Микробиология коринебактериозов

Содержание

Слайд 2

Дифтерия – острое инфекционное заболевание, характеризующееся воспалением воздухоносных путей, реже кожных

Дифтерия – острое инфекционное заболевание, характеризующееся воспалением воздухоносных путей, реже кожных

покровов, дегенерацией периферических нервов, сердечной мышцы и других тканей
Заболевание известно давно:
Аретей Каппадокийский (1 век до н/э) «злокачественные язвы на миндалинах, ведущие к удушению»
«гаратильо» - маленькая гаротта (устройство для удушения)
1883г. Т. Клебс – обнаружил МКО
1884г. Ф. Леффлер – выделил в чистом виде
Слайд 3

Corynebacteriaceae Corynebacterium C. Diphtheriae Непатогенные: ложнодифтерийные палочки и дифтероиды или коринеформные

Corynebacteriaceae
Corynebacterium
C. Diphtheriae
Непатогенные: ложнодифтерийные палочки и дифтероиды или коринеформные бактерии (широко распространены

в окружающей среде – воздухе, почве, пыли, воде, пищевых продуктах: молоке)
Слайд 4

Выделяют и от клинически здоровых лиц (со слизистой оболочки носоглотки, с

Выделяют и от клинически здоровых лиц (со слизистой оболочки носоглотки, с

эпителия влагалища, из ран)
Большинство организмов представлено организмами-комменсалами:
- C. pseudodiphtheriticum (палочка Хофмана)
C. хerosis
Вызывающими спорадические поражения
C. ulcerans, C. urealiticum
Слайд 5

Палочка Клебса-Леффлера: тонкие, слегка изогнутые или прямые палочки (3-6х0,3-0,5 мкм) полиморфны:

Палочка Клебса-Леффлера:
тонкие, слегка изогнутые или прямые палочки (3-6х0,3-0,5 мкм)

полиморфны: изогнутые, прямые, длинные, короткие, толстые, нитевидные, коккобактерии
на концах – утолщения (зерна волютина или Бабеша-Эрнста)
Окрашиваются основными анилиновыми
красителями
Гр+, окр. по Леффлеру (щелочной
метиленовый синий), по Нейссеру
Слайд 6

фимбрии – адгезия к эпителию слизистой в мазках расположены попарно, под

фимбрии – адгезия к эпителию слизистой
в мазках расположены попарно, под


острым или тупым углом, в виде
растопыренных пальцев, паркета
неподвижны
не имеют спор и капсул
Бактерии способны образовывать L- и фильтрующиеся формы
Слайд 7

Corynebacterium diphtheriae выделяют три биовара — gravis, mitis и intermedium Бактерии

Corynebacterium diphtheriae выделяют три биовара — gravis, mitis и intermedium

Бактерии биовара дифтерии gravis — короткие неправильной формы, с небольшим количеством метахроматических гранул.
• Биовар mitis - длинные изогнутые полиморфные палочки, содержащие много волютиновых зёрен
• биовар inmtermedius наиболее крупные, с бочковидными очертаниями; характерны поперечные перегородки, разделяющие клетку на несколько сегментов
В настоящее время биовар дифтерии intermedius относят в группу gravis
Слайд 8

Культуральные свойства : 36-37 °С рН 7.4-8,0 Питательные среды содержат ростовые


Культуральные свойства :
36-37 °С
рН 7.4-8,0
Питательные среды содержат

ростовые факторы: аминокислоты, витамины, ионы металлов (Са2+, Mg2+ Fe2+ и др.)
На сывороточных средах (например, среде Лёффлера) дают рост уже через 10-12 ч; за это время контаминирующая микрофлора не успевает развиться
осн. Среды: ср. Бучина, ср. Тинсдаля, ср. Клауберга (сыв-ку+ТеК)
Слайд 9

Наибольшее распространение получили среды с теллуритом, так как возбудитель резистентен к


