Комплексное лечение хронического пародонтита на основании изучения гипоксия-зависимых антимикробных иммунных реакций

Содержание

Слайд 2

Актуальность исследования При колонизации пародонтогенных микробов в десневом желобке рО2 снижается

Актуальность исследования

При колонизации пародонтогенных микробов в десневом желобке рО2 снижается

с 8,4 кПа до 2,33 кПа, при гингивите и ХГП формирование биопленки анаэробных бактерий приводит к резкому ограничению кислородного снабжения тканей

Прогрессирование ХГП

Дентальный гель, содержаний NADH (Никотинамид-Аденин-Динуклеотид-Гидрид) – мощный биологический антиоксидант

Влияние NADH на гипоксия-зависимые факторы регуляции иммунных реакций, воспаление и регенерацию тканей неизвестно

?

Слайд 3

Повышение эффективности диагностики, лечения и прогноза развития хронического пародонтита на основе

Повышение эффективности диагностики, лечения и прогноза развития хронического пародонтита на основе

современных методов исследования гипоксия-зависимых антимикробных иммунных комплексов
Слайд 4

Задачи исследования Изучить диагностическую информативность клинико-лабораторных показателей у больных с хроническим

Задачи исследования

Изучить диагностическую информативность клинико-лабораторных показателей у больных с хроническим

пародонтитом в зависимости от степени тяжести

1

Слайд 5

Задачи исследования Оценить диагностическую значимость гипоксия-зависимого фактора (HIF-1α), кателицидина LL37 и

Задачи исследования

Оценить диагностическую значимость гипоксия-зависимого фактора (HIF-1α), кателицидина LL37 и

провоспалительного ИЛ-6 во взаимосвязи с характеристиками микробиоценоза содержимого пародонтального кармана (ПК)

2

Слайд 6

Задачи исследования Определить клиническую эффективность дентального геля Никотинамид-Аденин-Динуклеотид-Гидрида в составе комплексного лечения хронического генерализованного пародонтита. 3

Задачи исследования

Определить клиническую эффективность дентального геля Никотинамид-Аденин-Динуклеотид-Гидрида в составе комплексного

лечения хронического генерализованного пародонтита.

3

Слайд 7

Задачи исследования Установить патогенетическую значимость дентального геля Никотинамид-Аденин-Динуклеотид-Гидрида в составе комплексного

Задачи исследования

Установить патогенетическую значимость дентального геля Никотинамид-Аденин-Динуклеотид-Гидрида в составе комплексного

лечения хронического генерализованного пародонтита для коррекции нарушений гипоксия-зависимых иммунных реакций по динамике HIF-1α, кателицидина LL37 и ИЛ-6 в содержимом пародонтального кармана.

4

Слайд 8

Задачи исследования Разработать метод лечения хронического пародонтита легкой и средней степени

Задачи исследования

Разработать метод лечения хронического пародонтита легкой и средней

степени тяжести с учетом изучения содержания HIF-1α, кателицидина LL37 и ИЛ-6 в динамике и коррекции энергообмена клеток.

5

Слайд 9

Научные положения, выносимые на защиту

Научные положения, выносимые на защиту

Слайд 10

Научные положения, выносимые на защиту

Научные положения, выносимые на защиту

Слайд 11

Научные положения, выносимые на защиту

Научные положения, выносимые на защиту

Слайд 12

Научная новизна исследования

Научная новизна исследования

Слайд 13

Научная новизна исследования

Научная новизна исследования

Слайд 14

Теоретическая и практическая значимость исследования

Теоретическая и практическая значимость исследования

Слайд 15

Теоретическая и практическая значимость исследования

Теоретическая и практическая значимость исследования

Слайд 16

Материал исследования В клиническое исследование было включено 60 пациентов в возрасте

Материал исследования

В клиническое исследование было включено 60 пациентов в возрасте от

30 до 45 лет с хроническим генерализованным пародонтитом (МКБ К05.3) легкой и средней степени тяжести и 15 человек контрольной группы в возрасте 18-25 лет без стоматологических заболеваний
Основание для включения пациентов в исследование:
- диагноз «хронический генерализованный пародонтит» (К05.3 по МКБ-10) легкой и средней степени тяжести (глубина ПК менее 6 мм);
-состояние ремиссии.
Слайд 17

Методы исследования Клинические: индекс гигиены по OHI-S, папиллярно-маргинально-альвеолярный индекс (РМА), пародонтологический

Методы исследования

Клинические: индекс гигиены по OHI-S, папиллярно-маргинально-альвеолярный индекс (РМА), пародонтологический

индекс Рассела

Иммунологические: иммуноферментный метод определения концентрации гипоксия-зависимого фактора 1-α, ИЛ-6, кателицидина-LL37 в содержимом ПК

ПЦР в режиме реального времени: качественно-количественное определение содержания пародонтогенных бактерий

