Современные методы лабораторной диагностики сифилиса

Июль 21, 2022

Главная
Медицина
Современные методы лабораторной диагностики сифилиса

Содержание

2. Современная ситуация: Снижение заболеваемости в РФ – за 2016 году показатель заболеваемости сифилисом составил 20,4 случаев
3. По данным Государственного доклада «О состоянии санитарно-эпидемиологического благополучия населения в Российской Федерации в 2013 году»
4. ПРЕДПОЛАГАЕМАЯ СТРУКТУРА ВНЕШНЕЙ И ВНУТРЕННЕЙ ЦИТОПЛАЗМАТИЧЕСКОЙ МЕМБРАНЫ TREPONEMA PALLIDUM (Cox et al., 1996) Основные иммунодоминантные белки
5. Динамика образования антител к антигенам Treponema pallidum контроль после лечения Это – причина расхождения результатов в
6. Эпоха диагностики сифилиса длится более 100 лет!!! Время идет – вопросы остаются: Какие тесты присутствуют в
7. Аналитические характеристики Удобство «Торговые» характеристики (срок годности набора и отдельных реагентов, наличие регистрации, тестируемые образцы, варианты
8. Совпадение результатов с другими тестами На кого быть похожим? Более высокая чувствительность или меньшая специфичность? А,
9. Как можно определить чувствительность и специфичность? С помощью стандартной панели Охарактеризованной Сероконверсионной С помощью референс-теста С
10. Нормативные документы, регламентирующие диагностику сифилиса в РФ
11. Основной: Приказ №87 от 26 марта 2001 года: «О совершенствовании серологической диагностики сифилиса» Последовательность обследования пациентов
12. Приказ №87 Приказ МЗ России №87 от 26.03. 01 Отборочные тесты: МП(RPR, TRUST,VDRL), РСКкард Подтверждающие тесты:
13. ООО «НПО «Диагностические системы» ИФА-АНТИ-ЛЮИС-G,M ИФА-АНТИ-ЛЮИС-G ИФА-АНТИ-ЛЮИС-M ДС-ИФА-АНТИ-ЛЮИС-СУММАРНЫЕ АНТИТЕЛА ЛЮИС-ТЕСТ ДС-РПГА-АНТИ-ЛЮИС
14. ИФА-ТЕСТЫ: ИФА-АНТИ-ЛЮИС-G,M ИФА-АНТИ-ЛЮИС-G ИФА-АНТИ-ЛЮИС-M ДС-ИФА-АНТИ-ЛЮИС-СУММАРНЫЕ АНТИТЕЛА
15. Чувствительность тест-системы «ИФА-АНТИ-ЛЮИС-GM» по панели BBI “Syphilis Mixed Titer Performance Panel PSS202” (КП)
16. Чувствительность тест-системы «ДС-ИФА-АНТИ-ЛЮИС-СУММАРНЫЕ АНТИТЕЛА» по панели ZeptoMetrix “Mixed Titer Syphilis Panel” (КП), lot 0709-272-00053
17. РПГА
18. «ДС-РПГА-анти-Люис» Состав набора: сенсибилизированные эритроциты (СЭ) - формалинизированные куриные эритроциты сенсибилизированные рекомбинантными аналогами трансмембранных белков T.
19. Схема постановки тест-системы «ДС-РПГА-АНТИ-ЛЮИС» Учет результатов 10 мкл образца сыворотки 75 мкл Контрольных эритроцитов 25 мкл
20. Чувствительность тест-системы «ДС-РПГА-анти-ЛЮИС» по панели BBI “Syphilis Mixed Titer Performance Panel PSS202”
21. ЛЮИС-ТЕСТ
22. Люис - тест отрицательный отрицательный слабоположительный положительный
23. Действующее начало смесь 3-х высокоочищенных компонентов: кардиолипин + лецитин + холестерол быстрота - учет реакции проводится
24. Сравнение чувствительности и специфичности Люис – теста и РМП
25. Сравнение динамики титров антител при лечении, определяемых тестом «ДС-РПГА-анти-Люис» (TmpA) и РМП Исследовано 53 пары сывороток:
26. Диагностика нейросифилиса
27. Г.А.Дмитриев, Книга «Нейросифилис: проблемы и решения», 2016
28. «ИФА-анти-ЛЮИС-G» и «ИФА-анти-ЛЮИС-GM» Разведение ликвора 1:2 (50 мкл БР + 50 мкл образца). Конъюгат разводится по
29. Титры специфических антител к четырем рекомбинантным антигенам в образцах ликвора и сывороток крови в РПГА
30. Соотношение титров антител в образцах ликвора к титрам антител в образцах сывороток крови в РПГА
31. CE и ISO Сертификаты Система управления качеством ISO 13485
32. Благодарю за внимание!
34. Скачать презентацию

Слайд 2

Современная ситуация:
Снижение заболеваемости в РФ – за 2016 году показатель заболеваемости

сифилисом составил 20,4 случаев на 100 тыс. населения (данные «Федерального центра гигиены и эпидемиологии» Роспотребнадзора)