Наибольшее распространение получили среды с теллуритом, так как возбудитель

резистентен к высоким концентрациям теллурита калия или натрии, ингибирующим рост сопутствующей микрофлоры
На ср. с теллуритом - серовато-чёрные колонии в результате восстановления теллурита до металлического теллура, аккумулирующегося внутри бактерий
В жидких средах образуют помутнение и осадок; их образование и характер варьируют у различных биоваров
Слайд 10

Биовар gravis растет в виде крупных колоний 2-3 мм, R-форме Mitis - небольших, гладких, S-формы


Биовар gravis растет в виде крупных колоний 2-3 мм, R-форме
Mitis

- небольших, гладких, S-формы
Слайд 11

Культуральные особенности биоваров дифтерии


Культуральные особенности биоваров дифтерии

Слайд 12

Биохимическая активность сбраживает с образованием кислоты глюкозу, мальтозу, галактозу, декстрин не


Биохимическая активность
сбраживает с образованием кислоты глюкозу, мальтозу, галактозу, декстрин

не разлагает сахарозу, лактозу, маннит
Способность разлагать крахмал и гликоген варьирует у различных штаммов
Дифтерийная палочка не гидролизует мочевину и не образует индол
Отсутствие способности ферментировать сахарозу, разлагать мочевину и способность разлагать цистин — дифференцирующий признак, отличающий дифтерийную палочку от других коринебактерий
Дифтерийная палочка лизирует эритроциты морской свинки и кролика
Слайд 13

Дифтерийная палочка образует бактериоцины (корицины), обладающие узким спектром действия Гены, кодирующие синтез бактериоцинов, передаются плазмидами


Дифтерийная палочка образует бактериоцины (корицины), обладающие узким спектром действия
Гены,

кодирующие синтез бактериоцинов, передаются плазмидами
Слайд 14

Факторы патогенности: адгезины каталазу гиалуронидазу нейраминидазу ДНКазу фибринолизин корд-фактор – нарушает


Факторы патогенности:
адгезины
каталазу
гиалуронидазу
нейраминидазу
ДНКазу
фибринолизин
корд-фактор –

нарушает фосфорилирование и дыхательные процессы в кл-ке
экзотоксин — основной фактор патогенности
Нетоксигенные штаммы дифтерии не вызывают развитие заболевания
В чистом виде токсин впервые получили Э. Ру и А. Иерсен (1888)
Слайд 15

экзотоксин — проявляет все свойства экзотоксина (термолабильный, высокотоксичный, иммуногенный белок, нейтрализуемый


экзотоксин — проявляет все свойства экзотоксина (термолабильный, высокотоксичный, иммуногенный

белок, нейтрализуемый антитоксической сывороткой)
его образуют фрагменты А (проявляет ферментативную активность) и В (взаимодействует с клеточными рецепторами, облегчая проникновение фрагмента А)
Клетки всех чувствительных организмов способны рецептировать В-фрагмент и поглощать молекулу посредством эндоцитоза
В кислой среде эндосом (фаголизосом) дисульфидные связи, объединяющие оба компонента, разрушаются, фрагмент В взаимодействует с мембраной эндосомы, облегчая проникновение фрагмента А в цитоплазму
Слайд 16

Токсин ингибирует белковый синтез, в т. ч. в миокарде, приводя к


Токсин ингибирует белковый синтез, в т. ч.
в миокарде,

приводя к структурным и функциональным нарушениям, способным вызвать лет исход
надпочечниках
нервных ганглиях – действуя на нервную ткань, токсин приводит к демиелинизации нервных волокон, что приводит к параличам и парезам
Слайд 17

Способность к токсинообразованию проявляют лишь лизогенные штаммы Corynebacterium diphtheriae, инфицированные бактериофагом,


Способность к токсинообразованию проявляют лишь лизогенные штаммы Corynebacterium diphtheriae, инфицированные

бактериофагом, несущим ген tox, кодирующий структуру токсина дифтерии
Переход умеренного фага в литическую форму мало влияет на синтез токсина
Слайд 18