Статистический метод анализа результатов

Слайд 18

Получение биоматериала Биоматериал – экссудат пародонтальных карманов. Забор содержимого пародонтального кармана:

Получение биоматериала

Биоматериал – экссудат пародонтальных карманов.
Забор содержимого пародонтального кармана:
сбор

экссудата бумажным штифтом №25 в течение 20 сек; 2. один штифт в пробирку с реактивом «ДНК-экспресс» - транспортная среда и выделение ДНК;
3. другой штифт в пробирку с фосфатно-солевым буфером, инкубация 20 мин, центрифугирование, получение супернатанта.
доставка в иммунологическую лабораторию для проведения ПЦР в режиме реального времени и ИФА
Слайд 19

Группы пациентов 1 группа (n=30) – пациенты с ХГП (К05.3), которым

Группы пациентов

1 группа (n=30) – пациенты с ХГП (К05.3), которым

дополнительно
в пародонтальные карманы вводили дентальный гель Никотинамид-Аденин-Динуклеотид-Гидрида (экспозиция по 20 мин 1 раз в день) в течение 10 дней.
2 группа (n=30) – пациенты с ХГП легкой и средней степени тяжести (К05.3 по МКБ-10) и стандартным лечением ХГП.
Группа контроля (n=15) – пациенты в возрасте от 18 до 25 лет с удовлетворительным уровнем гигиены рта, отсутствием заболеваний пародонта в активной фазе.
Слайд 20

Лабораторные методы исследования Иммунологические: иммуноферментный анализ - концентрация гипоксия-зависимого фактора-1α, антимикробного

Лабораторные методы исследования

Иммунологические: иммуноферментный анализ - концентрация гипоксия-зависимого фактора-1α, антимикробного пептида

кателицидина LL37, интерлейкина-6 с помощью специфических тест-систем на иммуноферментном анализаторе Lisa ("Эрба Лахема с.р.о.", Чехия).
Слайд 21

ПЦР в режиме реального времени для качественно-количественного определения пародонтопатогенных бактерий Взятие

ПЦР в режиме реального времени для качественно-количественного определения пародонтопатогенных бактерий

Взятие

биопробы.
Выделение ДНК из биопробы
Качественное и количественное определение соотношения облигатно-анаэробных бактерий Porphyromonas endodontalis, Porphyromonas gingivalis, Aggregatibacter actinomycetemcomitans, Treponema denticola, Prevotella intermedia, Fusobacterium nucleatum, Tannerella forsythensis с помощью панели «Дентоскрин» (ООО НПФ «Литех», Россия) и амплификатора CFX 96 (БиоРад, США).
Критический уровень микроорганизмов в 1 мл исследуемого материала - 105.
Слайд 22

Cтатистический анализ результатов Корреляционный анализ, ROC-анализ, логистический регрессионный анализ. Продолжительность проспективного

Cтатистический анализ результатов

Корреляционный анализ, ROC-анализ, логистический регрессионный анализ.
Продолжительность проспективного наблюдения -

6 месяцев. Эпохи анализа клинического исследования – 14 дней, 3 и 6 мес. после окончания лечения, лабораторного исследования – 3 и 6 месяцев.
Слайд 23

Исходные клинические индексы пациентов

Исходные клинические индексы пациентов

Слайд 24

Изменение лабораторных показателей в содержимом ПК в зависимости от степени тяжести

Изменение лабораторных показателей в содержимом ПК в зависимости от степени тяжести

ХГП

* - достоверные отличия от здоровых пациентов, о – по сравнению с ХГП легкой степени тяжести при p<0,05

HIF-1alfa ИЛ-6 Кателицидин LL37

Слайд 25

Результаты корреляционного анализа между иммунорегуляторными, кислород-зависимыми факторами в содержимом пародонтальных карманов и клиническими индексами при ХГП

Результаты корреляционного анализа между иммунорегуляторными, кислород-зависимыми факторами в содержимом пародонтальных карманов

и клиническими индексами при ХГП
Слайд 26

Результаты корреляционного анализа между иммунорегуляторными, кислород-зависимыми факторами и количеством пародонтопатогенных бактерий

Результаты корреляционного анализа между иммунорегуляторными, кислород-зависимыми факторами и количеством пародонтопатогенных бактерий

в содержимом ПК при ХГП

* - статистически значимая связь при p<0,05

Слайд 27

Динамика индекса гигиены и индекса PMA в 1 и 2 группах

Динамика индекса гигиены и индекса PMA в 1 и 2 группах

ИГ

РМА

*

- достоверные отличия по сравнению с исходной величиной показателя при p<0,05
Слайд 28

Динамика глубины ПК и пародонтологического индекса в 1 и 2 группах Глубина ПК ПИ Рассела

Динамика глубины ПК и пародонтологического индекса в 1 и 2 группах

Глубина

ПК

ПИ Рассела

Слайд 29

Клинический пример Пациент Т., 1990 года рождения Диагноз: хронический генерализованный пародонтит

