фазовая Обращенно-фазовая Ионообменная Эксклюзионная
- 11. Неподвижные фазы: силикагель и его модификации, оксид алюминия Нормально-фазовая жидкостная хроматография: неподвижная фаза – полярная, подвижная
- 12. Нормально-фазовая жидкостная хроматография: Взаимодействия веществ и неподвижной фазы Разделение: мало- и нерастворимые в воде вещества, позиционные
- 13. Неподвижные фазы: модификации силикагеля Обращенно-фазовая жидкостная хроматография: неподвижная фаза – неполярная, подвижная фаза – полярная. Элюенты:
- 14. Обращенно-фазовая жидкостная хроматография Неподвижные фазы: расположение привитых остатков на поверхности силикагеля R = -C18H37 силикагель
- 15. 75 % от всех разделений ВЭЖХ – это обращенно-фазовый тип Обращенно-фазовая жидкостная хроматография Взаимодействия веществ и
- 16. Обращенно-фазовая жидкостная хроматография
- 17. Выход веществ с разной полярностью на разных неподвижных фазах Нормальная фаза Обращенная фаза Слабополярный элюент Сильнополярный
- 18. Элюенты: водные растворы солей, кислот, щелочей Катионит: делит катионы Анионит: делит анионы Неподвижная фаза (ионообменные смолы)
- 19. Эксклюзионная или гель-проникающая хроматография Применение: анализ полимеров по молекулярному весу молекул Неподвижные фазы имеют выраженную поровую
- 20. КОЛОНКА – «СЕРДЦЕ» ХРОМАТОГРАФА Успех разделения в ВЭЖХ во многом зависит от типа частиц и качества
- 21. Колонки для ВЭЖХ Колонки для аналитических разделений
- 22. Имеют указатель направления потока, который не следует менять Внутренняя поверхность – гладкий металл, давление до 300
- 23. Выбор состава элюента: свойства разделяемых веществ, свойства неподвижной фазы У элюентов важны свойства: Вязкость Прозрачность в
- 24. Свойства элюентов: смешиваемость Название Уксусная кислота Ацетон Ацетонитрил Бензол Бутанол Тетрахлорид углерода Хлороформ Циклогексан Циклопентан Дихлорэтан
- 25. Свойства элюентов: элюирующая сила Элюирующая сила – способность элюента вытеснять адсобированные анализируемые вещества в поверхности адсорбента,
- 26. Компоненты ВЭЖХ прибора: Система подачи элюентов Фильтрация Дегазация Смешивание Контроль давления (50-200 атм)
- 27. Компоненты ВЭЖХ прибора: Система подачи элюентов
- 29. Низкие скорости потока 1-10 мл/мин
- 31. Схема плунжерного насоса возвратно-поступательного типа двигатель Возвратно- поступательный поршень Шаровые пропускные клапаны уплотни- тель растворитель колонка
- 32. Система дозирования проб Петля объемом 5-100 мкл, 6-ходовый кран Шприцевого типа
- 33. Соединения в ВЭЖХ Важно! Отсутствие течи дает постоянное давление и скорость потока, как следствие эффективное разделение
- 34. ДЕТЕКТОР – «ГЛАЗА» ХРОМАТОГРАФА В ВЭЖХ - это преобразователь концентрации анализируемого вещества, растворенного в подвижной фазе,
- 35. Рефрактометрический детектор Достоинства: Универсальность Простота Дешевизна Применимость для неокрашенных веществ
- 36. Достоинства Универсальный (возможен анализ практически всех групп веществ) Неразрушающий вид детектирования Прост в аппаратурном оформлении Доступен
- 37. Типы фотометрических детекторов: Фотометры с набором светофильтров на несколько длин волн; Спектрофотометры с фиксируемой для всего
- 38. СПЕКТРОФОТОМЕТРИЯ В ВЭЖХ Монохроматический свет (световые колебания одной частоты) от источника (лампа) интенсивностью I0 падает на
- 39. СПЕКТРОФОТОМЕТРИЯ В ВЭЖХ
- 40. СПЕКТРОФОТОМЕТРИЯ В ВЭЖХ СРАВНЕНИЕ СПЕКТРОВ ПОГЛОЩЕНИЯ
- 41. СПЕКТРОФОТОМЕТРИЯ В ВЭЖХ МНОГОВОЛНОВОЕ ДЕТЕКТИРОВАНИЕ
- 42. Масс-спектрометрический детектор в ВЭЖХ Времяпролетный масс-спектрометр
- 43. Подготовка биологических образцов для хроматографических анализов Биологические пробы часто не подходят для прямого анализа приборной хроматографией
- 44. Методические приемы подготовки биологических образцов Гомогенизация (измельчение) Добавление реагентов Установка рН Смешивание (встряхивание) Нагревание (охлаждение) Осаждение
- 45. Для разделения и выделения групп веществ из сложных матриц: нужная группа элюируется, т.е. смывается с силикагеля,
- 47. Скачать презентацию