Холера. Патогенез холеры

Содержание

Слайд 2

Семейство Vibrionaceae Род Vibrio Вид Vibrio cholerae Источник инфекции: человек —

Семейство Vibrionaceae
Род Vibrio
Вид Vibrio cholerae
Источник инфекции: человек —

больной холерой и здоровый (транзиторный) вибриононоситель.
Несмотря на то, что выделение возбудителя в окружающую среду происходит в течение короткого времени, большое количество скрытых форм поддерживает циркуляцию возбудителя.
Соотношение носители/больные может достигать от 4:1 до 10:1.
Основной механизм передачи – фекально-оральный, реже - контактный.
Факторы передачи – вода, пищевые продукты, объекты окружающей среды.
Заражение происходит главным образом при питье необеззараженной воды, заглатывании воды при купании в загрязнённых водоёмах и пр.
Слайд 3

Биохимические свойства. Сбраживают с образованием кислоты (без газа) глюкозу, сахарозу, мальтозу,

Биохимические свойства.
Сбраживают с образованием кислоты (без газа) глюкозу, сахарозу, мальтозу,

маннозу, маннит, лактозу (сравнительно медленно), левулёзу, гликоген и крахмал.
Диагностическое значение имеет ферментация маннозы, сахарозы и арабинозы (триада Хёйберга); холерные вибрионы разлагают только маннозу и сахарозу и принадлежат к 1 группе Хёйберга (по отношению к этим трём углеводам все вибрионы разделяют на 6 групп).
Разжижают желатину с образованием «воронки» с пузырьком воздуха вверху, гидролизуют казеин. Обладают плазмокоагулирующим действием (свёртывают плазму кролика) и фибринолитическим (разжижают свёрнутую сыворотку по Лёффлеру).
Свёртывают молоко и разлагают другие белки и их дериваты до аммиака и индола. H2S не образуют. Восстанавливают нитраты.
Слайд 4

Патогенез холеры Симптомы заболевания вызываются не самим холерным вибрионом, а продуцируемым

Патогенез холеры

Симптомы заболевания вызываются не самим холерным вибрионом, а продуцируемым им

холерным токсином.
Входные ворота инфекции - пищеварительный тракт. Вибрионы колонизируют поверхность эпителия тонкого отдела кишечника, не проникая, однако, внутрь его и выделяют экзотоксин (холероген) - термолабильный белок. Экзотоксин способствует выходу в просвет кишечника огромного количества изотонической жидкости с низким содержанием белка и высокой концентрацией ионов натрия, калия, хлоридов, гидрокарбонатов. Развивается диарея, рвота и обезвоживание. Потеря жидкости, гидрокарбонатов и калия ведёт к развитию метаболического ацидоза, гипокалиемии.
Кроме экзотоксина, холерный вибрион имеет эндотоксин - термостабильный ЛПС, сходный по структуре и активности с эндотоксинами прочих грамотрицательных бактерий. Эндотоксин проявляет иммуногенные свойства, индуцируя синтез вибриоцидных AT.
Слайд 5

Лабораторная диагностика. Цель исследований: выявление больных и бактерионосителей; установление оконча-тельного диагноза

Лабораторная диагностика.
Цель исследований: выявление больных и бактерионосителей; установление оконча-тельного диагноза

при исследовании погибших; контроль за эффективностью лечения больных и санации носителей; контроль над объектами внешней среды и эффективностью дезинфекционных мероприятий.
Материалы для исследований - испражнения, рвотные массы, жёлчь, секционный материал (фрагменты тонкой кишки и жёлчного пузыря), постельное и нательное бельё, вода, ил, сточные воды, гидробионты, смывы с объектов окружающей среды, пищевые продукты, мухи и др.
Слайд 6

Наилучшие результаты даёт исследование проб, взятых до начала антибактериальной терапии. Материал

Наилучшие результаты даёт исследование проб, взятых до начала антибактериальной терапии.
Материал

