Объективизация диагностики злоупотребления алкоголем при использовании современных биологических маркеров

зависимости
Мониторинг терапии больных алкоголизмом
Диагностика рецидивов
Объективизация снятия с наркологического диспансерного учета
Уточнение/ подтверждение этиологии внутренних болезней
Профессиональная диспансеризация
Возврат водительского удостоверения, изъятого по причине вождения в состоянии алкогольного опьянения
Страхование

Задачи:

Диагностика злоупотребления алкоголем

более 45 г алкоголя в день*
Женщин, употребляющих более 35 г алкоголя в день*
* в пересчете на абсолютный спирт
1 бокал пива = 12-15 г
1 бокал вина = 12-15 г
1 рюмка крепкого спиртного напитка = 15 г
В бытовом понимании указанные количества не являются высокими, однако с медицинской точки зрения являются достаточными для развития зависимости и инициации процесса разнообразных органных повреждений

картины и ее изменений в условиях воздержания от алкоголя
Основная проблема:
Пациенты склонны отрицать и/или преуменьшать количество употребляемого алкоголя и свою зависимость
Высокий субъективизм при подтверждении эпизодов хронического злоупотребления и оценке стабильности ремиссии

неалкогольных поражениях органов и зависеть от физиологического состояния обследуемого
- - Возможность «отсроченной» диагностики злоупотребления и оценки стабильности ремиссии

Требования к лабораторным маркерам алкоголизма

содержания алкоголя или его метаболитов (ацетальдегид, молочная, яблочная, β-оксимасляной кислоты и др.) в биологических пробах.
«Одномоментный снимок», позволяющий зафиксировать прием алкоголя в данный конкретный короткий промежуток времени.
Невозможность получить информацию о систематическом, хроническом злоупотреблении.
Невозможность контролировать ремиссию.

Прямые маркеры употребления алкоголем

(ГГТ);
Соотношение АсАТ/АлАТ
А также:
MCV (средний объем эритроцита)
Липопротеины высокой плотности (ЛВП) и др.

Основной недостаток – низкая специфичность (35-40%), т.к. данные маркеры отражают наличие органического повреждения гепатоцитов или повышенный синтез микросомальных ферментов как алкогольной, так и неалкогольной этиологии.
Алкоголь – только 1 из множества факторов, вызывающих повышение данных маркеров…
(панкреатит, холестаз, холецистит, инфекционные гепатиты, злокачественные новообразования, анемии, гипотериоз, прием ряда лекарств и др. …)

Для повышения специфичности указанных маркеров применяют алгоритм EDAC (Early Detection of Alcohol Consumption):
Панель из 12-35 биохимических и гематологических тестов + последующий статистический анализ.
Чувствительность и специфичность – выше, чем при определении индивидуальных показателей.
Однако данный алгоритм является дорогостоящим, трудоемким и требует квалифицированной статистической обработки данных

алкоголем –
карбогидрат-дефицитный трансферрин (CDT) ,
обладающий более высокими аналитическими характеристиками, позволяющими отнести его к «идеальному маркеру» хронической алкогольной нагрузки.

CDT – новый маркер хронического злоупотребления алкоголем

сыворотке – 2-3 г/л
Основной переносчик ионов железа
Поддерживает железо в растворимой форме
Нейтрализует токсический эффект железа
Переносит ионы железа в ткани (костный мозг, селезенка, печень)

CDT – новый маркер хронического злоупотребления алкоголем

связывания ионов железа,
2-х разветвленных углеводных цепей, на концах которых находятся остатки сиаловой кислоты.

Трансферрин. Структура.

N

C

отличающихся друг от друга количеством сиалогрупп, присоединенных к углеводным цепям.
В результате в сыворотке обнаруживают «смесь» изоформ, состоящую из высокосиалированных и низкосиалированных молекул.