Клинический пример

Пациент Т., 1990 года рождения
Диагноз: хронический генерализованный пародонтит средней

степени тяжести.
До и после комплексного лечения с применением дентального геля Никотинамид-Аденин-Динуклеотид-Гидрида
Слайд 30

Динамика лабораторных показателей в 1 и 2 группах * * *

Динамика лабораторных показателей в 1 и 2 группах

*

*

* - достоверные отличия

по сравнению с исходными величинами
Слайд 31

Прогноз высокого риска прогрессирования ХГП от легкой к средней степени тяжести

Прогноз высокого риска прогрессирования ХГП от легкой к средней степени тяжести

Если

уровень HIF-1альфа в содержимом ПК до лечения выше 103 пг/мкл → высокий риск повышение тяжести ХГП с легкой до средней.
ДЧ=87,1%, ДС=79,3%, ОШ=4,2

Если уровень кателицидина LL37 в содержимом ПК до лечения выше 17,2 пг/мл → высокий риск повышение тяжести ХГП с легкой до средней.
ДЧ=88%, ДС=65,7%, ОШ=2,6

Слайд 32

Выводы У пациентов с ХГП при средней тяжести заболевания в отличие

Выводы

У пациентов с ХГП при средней тяжести заболевания в отличие от

легкой степени поражения пародонта наиболее выраженное повышение (p<0,05) концентрации в экссудате пародонтальных карманов отмечается для гипоксия-зависимого фактора HIF-1a (в 3,15 раз) и кателицидина LL37 (в 2,9 раз). При легкой степени тяжести ХГП концентрация HIF-1a в десневой жидкости не отличается от контрольного уровня у здоровых лиц. Концентрация ИЛ-6 в содержимом пародонтального кармана значительно превышает контрольное значение как при легкой (в 11,4 раз), так и при средней (в 13,6 раз) степени тяжести заболевания. Диагностическая информативность определения клинико-лабораторных показателей в содержимом ПК для мониторинга степени патологии пародонта выше для HIF-1a и кателицидина LL37.

1

Слайд 33

Выводы Наиболее выраженная тесная корреляционная зависимость с содержанием пародонтопатогенных бактерий в

Выводы

Наиболее выраженная тесная корреляционная зависимость с содержанием пародонтопатогенных бактерий в пародонтальных

карманах у пациентов с ХГП установлена для концентрации кателицидина LL37 (R=0,913; p<0,001) и HIF-1α (R=0,728; p=0,004), для концентрации ИЛ-6 связь была значимой, но умеренной (R=0,497; p=0,02).

2

Слайд 34

Выводы Использование НАДГ в комплексном лечении пациентов с ХГП по сравнению

Выводы

Использование НАДГ в комплексном лечении пациентов с ХГП по сравнению со

стандартной терапией сопровождается улучшением гигиенического состояния полости рта в течение 3 мес. от начала терапии, более эффективным купированием воспалительных изменений десны со снижением индекса РМА, ограничением деструкции мягких и твердых тканей пародонта с сокращением глубины ПК и снижением пародонтального индекса, начиная через 14 дней наблюдения.

3

Слайд 35

Выводы Дополнительное терапевтическое воздействие антиоксиданта НАДГ приводит к более выраженному снижению

Выводы

Дополнительное терапевтическое воздействие антиоксиданта НАДГ приводит к более выраженному снижению синтеза

и накопления HIF-1α и ИЛ-6 в воспалительном экссудате у пациентов со средней тяжестью заболевания через 3 мес. и у больных с легкой и средней степенью тяжести поражения пародонта через 6 мес. наблюдения. После лечения у пациентов 1 и 2 групп различия концентрации кателицидина LL37 в содержимом пародонтальных карманов формируются только через 6 мес. наблюдения. Дополнительное терапевтическое воздействие антиоксиданта НАДГ сопровождается наиболее эффективным и последовательным снижением в содержимом пародонтальных карманов гипоксия-зависимого фактора HIF-1α.

4

Слайд 36

Выводы У пациентов с ХГП при повышении уровня HIF-1α в содержимом

Выводы

У пациентов с ХГП при повышении уровня HIF-1α в содержимом пародонтальных

карманов выше 103 пг/мкл, риск развития остеодеструкции возрастает в 4,2 раза (p<0,05), при повышении концентрации кателицидина LL37 более 17,2 пг/мл – в 2,6 раза (p<0,05), что требует дополнительного курсового использования дентального геля НАДГ в комплексе стандартных мер лечения для повышения клинической эффективности терапии.

5

Слайд 37

Практические рекомендации 1

Практические рекомендации

1

Слайд 38

Практические рекомендации 2

Практические рекомендации

2

Слайд 39

Практические рекомендации 3

Практические рекомендации

3