отбирают в стерильную посуду без следа дезсредств.
Испражнения в количестве 10-20 мл отбирают резиновыми катетерами, или используют ректальные тампоны.
При исследовании желчи отбирают порции В и С (доставляют нативный материал).
Все образцы помещают в герметически закрываемую транспортную тару. Материал следует доставлять в лабораторию не позже 2 ч после забора. При невозможности образцы помещают в транспортные среды (наиболее удобна 1 % пептонная вода с рН 8,2-8,6).
Слайд 7

Водопроводную воду (1 л) отбирают в стерильную посуду (по 500 мл)

Водопроводную воду (1 л) отбирают в стерильную посуду (по 500 мл)

после обжигания кранов и пред-варительного слива в течение 10 мин.
Сточные воды (1 л) также отбирают в 2 ёмкости.
Гидробионтов (рыб и лягушек, по 10-15 экземпляров) помещают в герметичные стеклянные банки.
Смывы с объектов отбирают с площади 25 см2 ватными тампонами, смоченными 1% пептонной водой (в которой их транспортируют в лабораторию).
Для посева используют жидкие среды обогащения, щелочной МПА, элективные и дифференциально-диагностические среды.
На всех этапах исследования посевы выращивают на пептонной воде 6-8 ч, пептонной воде с теллуритом калия 12-18 ч, на щелочном агаре не менее 14-16 ч, на элективных плотных средах 18-24 ч.
Для ускоренной диагностики болезни применяют РИФ и РНГА.
Слайд 8

Исследование больных, бактерионосителей и трупного материала проводят в четыре этапа. I

Исследование больных, бактерионосителей и трупного материала проводят в четыре этапа.
I этап.

Материал засевают на накопительную среду, на щелочной агар или одну из элективных сред (например, TCBS-arap).
II этап (через 6-8 ч после начала исследования). Изучают рост на первой среде накопления и производят высев на щелочной агар и вторую среду накопления. Если на первом этапе при исследовании нативного материала ускоренными методами получают положительные результаты, пересев на вторую среду накопления не производят. При отрицательных результатах ускоренные методы повторяют после 6-часовой инкубации в первой среде накопления.
Слайд 9

III этап (через 12-14 ч после начала исследования). Изучают рост на

III этап (через 12-14 ч после начала исследования). Изучают рост на

второй среде накопления; производят высев со второй среды накопления также на щелочной агар. С чашек отбирают для дальнейших исследований не менее 5 подозрительных колоний и высевают на лактозно-сахарную среду или среду Клиглера.
IV этап (через 18-24 ч после начала исследования). Проводят отбор подозрительных колоний в посевах на плотные среды нативного материала, а также в посевах со 2-й накопительной среды.
Слайд 10

Морфология Vibrio cholerae Прямые или изогнутые подвижные палочки, грамотрицательные Культуральные свойства.

Морфология Vibrio cholerae Прямые или изогнутые подвижные палочки, грамотрицательные
Культуральные свойства.
Факультативный анаэроб

с более выраженными аэробными свойствами; быстро погибает в анаэробных условиях. Не образует спор.
Хорошо растёт на простых питательных средах при высоком рН среды (7,6-8,0).
На жидких средах вызывает помутнение и образование нежной голубоватой плёнки на поверхности
Слайд 11

На твёрдых средах Vibrio cholerae образует небольшие круглые дисковидные прозрачные S-колонии

На твёрдых средах Vibrio cholerae образует небольшие круглые дисковидные прозрачные S-колонии

с ровными краями, голубоватые в проходящем свете.
Слайд 12

На агаре с тиосульфатом, цитратом, солями жёлчных кислот и сахарозой (TCBS-агар) Vibrio cholerae образует жёлтые колонии.