Слайд 3

По данным Государственного доклада «О состоянии санитарно-эпидемиологического благополучия населения в Российской

Федерации в 2013 году»

Слайд 4

ПРЕДПОЛАГАЕМАЯ СТРУКТУРА ВНЕШНЕЙ И ВНУТРЕННЕЙ ЦИТОПЛАЗМАТИЧЕСКОЙ МЕМБРАНЫ TREPONEMA PALLIDUM (Cox et

al., 1996)

Основные иммунодоминантные белки T. pallidum:
Тр 15, Тр 17, TmpA, Тр 47

Слайд 5

Динамика образования антител к антигенам Treponema pallidum
контроль после лечения
Это – причина

расхождения результатов в 90% случаев!

Слайд 6

Эпоха диагностики сифилиса длится более 100 лет!!!
Время идет – вопросы остаются:
Какие

тесты присутствуют в настоящее время на Российском рынке?
Чем они отличаются?
Какой тест нужно Вам?
Каких результатов Вы ждете от лабораторного теста?

Слайд 7

Аналитические характеристики
Удобство
«Торговые» характеристики (срок годности набора и отдельных реагентов, наличие регистрации,

тестируемые образцы, варианты комплектации)
Совпадение результатов с клиническим статусом
Совпадение результатов с другими тест-системами: количественное и качественное.

Какой тест нужно ВАМ?

Слайд 8

Совпадение результатов с другими тестами
На кого быть похожим?
Более высокая чувствительность или

меньшая специфичность?
А, вообще, нужна ли высокая чувствительность?
Что важнее – аналитические характеристики или удобство?

Слайд 9

Как можно определить чувствительность и специфичность?
С помощью стандартной панели
Охарактеризованной
Сероконверсионной
С помощью

референс-теста
С помощью сопоставления результатов теста с данными клинических исследований

Слайд 10

Нормативные документы, регламентирующие диагностику сифилиса в РФ

Слайд 11

Основной:
Приказ №87 от 26 марта 2001 года: «О совершенствовании серологической диагностики

сифилиса»
Последовательность обследования пациентов на сифилис представляется следующим образом:
при первичном обследовании производится постановка отборочной (скрининговой) реакции микропреципитации (РМП) или ее модификации (RPR- РПР) в количественном и качественном вариантах и в случае положительного результата - любого специфического подтверждающего трепонемного теста (РПГА, ИФА, КСР, РИФ, РИТ);
после окончания терапии ставится РМП или ее модификация и по снижению титра судят о динамике инфекционного процесса и эффективности терапии. Подтверждением эффективности проведенной терапии считается снижение титра в 4 и более раз в течение 1 года;
по окончании этого срока осуществляется постановка той же специфической реакции, что и при первичном обследовании. Следует учитывать, что специфические трепонемные тесты могут оставаться положительными (не негативировать) в течение ряда лет, а в отдельных случаях остаются положительными на всю жизнь.

Слайд 12

Приказ №87
Приказ МЗ России №87 от 26.03. 01
Отборочные тесты: МП(RPR, TRUST,VDRL),

РСКкард
Подтверждающие тесты: РПГА, ИФА, РСКтреп, РИФ, РИТ
Контроль эффективности лечения:
МП(RPR, TRUST, VDRL) или РСКкард

2006 год
Отборочные тесты: МП ( RPR, TRUST, VDRL),
ИФА или РПГА
Подтверждающие тесты: ИФА или РПГА
Контроль эффективности лечения: МП (RPR, TRUST, VDRL)

Поскольку ИФА и РПГА являются более высокочувствительными, специфическими и воспроизводимыми тест - системами, которые можно использовать в качестве отборочных и подтверждающих тестов, осуществить до 2006 г. замену комплекса серореакций (КСР) вышеуказанными реакциями при диагностике сифилиса

Слайд 13

ООО «НПО «Диагностические системы»
ИФА-АНТИ-ЛЮИС-G,M
ИФА-АНТИ-ЛЮИС-G
ИФА-АНТИ-ЛЮИС-M
ДС-ИФА-АНТИ-ЛЮИС-СУММАРНЫЕ АНТИТЕЛА
ЛЮИС-ТЕСТ
ДС-РПГА-АНТИ-ЛЮИС

Слайд 14

ИФА-ТЕСТЫ:
ИФА-АНТИ-ЛЮИС-G,M
ИФА-АНТИ-ЛЮИС-G
ИФА-АНТИ-ЛЮИС-M
ДС-ИФА-АНТИ-ЛЮИС-СУММАРНЫЕ АНТИТЕЛА

Слайд 15

Чувствительность тест-системы «ИФА-АНТИ-ЛЮИС-GM» по панели BBI “Syphilis Mixed Titer Performance Panel

PSS202” (КП)

Слайд 16

Чувствительность тест-системы «ДС-ИФА-АНТИ-ЛЮИС-СУММАРНЫЕ АНТИТЕЛА» по панели ZeptoMetrix “Mixed Titer Syphilis Panel”