Активность токсина 1 ЕД Dlm дифтерийного токсина равна наименьшей концентрации, убивающей


Активность токсина
1 ЕД Dlm дифтерийного токсина равна наименьшей концентрации, убивающей

морскую свинку массой 250 г на 4-5-е сутки (около 0,25-0,1 мкл)
Дифтерийный экзотоксин малоустойчив, быстро разрушается под влиянием t, света, О2 воздуха
После добавления к токсину формалина, выдерживания при t 38-40 °С в теч 3-4 нед, он переходит в анатоксин
Для получения анатоксина используют штамм PW-8 либо его варианты — «Массачусетс», «Торонто» и др.
Слайд 19

Антигенная структура О- и К- антигены ( Аг ) О-антиген -


Антигенная структура
О- и К- антигены ( Аг )
О-антиген -

Липидные и полисахаридные термолабильные фракции преимущественно представлены межвидовыми антигенами
К-антигены - Поверхностные термолабильные (нуклеопротеиды, белки) обеспечивают видовую специфичность и проявляют выраженную иммуногенность.
С помощью анти-К-сывороток дифтерийные бактерии разделяют на серологические варианты (около 58)
Биовар mitis включает 40 сероваров
gravis — 14
intermedius — 4
Слайд 20

В отечественной практике используют диагностические агглютинирующие, неадсорбированные сыворотки; в том числе


В отечественной практике используют диагностические агглютинирующие, неадсорбированные сыворотки; в том

числе полигрупповые и к сероварам для РА на стекле и в пробирках
Слайд 21

Среди коринебактерий различают 19 фаговаров, что учитывается при идентификации культур


Среди коринебактерий различают 19 фаговаров, что учитывается при идентификации культур

Слайд 22

Резистентность: При комнатной температуре во влажной атмосфере сохраняется долго При 60


Резистентность:
При комнатной температуре во влажной атмосфере сохраняется долго
При

60 °С отмирает в течение 10 мин
в высушенных плёнках выдерживает температуру 98 ºС в течение 1 ч
при комнатной температуре сохраняется до 7 мес.
На игрушках сохраняется до 2 нед
в пыли — до 5 нед
в воде и молоке — до 6-20 сут
на рассеянном свету жизнеспособны до 8 ч.
Дезинфектанты и антисептики инактивируют возбудителя в течение 5-10 мин.
Слайд 23

Резервуар: человек (больной, реконвалесцент, бактерионоситель); наибольшую эпидемическую опасность представляют больные лица


Резервуар:
человек (больной, реконвалесцент, бактерионоситель); наибольшую эпидемическую опасность представляют больные

лица
Реконвалесценты выделяют дифтерийную палочку в течение 15-20 сут.
путь передачи
аэрогенный (воздушно-капельный)
Контактный (через предметы, инфицированные пищевые продукты (обычно молоко)
Слайд 24

Патогенез Входные ворота— слизистые оболочки носоглотки, иногда глаз, половых органов (у

Патогенез
Входные ворота— слизистые оболочки носоглотки, иногда глаз, половых органов (у

женшин), повреждённые кожные покровы
Дифтерийная палочка колонизирует ткани в месте внедрения, вызывая развитие местного фибринозного воспаления
При этом тип воспаления зависит от строения слизистых оболочек:
Например, в однослойном цилиндрическом эпителии дыхательных путей формируется крупозное воспаление,
на многослойном плоском эпителии образуется жёлто-серая фибринозная плёнка, плотно спаянная с прилежащими тканями: состоит из разрушенного эпителия, фибрина, лейкоцитов, бактерий (дифтеритическое воспаление)
При ее снятии – слизистая кровоточит
Слайд 25

В процессе размножения бактерии в некротических участках накапливается экзотоксин, что приводит

В процессе размножения бактерии в некротических участках накапливается экзотоксин, что приводит