На агаре с тиосульфатом, цитратом, солями жёлчных кислот и сахарозой (TCBS-агар)

Vibrio cholerae образует жёлтые колонии.
Слайд 13

Подозрительные колонии исследуют в РА на стекле («слайд-агглютинация») с О1-антисы-вороткой, а

Подозрительные колонии исследуют в РА на стекле («слайд-агглютинация») с О1-антисы-вороткой, а

также с сыворотками Инаба и Ога-ва в разведении 1:50-100. Если серотипирова-ние вибрионов обычными антисыворотками даёт отрицательный результат, то их прове-ряют с холерными сыворотками R0 и 0139 в реакции слайд-агглютинации.
Из культур готовят мазки для окраски по Граму и проб с люминесцирующими сыворотками. Затем проводят биохимическую идентификацию выросших микроорганизмов.
Слайд 14

Антигенная структура. У холерных вибрионов выделяют термостабильные О- и термолабильные Н-Аг.

Антигенная структура. У холерных вибрионов выделяют термостабильные О- и термолабильные Н-Аг.
По

структуре О-Аг выделяют 139 серогрупп;
На основании биохимических и биологических различий холерные вибрионы разделяют на 2 биовара (биотипа): классический (V. cholerae asiaticae) и Эль-Тор (V. cholerae eltor).
Возбудители классической холеры и холеры Эль-Тор относятся к О1 серогруппе (при исследовании на холеру обязательно проводят типирование О1-анти-сывороткой).
О-Аг 01 группы холерных вибрионов неоднороден и включает А, В и С компоненты, разные сочетания которых присущи сероварам Огава (АВ), Инаба (АС) и Хикоджима (ABC)
Слайд 15

Классификация вибрионов

Классификация вибрионов

Слайд 16

В начале 1993 г. появились сообщения о вспышках холеры в юго-восточной

В начале 1993 г. появились сообщения о вспышках холеры в юго-восточной

Азии, вызванных вибрионами ранее неизвестной серогруппы, обозначенных как серовар 0139 (Бенгал).
Вибрионы серовара 0139 не агглютинируются видоспецифической О1 и типоспецифическими Огава-, Инаба- и RO-сыворотками, устойчивы к полимиксину и не проявляют гемолитическую активность.
Все Vibrio cholerae лизируются бактериофагом группы IV (по Мукерджи, 1963), а вибрионы биовара Эль-Тор - фагами группы V.
Слайд 17

Тест на резистентность V. Cholerae к бактериофагу IV и полимиксину В.

Тест на резистентность V. Cholerae к бактериофагу IV и полимиксину В.


Слайд 18

Препараты для специфической профилактики холеры Холероген-анатоксин - очищенный и концентрированный препарат,

Препараты для специфической профилактики холеры

Холероген-анатоксин - очищенный и концентрированный препарат, полученный

из центрифугата бульонной культуры холерного вибриона, обезвреженного формалином.
Предназначен для создания активного искусственного иммунитета против холеры. Вакцинация и ревакцинация проводятся по эпидемиологическим показаниям однократно за месяц перед эпидемическим сезоном.
Холерная вакцина относится к числу убитых корпускулярных вакцин и готовится на основе вирулентных штаммов холерного вибриона классического биотипа или биотипа Эль-Тор серотипов Инаба и Огава, инактивированных нагреванием или формалином.
Вакцина холерная бивалентная химическая таблетированная представляет собой смесь холерогена-анатоксина и О-антигенов, полученных из бульонных культур холерного вибриона сероваров Инаба и Огава. Вакцина обеспечивает антибактериальный, антитоксический и местный кишечный иммунитет длительностью до 6 месяцев. Ревакцинацию проводят через 6-7 мес после первичной вакцинации.
Холерный бактериофаг. С тех пор, как в 1926 г. Ф.Д.Эрелль получил хорошие результаты при лечении холеры бактериофагом, этот метод терапии приобрел широкое распространение. Однако в последующем результаты фаготерапии оказались менее обнадеживающими и недостаточно постоянными. Существующие разновидности бактериофага не подавляют развитие вибриона Эль-Тор в организме экспериментальных животных и человека. Согласно заключению Комитета экспертов ВОЗ, в настоящее время нет убедительных материалов, свидетельствующих об эффективности фаготерапии холеры.
Слайд 19

