Патогенетическое и клиническое значение кишечной микрофлоры у больных с синдромом раздраженного кишечника

Содержание

Слайд 2

распространенность СРК в популяции – 20% значительное снижение качества жизни высокие

распространенность СРК в популяции – 20%
значительное снижение качества жизни
высокие материальные затраты

на лечение и обследование больных
недостаточная изученность патогенеза
изменение кишечной микрофлоры – один из факторов, приводящих к формированию симптомов заболевания
совершенствование методов диагностики и поиск более эффективных схем лечения

Актуальность темы

Слайд 3

Цель исследования изучить патогенетическое значение кишечной микрофлоры в развитии симптомов у

Цель исследования
изучить патогенетическое значение кишечной микрофлоры в развитии симптомов у больных

с синдромом раздраженного кишечника, ее взаимосвязь с клиническим вариантом течения заболевания и наличием эмоциональных нарушений
Слайд 4

изучить качественный и количественный состав кишечной микрофлоры у больных СРК сопоставить

изучить качественный и количественный состав кишечной микрофлоры у больных СРК
сопоставить результаты

применения современных методов оценки состава кишечной микрофлоры с широко распространенным методом бактериологического исследования кала
оценить наличие синдрома избыточного бактериального роста (СИБР) у больных СРК
оценить влияние различных групп препаратов на клиническую картину заболевания, состав кишечной микрофлоры и качество жизни у больных СРК

Задачи исследования

Слайд 5

у больных СРК впервые изучен состав кишечной микрофлоры с использованием 3-х

у больных СРК впервые изучен состав кишечной микрофлоры с использованием 3-х

методов диагностики: бактериологического исследования кала, водородного дыхательного теста с лактулозой, секвенирования 16S рРНК бактерий в образцах кала
выявлены корреляции наличия СИБР с патогенетическими механизмами развития СРК (моторикой, ректальной чувствительностью, эмоциональными нарушениями)
проведена оценка эффективности применения различных видов пробиотиков и энтерокинетиков в сравнении с плацебо и их влияния на купирование клинических симптомов, состояние кишечной микрофлоры и качество жизни при различных вариантах СРК

Научная новизна

Слайд 6

Мужчины и женщины в возрасте от 18 до 55 лет, с

Мужчины и женщины в возрасте от 18 до 55 лет, с

диагнозом СРК, подтвержденным соответствием жалоб пациентов «Римским критериям III», а также отсутствием органических изменений при проведении лабораторных и инструментальных исследований

Критерии включения в исследование

Слайд 7

Контрольная группа (n = 15) Протокол исследования клиническое обследование: сбор жалоб,

Контрольная группа (n = 15)

Протокол исследования

клиническое обследование: сбор жалоб, изучение анамнеза

заболевания, данные объективного исследования
лабораторно-инструментальное обследование (анализы крови, мочи, кала, ЭКГ, УЗИ органов брюшной полости, гастро- и колоноскопия)
бактериологический анализ кала
секвенирование 16S рРНК в кале
водородный дыхательный тест с лактулозой
аноректальная манометрия высокого разрешения
психологические опросники

CРК-З
(n = 33)

CРК-Д
(n = 31)

Слайд 8

Методы диагностики кишечной микрофлоры бактериологический анализ кала секвенирование 16S рРНК водородный

Методы диагностики кишечной микрофлоры
бактериологический анализ кала
секвенирование 16S рРНК
водородный дыхательный тест

прямые методы

непрямой

метод
Слайд 9

Секвенирование 16S рРНК метод основан на идентификации маркерных генов микроорганизмов (16S

Секвенирование 16S рРНК

метод основан на идентификации
маркерных генов микроорганизмов (16S рРНК)

Чувствительность

– 95-100%
Специфичность – 90-100%

Moyaert H. et al, 2008; Dorai-Raj S et al., 2009;Al-Talib et al., 2009

Слайд 10

Качественный и количественный состав кишечной микрофлоры в образцах кала у пациентов

Качественный и количественный состав кишечной микрофлоры в образцах кала у пациентов