Высокосиалированный трансферрин

Гексасиалотрансферрин

Пентасиалотрансферрин

~ 1%

~ 14%

~ 80%

~ 0%

Σ ~ 99%

Низкосиалированный (карбогидрат-дефицитный) трансферрин (CDT)

Σ < 1,3%

~ 1%

< 1%

Соотношение изоформ трансферрина в крови здорового человека

~ 4%

в крови здорового человека

В организме человека, злоупотребляющего алкоголем, соотношение изоформ трансферрина изменяется в сторону повышения низкосиалированных изоформ

Σ > 1,3%

Соотношение изоформ трансферрина в крови человека,
злоупотребляющего алкоголем

Таким образом, количественная оценка CDT позволяет выявить хроническую алкогольную нагрузку

цепей в аппарате Гольджи, ингибируя активность ряда ферментов, отвечающих за процесс сиалирования молекул трансферрина, что приводит к повышенному содержанию низкосиалированных изоформ - CDT.

Механизм образования CDT

комплекс ферментов, отвечающий за сиалирование

сиаловая
кислота

Таким образом, CDT выгодно отличается от таких маркеров, как АЛТ, АСТ и ГГТ, т.к. в отличие от последних повышение его концентрации в наименьшей степени ассоциировано с органическим поражением печени или других органов (как алкогольного, так и неалкогольного генеза) или повышенным синтезом микросомальных ферментов.
В отличие от других гликопротеинов, недостаток сиалирования изоформ трансферрина никак не связан с клиренсом печени или почек.

Этанол / ацетальдегид

при ежедневном употреблении 60 – 80 г и выше алкоголя в течение 1 – 2 недель

Согласно классификации международной рабочей группы IFCC к карбогидрат-дефицитному трансферрину (CDT) относят асиало, моносиало- и дисиало- изоформы трансферрина.

CDT является первым маркером, признанным FDA в качестве теста на злоупотребление алкоголем (АсАТ, АлАТ, ГГТ – тесты на функциональную целостность печени).

Дисиалотрансферрин Моносиалотрансферрин Асиалотрансферрин

~ 0%

~ 1%

< 1%

в пределах нормы. Исключение составляют пациенты с тяжелым декомпенсированным циррозом, хроническим гепатитом с высокой активностью и редким наследственным заболеванием – CDG-синдромом.
В целом, методы, основанные на определении CDT, демонстрируют очень высокую специфичность – 90-95%.
Благодаря достаточно короткому периоду полураспада (в среднем 4 недели) CDT также пригоден для контроля абстиненции в ходе терапии алкогольной зависимости.
В клинике внутренних болезней снижение уровня CDT во время пребывания в стационаре (контролируемая абстиненция) является одним из наиболее специфичных маркеров алкогольной этиологии заболевания (гепатобилиарной системы, ЖКТ, ССС и др.)

характеристики.

демонстрирую методы:
- ВЭЖХ
КАПИЛЛЯРНЫЙ ЭЛЕКТРОФОРЕЗ

Высокая трудоемкость и стоимость анализа – Не пригоден для массовых скрининговых исследований

Полная автоматизация и доступная цена
Применяется для массовых скрининговых исследований

проб до выдачи результатов,
Возможность анализа «кривой» и выявления интерференций, обусловленных:
Нарушением преаналитического этапа,
Возможными генетическими вариантами трансферрина,
Сопутствующими заболеваниями (гаммапатии и пр.)

Европы и США
Профессиональная диспансеризация (транспортные компании, ТОР-менеджеры, атомные станции и др. «опасные» профессии), в т.ч. крупнейшая ж/д компания Франции (SNCF), «Swedish transport Agency”, “Emirates Airlines”, “London transport Agency” и др.
Выявление и мониторинг терапии больных алкоголизмом, диагностика рецидивов (Скандинавия);
Подготовка к хирургическому вмешательству, принятие решения о трансплантации органов (Великобритания, Франция);
Возврат водительского удостоверения, изъятого по причине вождения в состоянии алкогольного опьянения, принятие решения о пожизненном лишении прав (Скандинавия, Великобритания, США);
Страхование (США)

характеристик теста CDT в исполнении метода капиллярного электрофореза Sebia
Подтверждены высокие специфичность и чувствительность метода капиллярного электрофореза,
Подтверждено отсутствие расхождений референсных значений нормы/патологии применительно к Российской популяции.

злоупотребления алкоголем
Москва 2011