Семейство Vibrionaceae 1. изогнутые подвижные палочки 2. распространены повсеместно; широко представлены

Семейство Vibrionaceae

1. изогнутые подвижные палочки
2. распространены повсеместно; широко представлены в

морской, пресной воде и часто колонизируют организмы водных животных.
3. хемоорганотрофы; метаболизм окислительный и бродильный
4.температурный оптимум для большинства видов 37°С
5. оксидаза-положительны
6. ферментируют глюкозу и другие углеводы с образованием кислоты.
7. нуждаются во внесении в среду 2-3% раствора NaCl.
Слайд 20

Род Vibrio Род образуют прямые или изогнутые палочки; характерна подвижность (один

Род Vibrio

Род образуют прямые или изогнутые палочки; характерна подвижность (один или

несколько жгутиков).
Хемоорганотрофы; метаболизм окислительный и бродильный. Оксидаза-положительны
Температурный оптимум вариабелен; от 20 до 30°С.
Восстанавливают нитраты, D-глюкозу ферментируют до кислоты. Сбраживают мальтозу, маннозу и трегалозу.
Наибольшее медицинское значение имеют V. cholerae, V. parahaemolyticus и V. Vulnificus. Типовой вид рода – V. cholerae.
Слайд 21

Прочие патогенные виды Vibrio. Среди них доминируют поражения, вызванные V. parahaemolyticus

Прочие патогенные виды Vibrio.
Среди них доминируют поражения, вызванные V. parahaemolyticus

и V. vulnificus.
Vibrio parahaemolyticus - галофильный вибрион; возбудитель большинства случаев острых диарей в Японии; вызванные им поражения также регистрируют в странах Юго-Восточной Азии, Африки и Латинской Америки (до 20% диарей), в том числе у туристов. Основные факторы передачи - блюда из морских продуктов, длительно хранимые в тёплом месте и приготовленные с нарушениями технологического процесса. В более редких случаях наблюдают поражения, вызванные употреблением сырых моллюсков и рыбы, а также пищи, обрызганной морской водой. Возбудитель вырабатывает энтеротоксин, вызывающий энтерит.
Слайд 22

Диагностику проводят выделением возбудителя на средах, применяемых для выделения Vibrio cholerae

Диагностику проводят выделением возбудителя на средах, применяемых для выделения Vibrio cholerae

(чаще для исключения холеры) с определением роста на TCBS-arape (образует оливково-зелёные колонии, т.к. не ферментирует сахарозу) и способности утилизировать орнитин.
Vibrio vulnificus входит в состав микробных ценозов эстуариев рек умеренных и тёплых регионов Тихоокеанского и Атлантического побережий и концентрируется в «природных фильтрах» - двухстворчатых моллюсках (устрицах, мидиях, гребешках и т.д.). Воз-будитель обладает уникальной способностью вызывать 2 типа различных поражений - септицемии и гнойные раневые процессы.
Слайд 23

Септицемии развиваются после употребления моллюсков и проявляются буллёзными поражениями кожи. Поражения

Септицемии развиваются после употребления моллюсков и проявляются буллёзными поражениями кожи. Поражения

с большей частотой регистрируют у лиц с нарушениями иммунитета, заболеваниями печени, почек и сахарным диабетом. 50% случаев заканчивается летально.
Раневые инфекции обусловлены контактом ран с контаминированной морской водой; они могут быть умеренными либо прогрессировать до тяжёлых целлюлитов и миозитов, имитирующих газовую гангрену. Тяжесть поражений, вызываемых V. vulnificus, зависит от степени патогенности возбу-дителя и состояния организма. Факторы патогеннос-ти - капсула, защищающая бактерии от действия фагоцитов, и комплекс ферментов, включающий ци-тотоксин-гемолизин, эластазу, коллагеназу и фосфолипазы.