с СРК
и здоровых добровольцев по данным секвенирования 16S рРНК

Здоровые добровольцы (n = 9)

Больные СРК (n = 8)

%

%

Слайд 11

Бактериологический анализ кала метод основан на применении питательных сред для выращивания микробных популяций (живых культур)

Бактериологический анализ кала

метод основан на применении питательных сред для выращивания микробных

популяций (живых культур)
Слайд 12

Степени выраженности микробиологических нарушений состава кишечной микрофлоры снижение содержания бифидобактерий до

Степени выраженности микробиологических нарушений состава кишечной микрофлоры

снижение содержания бифидобактерий до 108–107

КОЕ/г, лактобактерий до 106–105 КОЕ/г, типичных эшерихий до 106-105 КОЕ/г, возможно повышение содержания типичных эшерихий до 109–1010 КОЕ/г;
снижение содержания бифидобактерий до ≤ 107 КОЕ/г, лактобактерий до ≤ 105 КОЕ/г, повышение содержания гемолитических эшерихий или других условно патогенных бактерий до 105-107 КОЕ/г или обнаружение ассоциаций условно патогенных микроорганизмов до 104-105 КОЕ/г;
снижение содержания бифидобактерий до ≤ 107 КОЕ/г, лактобактерий до ≤ 105 КОЕ/г, обнаружение ассоциаций условно патогенных микроорганизмов ≥ 106-107 КОЕ/г

Отраслевой стандарт «Протокол ведения больных.
Дисбактериоз кишечника». Москва, 2003г.

Слайд 13

Микробиологические критерии (типы) нарушения состава кишечной микрофлоры 1) нарастание количества условно-патогенных

Микробиологические критерии (типы) нарушения состава
кишечной микрофлоры

1) нарастание количества условно-патогенных микроорганизмов

одного или нескольких видов при нормальном количестве бифидобактерий
2) повышение содержания одного или нескольких видов условно-патогенных микроорганизмов при снижении концентрации бифидобактерий на 1-2 порядка
3) снижение содержания бифидо- и/или лактобактерий без увеличения количества сапрофитной или условно-патогенной микрофлоры
4) умеренное или значительное (<107) снижение содержания бифидобактерий, лактобактерий, появлением измененных форм кишечной палочки, обнаружением одного или нескольких представителей условно-патогенных микроорганизмов в высоких титрах (до 107–108 КОЕ/г)

Отраслевой стандарт «Протокол ведения больных.
Дисбактериоз кишечника». Москва, 2003г.

Слайд 14

Сравнение различных типов нарушения состава кишечной микрофлоры у больных СРК и

Сравнение различных типов нарушения состава кишечной микрофлоры у больных СРК и

в группе контроля

Отраслевой стандарт «Протокол ведения больных.
Дисбактериоз кишечника». Москва, 2003г.

%

Слайд 15

Сравнение степеней нарушения состава кишечной микрофлоры у больных СРК и в

Сравнение степеней нарушения состава кишечной микрофлоры у больных СРК и в

группе контроля

Отраслевой стандарт «Протокол ведения больных.
Дисбактериоз кишечника». Москва, 2003г.

%

Слайд 16

Чувствительность и специфичность бактериологического анализа кала Чувствительность – 98 % Специфичность – 27 %

Чувствительность и специфичность бактериологического анализа кала

Чувствительность – 98 %
Специфичность

– 27 %
Слайд 17

Водородный дыхательный тест с лактулозой Тонкая кишка Толстая кишка время, мин

Водородный дыхательный тест с лактулозой

Тонкая кишка

Толстая кишка

время, мин

Н2

Н2

Н2

12

Метод основан на определении

продуктов метаболизма кишечных бактерий (водорода) в выдыхаемом воздухе после приема углеводного субстрата (лактулозы)
Слайд 18

Сравнительная частота выявления СИБР у больных СРК и лиц контрольной группы *

Сравнительная частота выявления СИБР
у больных СРК и лиц контрольной группы

*

Слайд 19

Корреляции наличия СИБР клинические симптомы чувствительность и моторика прямой кишки (аноректальная

