Қолданбалы иммунология. Молекулалық биологиялық әдістер:НҚ гибридизациялау,ПТР ,ДНҚ секвенирлеу

анықтамасы түсініледі:нуклеотидной реттілігі Адам геномын декодтау- гендерді картаға түсіру- реттеуші элементтерді анықтау- жаңа генетикалықмаркерлер- адам мен сүтқоректілердің эволюциясы- популяциялық зерттеулер-- ДНҚ диагностикасына арналған праймерлер дизайны

Күнделікті тәжірибедеғылыми және диагностикалықзертханалардың- сәйкестендіру патологиялықмутациялар- полиморфты анықтаунұсқалары- метилдеу карталарын құруген-супрессорлар- әр түрлі кезеңдерде тексеруқұру гендік-инженерлікконструкцияларын әзірлеу кезіндетест-жүйелер үшін бақылау

Жоғары эфиктивті секвенирлеу әдісінің пайда болуына көптеген әдістердің бірігуі әкеп соқты, солардың ішіне келесі әдістер жатады:
Елеулі орын алатын әдістің бірі бұл электрофорез әдісі, бұл әдістің дамуы не бәрі 1 нуклеотид ұзындығы болатын олигомерлерді бөлуге мүмкіндік берді.
Азотты негіздердің спецификалық химиялық модификация әдісі.
P 32 изотопы арқылы ДНҚ тізбегіндегі ақырғы (концевых) нуклеотидтердің радиоктивті таңбалау әдісі.
ДНҚ тізбектерін ДНҚ полимеразамен көшіру әдісі.

ұсынған химиялық әдіс немесе 1977 ж. Ф. Сэнгер ұсынған дидеокси әдісі. Кәзіргі уақыта басқа да жаңа әдістер ашылуда мысалға Шотган (Shotgun) секвенирлеу әдісі, бірақ Сэнгер ұсынған әдісі кен ауқымда қолданылады.

нуклеотидтер қолданылады. ddNTP-тердің кәдімгі dNTP-терден кішкентай айырмашылығы бар. Олардың қантының 3-ші көміртегісінде гидроксилді-ОН тобының орнына сутегі тобы болады. ddNTP ДНҚ тізбегіне енген кезде, фосфодиэфирлік байланысқа қажетті ОН тобы болмағандықтан, тізбек ұзара алмайды; нәтижесінде тізбек терминацияланады.

4 dNTP оның біреуі радиоактивті таңбаланған және бір ddNTP болады. Праймерден жаңа тізбек синтезі басталғаннан кейін ДНҚ полимераза тізбекке кездейсоқ қалыпты dNTP-тың орнына ddNTP-ты енгізеді де, тізбек ұзаруын тоқтатады. Уақыт өткен сайын ddNTP-тер барлық тізбектерге енеді де, ұзындығы әртүрлі фрагменттер түзеді. Сэнгердің дәстүрлі тәсілінде ДНҚ тізбектерінің ажыратылуы айырмашылығы бір нуклеотид болатын фрагменттерді ажырата алатын жіңішке полиакриламидті гелде жасалады. Авторадиограммадан алынған тізбек төменнен жоғары қарай оқылады.