к отеку слизистой. Разрастание плёнок и переход процесса на воздухоносные пути могут вызвать асфиксию
Системные проявления обусловлены действием токсина, поражающего нервную систему (преимущественно периферические симпатические узлы), сердце и сосуды, надпочечники и почки
Ферменты дифтерии (гиалуронидаза, нейраминидаза, фибринолизин) обеспечивают проникновение возбудителя в различные ткани, включая кровоток. Однако (в отличие от токсинемии) бактериемия клинически не проявляется
Слайд 26

Клиника инкубационный период - 2-12 сут. период манифестных проявлений фибринозного процесса

Клиника
инкубационный период - 2-12 сут.
период манифестных проявлений фибринозного процесса и

ранних токсических осложнений (первые 5-10 сут)
период поздних токсических осложнений (не обязательный, с 10-12 сут до 6 нед),
период реконвалесценции (2-3 мес после исчезновения проявлений).
В зависимости от локализации дифтерии выделяют
поражения ротоглотки (наиболее часто),
дыхательных путей, носа и
редкой локализации (глаза, наружные половые органы, кожа, раневые поверхности)
Слайд 27

Синдром интоксикации Синдром местного фибринозного воспаления - в ротоглотке в гортани

Синдром интоксикации
Синдром местного фибринозного воспаления
- в ротоглотке
в

гортани
при дифтерии кожи и половых органов
Слайд 28

Иммунитет антитоксический и антибактериальный (15% населения) у грудных детей – пассивный

Иммунитет
антитоксический и антибактериальный (15% населения)
у грудных детей –

пассивный иммунитет
постифекционный иммунитет нестойкий (6-7% повторное заболевание)
Слайд 29

Профилактика - ранняя диагностика Изоляция Дезинфекция выявление носителей Специфическая профилактика

Профилактика
- ранняя диагностика
Изоляция
Дезинфекция
выявление носителей
Специфическая профилактика

Слайд 30

Специфическая профилактика: Анатоксин АКДС – комплексная ассоциированная комбинированная вакцина: дифтерийный анатоксин

Специфическая профилактика:
Анатоксин
АКДС – комплексная ассоциированная комбинированная вакцина:
дифтерийный анатоксин
столбнячный

анатоксин
взвесь убитых коклюшных палочек
вакцинируют детей с 3-х мес возраста с последующей ревакцинацией
Для ревакцинации вводят АДС
Слайд 31

Наличие антитоксического иммунитета Определяется наличием защитных АТ к дифтерийному токсину в

Наличие антитоксического иммунитета
Определяется наличием защитных АТ к дифтерийному токсину в

РНГА
ранее ставилась р. Шика 1/40 DLM в 0,2 мл NaCl в/к в область предплечья, ч/з 24-48 час – гиперемия, припухлость (2 см в d) – при отсутствии в крови антитоксина, при его наличии реакция – (р. нейтрализации)
Слайд 32

Лечение 1. основу специфической терапии составляет противодифтерийная лошадиная сыворотка (антитоксин), содержащая

Лечение
1. основу специфической терапии составляет противодифтерийная лошадиная сыворотка (антитоксин), содержащая не

менее 2000 МЕ/1мл, в/м в дозах, соответствующих тяжести заболевания
вводят дробно

1895г.

Слайд 33

Лечение 2. Параллельно антимикробные препараты (цефалоспорины, аминогликозиды) 3. Симптоматическая терапия

Лечение
2. Параллельно антимикробные препараты (цефалоспорины, аминогликозиды)
3. Симптоматическая терапия

Слайд 34

Материал исследования:

Материал исследования:

Слайд 35

Методы исследования: Микроскопический Микробиологический (положителен в 50-70%) биологический

Методы исследования:
Микроскопический
Микробиологический (положителен в 50-70%)
биологический

Слайд 36

Работа в ламинарном боксе


Работа в ламинарном боксе

Слайд 37

Работа в ламинарном боксе


Работа в ламинарном боксе