Корреляции наличия СИБР
клинические симптомы
чувствительность и моторика прямой кишки (аноректальная манометрия

высокого разрешения)
психоэмоциональный статус (психологические опросники)
Слайд 20

Корреляции наличия СИБР с клиническими симптомами заболевания у больных CРК-Д и CРК-З

Корреляции наличия СИБР с клиническими симптомами заболевания у больных CРК-Д и

CРК-З
Слайд 21

Аноректальная манометрия высокого разрешения Исследование аноректальной зоны методом манометрии с применением

Аноректальная манометрия
высокого разрешения

Исследование аноректальной зоны методом манометрии с применением

20-канального водно-перфузионного катетера с баллоном
Цель исследования: получение информации о тонусе анальных сфинктеров и определение чувствительности прямой кишки
Слайд 22

Корреляции наличия СИБР с показателями аноректальной манометрии у больных CРК-Д и CРК-З * - статистическая достоверность

Корреляции наличия СИБР с показателями аноректальной манометрии у больных CРК-Д и

CРК-З

* - статистическая достоверность

Слайд 23

Корреляции наличия СИБР с психоэмоциональным статусом больных CРК-Д и CРК-З * - статистическая достоверность

Корреляции наличия СИБР с психоэмоциональным статусом больных CРК-Д и CРК-З

*

- статистическая достоверность
Слайд 24

Проводимая терапия в группах больных СРК-Д и СРК-З Флорасан Д (n

Проводимая терапия в группах больных СРК-Д и СРК-З

Флорасан Д (n =

15)
Bifidobacterium bifidum, Bifidobacterium longum, Bifidobacterium infantis, Lactobacillus rhamnosus

CРК-З
(n = 50)

CРК-Д
(n = 47)

Энтерол (n = 16)
Saccharomyces boulardii

Плацебо (n = 16)

Флорасан Д (n = 16)
Bifidobacterium bifidum, Bifidobacterium longum, Bifidobacterium infantis, Lactobacillus rhamnosus

Резолор (n = 17)
Прукалоприд

Плацебо (n = 17)

Слайд 25

Сравнительная характеристика подгрупп пациентов СРК-Д до начала терапии * - статистическая достоверность (р

Сравнительная характеристика подгрупп пациентов СРК-Д до начала терапии

* - статистическая

достоверность (р<0,025)
Слайд 26

Корреляции основных клинических симптомов (4 неделя терапии) с возрастом пациентов и

Корреляции основных клинических симптомов (4 неделя терапии)
с возрастом пациентов и

их возрастом к моменту начала заболевания
в группе больных с CРК-Д
Слайд 27

Динамика выраженности клинических симптомов у больных СРК-Д, получавших Флорасан-Д и Энтерол

Динамика выраженности клинических симптомов
у больных СРК-Д, получавших Флорасан-Д и Энтерол

*

*

*

*

*

*

*

*

*

*

δ

Слайд 28

Динамика уровня качества жизни (SF-36) у здоровых и больных с СРК-Д

Динамика уровня качества жизни (SF-36) у здоровых и больных с СРК-Д

до и после терапии препаратами Флорасан-Д и Энтерол

* - Флорасан-Д, ** - Энтерол

Слайд 29

Динамика выраженности клинических симптомов у больных СРК-Д, получавших Флорасан-Д и плацебо

Динамика выраженности клинических симптомов
у больных СРК-Д, получавших Флорасан-Д и плацебо

δ

δ

*

*

*

*

*

*

*

*

*

*

Слайд 30

Динамика уровня качества жизни у здоровых и больных с СРК-Д до

Динамика уровня качества жизни у здоровых и больных с СРК-Д до

и после терапии препаратами Флорасан-Д и плацебо

* - Флорасан-Д, ** - плацебо

Слайд 31

Сравнительная характеристика подгрупп пациентов СРК-З до начала терапии * - статистическая достоверность (р

Сравнительная характеристика подгрупп пациентов СРК-З
до начала терапии

* - статистическая

достоверность (р<0,025)
Слайд 32

Корреляции основных клинических симптомов (4 неделя терапии) с их исходными значениями в группе больных с CРК-З