(КП), lot 0709-272-00053

Слайд 17

РПГА

Слайд 18

«ДС-РПГА-анти-Люис»
Состав набора:
сенсибилизированные эритроциты (СЭ) - формалинизированные куриные эритроциты сенсибилизированные рекомбинантными аналогами

трансмембранных белков T. рallidum
контрольные эритроциты (КЭ)
положительный и отрицательный контроли (К+ и К-)
раствор для разведения сывороток крови и ликвора (содержит краситель-индикатор)
круглодонные иммунологические планшеты
планшеты для предварительного разведения образцов
Характеристика:
рабочее разведение сывороток-1:80
качественный и полуколичественный анализ
все реагенты в жидком виде
продолжительность анализа-45-60 минут
срок годности-18 месяцев

Слайд 19

Схема постановки тест-системы
«ДС-РПГА-АНТИ-ЛЮИС»
Учет результатов
10 мкл
образца
сыворотки
75 мкл
Контрольных
эритроцитов
25 мкл
25 мкл
25

мкл

25 мкл

25 мкл
25 мкл

75 мкл
Сенсибилиз.
эритроцитов

Инкубация
неподвижно
при 18-24°С
45 мин.

25 мкл

190 мкл

Слайд 20

Чувствительность тест-системы «ДС-РПГА-анти-ЛЮИС» по панели BBI “Syphilis Mixed Titer Performance Panel

PSS202”

Слайд 21

ЛЮИС-ТЕСТ

Слайд 22

Люис - тест
отрицательный
отрицательный слабоположительный положительный

Слайд 23

Действующее начало
смесь 3-х высокоочищенных компонентов: кардиолипин + лецитин + холестерол
быстрота

- учет реакции проводится через 8 мин, исключена
стадия предварительной подготовки антигена

возможность полуколичественного учета (определение титра АТ)
возможность использования прогретых и непрогретых сывороток
легкость визуальной оценки результатов реакции

Характеристика ЛЮИС-ТЕСТА

два варианта комплектации – окрашенный кардиолипиновый
реагент для работы с бумажными
тест-картами (возможность
протоколирования результатов)
– неокрашенный кардиолипиновый
реагент для работы с пластинами
из плексигласа (аналогично РМП)

срок годности –18 месяцев

Слайд 24

Сравнение чувствительности и специфичности Люис – теста и РМП

Слайд 25

Сравнение динамики титров антител при лечении, определяемых тестом «ДС-РПГА-анти-Люис» (TmpA) и

РМП

Исследовано 53 пары сывороток:
23 - сифилис вторичный
13 - сифилис скрытый
8 - сифилис поздний
4 - сифилис серорезистентный
5 – сифилис леченый

Слайд 26

Диагностика нейросифилиса

Слайд 27

Г.А.Дмитриев, Книга «Нейросифилис: проблемы и решения», 2016

Слайд 28

«ИФА-анти-ЛЮИС-G» и «ИФА-анти-ЛЮИС-GM»
Разведение ликвора 1:2 (50 мкл БР +

50 мкл образца).
Конъюгат разводится по инструкции (как для образцов сывороток крови).
«ДС-ИФА-анти-ЛЮИС-СУММАРНЫЕ АНТИТЕЛА»
Разведение ликвора как и сыворотки крови 1:10 (10 мкл образца + 90 мкл конъюгата)
«ДС-РПГА-анти-ЛЮИС»
Разведение ликвора 1:5, при добавлении эритроцитов конечное разведение 1:20 (раствор для разведения образцов не меняет окраски).

Слайд 29

Титры специфических антител к четырем рекомбинантным антигенам в образцах ликвора и

сывороток крови в РПГА

Слайд 30

Соотношение титров антител в образцах ликвора к титрам антител в образцах

сывороток крови в РПГА

Слайд 31

CE и ISO Сертификаты
Система управления качеством ISO 13485

Слайд 32

Современные методы лабораторной диагностики сифилиса

Содержание

Современная ситуация:Снижение заболеваемости в РФ – за 2016 году показатель заболеваемости

По данным Государственного доклада «О состоянии санитарно-эпидемиологического благополучия населения в Российской

ПРЕДПОЛАГАЕМАЯ СТРУКТУРА ВНЕШНЕЙ И ВНУТРЕННЕЙ ЦИТОПЛАЗМАТИЧЕСКОЙ МЕМБРАНЫ TREPONEMA PALLIDUM (Cox et

Динамика образования антител к антигенам Treponema pallidumконтроль после леченияЭто – причина

Эпоха диагностики сифилиса длится более 100 лет!!!Время идет – вопросы остаются:Какие

Аналитические характеристикиУдобство«Торговые» характеристики (срок годности набора и отдельных реагентов, наличие регистрации,

Совпадение результатов с другими тестамиНа кого быть похожим?Более высокая чувствительность или

Как можно определить чувствительность и специфичность?С помощью стандартной панелиОхарактеризованнойСероконверсионной С помощью