Корреляции основных клинических симптомов (4 неделя терапии)
с их исходными значениями

в группе больных с CРК-З
Слайд 33

Динамика выраженности клинических симптомов у больных СРК-З, получавших Флорасан-Д и Резолор

Динамика выраженности клинических симптомов
у больных СРК-З, получавших Флорасан-Д и Резолор

*

*

*

*

*

*

*

*

*

*

*

*

Слайд 34

Динамика уровня качества жизни у здоровых и больных с СРК-З до

Динамика уровня качества жизни у здоровых и больных с СРК-З до

и после терапии препаратами Флорасан-Д и Резолор

* - Флорасан-Д, ** - Резолор

Слайд 35

Динамика выраженности клинических симптомов у больных СРК-З, получавших Флорасан-Д и плацебо

Динамика выраженности клинических симптомов
у больных СРК-З, получавших Флорасан-Д и плацебо

δ

δ

*

*

*

*

*

*

*

*

*

*

Слайд 36

Динамика уровня качества жизни у здоровых и больных с СРК-З до

Динамика уровня качества жизни у здоровых и больных с СРК-З до

и после терапии препаратами Флорасан-Д и плацебо

* - Флорасан-Д, ** - плацебо

Слайд 37

Динамика результатов дыхательного теста в группах больных СРК-Д и СРК-З * - статистическая достоверность

Динамика результатов дыхательного теста
в группах больных СРК-Д и СРК-З

*

- статистическая достоверность
Слайд 38

Динамика результатов дыхательного теста в группах больных СРК-Д и СРК-З на

Динамика результатов дыхательного теста
в группах больных СРК-Д и СРК-З
на

фоне приема препарата Флорасан-Д и плацебо

* - статистическая достоверность

Слайд 39

Выводы Результаты молекулярно-генетического исследования кишечной микрофлоры (секвенирование 16S рРНК) свидетельствуют о

Выводы

Результаты молекулярно-генетического исследования кишечной микрофлоры (секвенирование 16S рРНК) свидетельствуют о достоверных

различиях (р<0,05) в составе кишечного микробиома у здоровых лиц и больных СРК. У здоровых лиц преобладают бактерии рода Blautia (17,1%), Prevotella (8,3%), Faecalibacterium (6,9%), у больных СРК – микроорганизмы рода Bacteroides (18,9%) и Coprococcus (7,3%).
Прямые методы исследования состава кишечной микрофлоры (бактериологический анализ кала, секвенирование 16S рРНК) не применимы в клинической практике в связи с трудоемкостью выполнения, длительностью проведения и сложностью в интерпретации результатов молекулярно-генетического исследования; низкой информативностью бактериологического анализа кала (специфичность 27%).
Синдром избыточного бактериального роста (СИБР), диагностируемый при помощи водородного дыхательного теста, выявляется у 62,5% больных с СРК-Д, 37,5% пациентов с СРК-З и не встречается у здоровых добровольцев. Различия между больными СРК и лицами контрольной группы достоверны (р<0,05).
Слайд 40

Выводы (продолжение) У больных СРК отмечается взаимосвязь наличия СИБР с основными

Выводы (продолжение)
У больных СРК отмечается взаимосвязь наличия СИБР с основными патогенетическими

механизмами формирования заболевания (моторика и чувствительность толстой кишки, эмоциональные нарушения).
По данным аноректальной манометрии высокого разрешения у больных с СРК-Д обнаружены прямые корреляции наличия СИБР с показателями, характеризующими состояние анального сфинктера (АС): длительностью сжатия АС (р=0,047), средним давлением сжатия АС (р=0,012) и средним максимальным давлением сжатия АС (р=0,011), а также обратные корреляции с показателями ректальной чувствительности: порогом сильного позыва на дефекацию (р=0,022) и максимально переносимым объемом нагнетаемого в баллон воздуха (р=0,025). У больных СРК-З отмечается прямая корреляция между наличием СИБР и средним максимальным давлением сжатия АС (р=0,046).